Terapia genică AAV28-humanFOXP3 arată o eficacitate robustă anti-ateroscleroză la șoareci LDLR-KO
Abstract
fundal
Inflamația este acum cunoscută a fi un proces cheie de reglare, care este un numitor comun printre mai mulți factori de risc pentru ateroscleroză, în plus față de biologia arterială însoțitoare și asociată [1, 2]. Mai mult, se pare că atât brațele înnăscute, cât și cele adaptive ale sistemului imunitar pot fi, de asemenea, implicate în această tendință inflamatorie generală, care este implicată în ateroscleroză [3-7]. Am efectuat diverse studii terapeutice genetice bazate pe virusul adeno-asociat (AAV) într-un model animal de ateroscleroză (șoareci knock-out cu receptor de lipoproteine cu densitate scăzută în dieta cu colesterol ridicat, LDLR-KO HCD), către obiectivul specific de reglare starea celulelor imune arteriale se infiltrează cu citokine imuno-supresive și gene chemochine chemo-atractive/leucocitare și astfel inhibă ateroscleroza [8-15].
Recent am publicat un studiu care a demonstrat că livrarea genică sistemică AAV/Netrin1 a fost capabilă să inhibe ateroscleroza la șoarecii LDLR-KO de pe HCD [13]. Acest lucru a fost demonstrat prin măsurători cu ultrasunete de înaltă rezoluție (HRUS) ale secțiunii transversale a lumenului aortic, grosimea peretelui și viteza sanguină sistolică. Toate aceste măsurători au indicat faptul că livrarea genei Netrin1 a dus la ateroscleroză semnificativ mai mică. Cu toate acestea, la analiza expresiei diferitelor gene prin Q-PCR, am constatat că atât expresia Forkhead box P3 (FOXP3), cât și expresia CD25 au fost puternic reglementate în sus la animalele tratate cu AAV/Netrin1 [13]. Desigur, atât FOXP3, cât și CD25 sunt markeri distinctivi ai celulelor T reglatoare (Treg). Cu toate acestea, mecanismul exact prin care FOXP3 și CD25 sunt reglate în sus de Netrin1 în aortele contestate cu HCD rămâne de determinat.
Dintre aceste două gene, FOXP3, în special, factorul principal de transcripție a celulelor T reglatoare (Treg), este fascinant ca genă terapeutică, deoarece fenotipul Treg este legat de expresia FOXP3, iar Treg afectează atât imunitatea înnăscută, cât și adaptarea [3-7 ]. Este inducerea genei FOXP3 care are ca rezultat conferirea unei funcții imunosupresoare celulelor precursoare Treg, iar îndepărtarea expresiei aceleiași gene în celulele Treg mature are ca rezultat pierderea identității descendenței Treg și o reducere marcată a proprietăților imunosupresoare [16]. –19]. Aici caracterizăm efectul livrării genei umane (h) FOXP3 pe bază de AAV, prin injectarea sistemică a venei cozii, pentru a inhiba ateroscleroza în modelul animal LDLR-KO/HCD. În acest studiu, folosim transgena FOXP3 umană mai degrabă decât versiunea mousep (m) Foxp3, deoarece proteinele hFOXP3 și mFOXP3 sunt omologe în proporție de 86%, iar utilizarea versiunii umane ne aduce potențial cu un pas mai aproape de studiile clinice.
Metode
Declarație de etică
Toate procedurile experimentale au fost efectuate în conformitate cu protocoalele aprobate de Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor din sistemul central de cercetare și dezvoltare a veteranilor din Arkansas Central, la Little Rock. Proiectul a fost finanțat printr-o subvenție pentru revizuirea meritelor administrată de veterani către PLH.