O diferență în compoziția acizilor grași a dietelor izocalorice bogate în grăsimi modifică flexibilitatea metabolică în

Afiliere Fiziologie umană și animală, Universitatea Wageningen, Wageningen, Olanda

Departamentul de afiliere pentru biologia țesutului adipos, Institutul de fiziologie al Academiei de Științe din Republica Cehă v.v.i., Praga, Republica Cehă

Afiliere Fiziologie umană și animală, Universitatea Wageningen, Wageningen, Olanda

Departamentul de afiliere pentru biologia țesutului adipos, Institutul de fiziologie al Academiei de Științe din Republica Cehă v.v.i., Praga, Republica Cehă

Afiliere Fiziologie umană și animală, Universitatea Wageningen, Wageningen, Olanda

Loes P. M. Duivenvoorde,
Evert M. van Schothorst,
Hans M. Swarts,
Ondrej Kuda,
Esther Steenbergh,
Sander Termeulen,
Jan Kopecky,
Jaap Keijer

Cifre

Abstract

Citare: Duivenvoorde LPM, van Schothorst EM, Swarts HM, Kuda O, Steenbergh E, Termeulen S, și colab. (2015) O diferență în compoziția acizilor grași a dietelor bogate în grăsimi isocalorice modifică flexibilitatea metabolică la șoarecii masculi C57BL/6JOlaHsd. PLoS ONE 10 (6): e0128515. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0128515

Editor: Marià Alemany, Facultatea de Biologie, SPANIA

Primit: 10 noiembrie 2014; Admis: 29 aprilie 2015; Publicat: 22 iunie 2015

Disponibilitatea datelor: Toate datele relevante se află în hârtie și în fișierele sale de informații de suport.

Finanțarea: Această activitate a fost susținută de al șaptelea program-cadru al Uniunii Europene FP7 2007-2013 în temeiul acordului de subvenționare nr. 244995 (Proiect BIOCLAIMS). Finanțatorii nu au avut niciun rol în proiectarea studiului, colectarea și analiza datelor, decizia de publicare sau pregătirea manuscrisului.

Interese concurente: Autorii au declarat că nu există interese concurente.

Introducere

Prima dietă (dieta HFpu) este o dietă HF standardizată care a fost utilizată în mai multe studii anterioare [9, 26-28] și conține în principal PUFA în fracțiunea grasă. A doua dietă (dieta HF) este identică cu dieta HFpu, cu excepția fracțiunii de grăsime care conține în principal acizi grași saturați din uleiul de palmier. Uleiul de palmier este constituentul dominant al grăsimilor în majoritatea dietelor experimentale cu HF la rozătoare și este din ce în ce mai răspândit în produsele alimentare umane. Deși dieta HFpu conține mult mai multe PUFA, raportul dintre n-6 FA și n-3 FA a fost păstrat similar între ambele diete.

Flexibilitatea metabolică a fost măsurată cu un test de provocare invaziv și două neinvazive. Testul oral de toleranță la glucoză (OGTT) este un test de provocare invaziv care monitorizează eliminarea homeostatică a glicemiei ca răspuns la o provocare a glucozei. Cele două provocări neinvazive au fost monitorizate cu calorimetrie indirectă în loc de prelevare de probe de sânge. Testele de provocare bazate pe calorimetrie indirectă sunt potrivite pentru a evalua flexibilitatea metabolică, deoarece calorimetria indirectă afișează direct amploarea și timpul de schimbare a substratului. Pentru acest studiu, am folosit calorimetrie indirectă pentru a monitoriza răspunsul la o provocare nutrițională, la o provocare de post și re-hrănire și la o provocare de mediu, o reducere ușoară a disponibilității oxigenului (OxR: [O2] = 12% vs. 21% în normoxie). Utilizarea alimentelor ca provocare va viza o gamă mai largă de procese decât în timpul OGTT și, prin urmare, oferă o reflectare mai largă a sensibilității metabolice. OxR forțează utilizarea căilor metabolice care facilitează adaptarea la scăderea disponibilității oxigenului și, astfel, vizează în mod direct flexibilitatea. Greutatea corporală, adipozitatea, sănătatea ficatului și a țesutului adipos, precum și nivelul hormonului circulant și al adipokinei au fost, de asemenea, monitorizate în timpul experimentului pentru a evalua starea de sănătate metabolică.

Materiale și metode

Animale și manipulări experimentale

Conținutul de macronutrienți al dietei HF a fost asociat cu conținutul de macronutrienți al dietei HFpu, care este o dietă standardizată bogată în grăsimi pe care am folosit-o și în studiile anterioare [26]. Dietele diferă doar prin cantitatea și tipul de ulei alimentar care a fost adăugat pentru a obține două diete izocalorice cu 40% energie din grăsimi. Profilul cu acizi grași din uleiurile alimentare utilizate a fost derivat din baza de date națională a nutrienților USDA pentru referințe standard [32].

WAT și histologie hepatică și densitate mitocondrială

Densitatea mitocondrială în eWAT a fost determinată ca un indicator al sănătății WAT. Raportul dintre ADN mitocondrial și ADN nuclear a fost măsurat cu transcripție inversă cantitativă în timp real PCR (RT-qPCR), așa cum a fost publicat [36] și cu modificările descrise [10]. Pe scurt, ADN-ul total a fost extras din eWAT omogenizat prin digestie cu Proteinaza K (Sigma-Aldrich, St Louis, SUA) într-un tampon de liză (50 mM Tris-HCL, pH 7,5, 0,5% (g/v) SDS și 12,5 mM EDTA, pH 8,0) și ARNaza A (Sigma-Aldrich). Probele au fost apoi centrifugate, după care faza apoasă a fost amestecată și extrasă cu fenol-cloroform-izoamilalcool și de două ori cu cloroform. ADN-ul a fost precipitat cu 96% (v/v) etanol și acetat de sodiu (3M, pH 5,2), s-a spălat cu etanol rece 70% (v/v), s-a uscat la aer și a fost resuspendat în 10 μl de apă RNAse fără ADN. Calitatea și cantitatea de ADN din fiecare probă au fost analizate cu Nanodrop (IsoGen Life Science, Maarssen, Olanda) și fiecare probă a fost diluată la aceeași concentrație de ADN de 100 ng μL -1 .