Granula Shuangyu Tiaozhi atenuează hipercolesterolemia prin reducerea colesterolului
1 Universitatea de Medicină Tradițională Chineză Shandong, Jinan 250000, China
2 Departamentul de Neurologie, Spitalul Afiliat al Universității de Medicină Tradițională Chineză Shandong, Jinan 250011, China
Abstract
1. Introducere
Hipercolesterolemia, o boală anormală a metabolismului lipidic, este principalul factor de risc în generarea și dezvoltarea bolilor coronariene (CHD) [1, 2]. În special, concentrația ridicată de colesterol lipoproteic cu densitate redusă (LDL-C) circulantă este adesea asociată cu apariția infarctului miocardic [3]. Conform studiilor recente, boala coronariană ca epidemie globală de boli netransmisibile este principala cauză de deces [4], iar rata mortalității bolii cardiovasculare în China a crescut de la 16% la 24% în zece ani [5, 6]. În plus, hipercolesterolemia este, de asemenea, legată de berze [7], de boala hepatică grasă nealcoolică (NAFLD) [8] și de supraponderalitatea [9].
Sursele de colesterol la mamifere sunt biosinteza de novo din acetil-CoA, endocitoza mediată de receptorul LDL (LDLR) din plasmă și absorbția din dietă, în care 70% până la 80% din colesterol este sintetizat de ficat in vivo [10]. 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA reductaza (HMGCR) ca enzimă care limitează rata, precum și ținta de reglare a feedback-ului catalizează HMG-CoA în mevalonat, care este pasul cheie al sintezei colesterolului. Mai mult, transcrierea genei HMGCR este reglementată de proteina 2 care leagă elementul de reglare a sterolului (SREBP-2), care este un factor principal de transcripție nucleară [11]. Conform ghidurilor clinice, statinele care vizează reducerea sintezei colesterolului sunt recomandate ca tratament de primă linie la pacienții cu CHD cauzată de creșterea colesterolului, în special a nivelurilor LDL-C [12, 13]. Cu toate acestea, chiar și terapia cu statine de intensitate moderată sau ridicată face, de asemenea, 20% dintre pacienți obiectivul tratamentului LDL-C de atingere a -1 [14]. Și costurile terapiei și efectele secundare nu pot fi ignorate [15, 16]. Prin urmare, este urgent să se concentreze hotspot-ul de cercetare pe căutarea unor medicamente noi, sigure și eficiente care scad colesterolul.
Medicina tradițională chineză (TCM) cu multitarget și multipathway are un avantaj pentru tratarea cursurilor complexe de boli [17, 18]. Granula Shuangyu Tiaozhi (STG) compusă din Shuyu și Bixie derivă din decoctul Huazhuo Xingxue care a fost utilizat pentru scăderea nivelului lipidelor în clinică. Studiile noastre anterioare au arătat că STG poate reduce nivelul lipidelor serice la pacienții cu hipercolesterolemie [19]. În prezentul studiu, ne propunem să investigăm dacă efectul diferitelor doze și timpii de tratament ai STG, o rețetă tradițională chineză, asupra greutății corporale, a lipidelor serice și a nivelului colesterolului hepatic este prin reglarea căii de sinteză a colesterolului și a absorbției colesterolului mediată de LDLR dietă cu colesterol ridicat (HC) alimentată cu șobolani.
2. Materiale și metode
2.1. Animale
Cincizeci de șobolani masculi Sprague Dawley (SD), în vârstă de 6 săptămâni, cu o greutate cuprinsă între 160 g și 180 g au fost achiziționați de la Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd (Beijing, China). Șobolanii au fost adăpostiți într-un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore la o temperatură controlată (23 ± 2 ° C) într-un mediu de umiditate de 50-60%. Și tuturor șobolanilor li s-a permis accesul gratuit pentru a achiziționa energie și apă potabilă. Toate experimentele au fost efectuate în conformitate cu Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator și aprobat de Comitetul de etică al Universității de Medicină Tradițională Chineză din Shandong.
2.2. Pregătirea STG
Componentele STG includ 60 g de Shuyu (Rhizoma Dioscoreae) și 18 g de Bixie (Dioscoreae Spongiosae Rhizoma). Iar granulele concentrate pe bază de plante (1 g granule concentrate = 20 g bucăți din plante chinezești) au fost furnizate de Jiangyin Tian Jiang Pharmaceutical Co., Ltd. (Jiangsu, China), și au fost identificate de Prof. Feng Li de la Colegiul de Farmacie, Universitatea de Medicină Tradițională Chineză din Shandong. Pentru in vivo studii, STG a fost livrat la Beijing Keaoxieli Feed Co., Ltd. (Beijing, China) pentru a adăuga 5% (g/g) sau 10% (g/g) STG la dieta HC (Tabelul 1).
2.3. Inducerea hipercolesterolemiei și tratamentul medicamentos
După adaptarea la mediu timp de 1 săptămână, toți șobolanii au fost hrăniți cu dietă generală sau dietă HC (Beijing Keaoxieli Feed Co., Ltd., Beijing, China) timp de 4 săptămâni. În multe studii anterioare, nivelul lipidelor serice al tuturor șobolanilor a crescut după ce a fost hrănit cu dietă HC timp de 4 săptămâni [20]. Toți șobolanii experimentali au fost împărțiți în mod aleatoriu în 5 grupuri (n = 10 per grup): grup de dietă generală (control), grup de dietă HC (HC), dietă HC suplimentată cu grup STG cu doză mare (10% (g/g) STG, HSTG), dieta HC suplimentată cu grupul STG cu doză mică (5% (g/g) STG, LSTG) și dieta HC suplimentată cu grupul simvastatină (simvastatină). În special, grupul de simvastatină a fost administrat prin intragastric de simvastatină (dizolvat în soluție salină la o doză de 4 mg · kg -1 -1 d -1, Hangzhou Moshadong Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, China). Greutatea corporală a șobolanilor a fost măsurată regulat la fiecare două săptămâni și doza de simvastatină a fost ajustată în funcție de greutatea șobolanilor. După ce au fost tratați cu STG sau simvastatină timp de 4 sau 8 săptămâni, șobolanii au fost sacrificați pentru a colecta probe de sânge și ficat. O parte din țesutul hepatic a fost fixată în paraformaldehidă 4% pentru colorarea hematoxilinei și eozinei (H&E) și imunohistochimie, iar partea rămasă a fost congelată în azot lichid și apoi depozitată la -80 ° C până la o analiză ulterioară.