Efectul protector al inhibării angiotensinei II pe termen lung American Journal of Physiology-Heart and
Abstract
procesul natural de îmbătrânire este legat de o modificare progresivă și, în cele din urmă, de o pierdere a funcției organelor. Aceste modificări sunt comune tuturor speciilor. În general, există o corelație între schimbările structurale și funcționale asociate cu îmbătrânirea. La mamifere, procesele degenerative, cum ar fi arterioscleroza, dezvoltarea plăcilor senile în creier și înlocuirea parenchimului funcțional cu țesut fibroconectiv într-o varietate de organe sunt considerate manifestări ale îmbătrânirii (19, 41).
Ultrastructural, o reducere a numărului de organite celulare, cum ar fi mitocondriile, este frecventă în procesul de îmbătrânire (13, 21, 36). Producția de radicali liberi pe tot parcursul vieții ar putea juca un rol major în reducerea numărului și în modificările mitocondriilor structurale și funcționale (6, 20, 38). S-a postulat pe scară largă că speciile reactive de oxigen (ROS) sunt implicate cauzal în procesul de îmbătrânire (19, 20). În acest sens, datele anterioare (4, 17) au confirmat că activitatea oxidului nitric sintază (NOS) în producția de aortă și oxid nitric (NO) scade odată cu înaintarea în vârstă, în timp ce administrarea cronică pe termen lung a inhibitorilor de angiotensină II (ANG II) menține activitate endotelială NOS la animale vechi. Mai mult, mitocondriile din inimile șobolanilor în vârstă tratați cronic cu inhibitori ANG II s-au dovedit a avea o activitate NOS crescută și a scăzut formarea de peroxid de hidrogen în comparație cu martorii (10).
Sistemul renină-angiotensină (RAS) prin agentul său activ ANG II are o mare varietate de acțiuni fiziologice care includ reglarea tensiunii arteriale, homeostazia sodiului și a apei și stimularea altor sisteme endocrine. Unele dintre acțiuni sunt exercitate ca un sistem endocrin. În ultimele decenii, o cantitate vastă de informații a descoperit o multitudine de efecte cardiovasculare și renale dăunătoare atribuite excesului de ANG II. Această peptidă este acum cunoscută ca acționând ca un factor paracrin, autocrin și intracrin, ale cărui mecanisme de acțiune variază de la excitație sau leziuni ale organelor întregi pentru a influența creșterea și funcția celulară, modificări ale căilor de semnalizare intracelulară și promovarea modificărilor matricei extracelulare. Recent, efectele dăunătoare ale ANG II în inimă au fost legate de activarea proteinei adaptor p66 Shc (18).
În ultimii ani am investigat efectele dăunătoare datorate îmbătrânirii asupra organelor țintă la șobolanul mascul normal Wistar. În același timp, am analizat efectul protector al inhibiției cronice a ANG II fie cu un CEI (enalapril), fie cu un AT1RB (losartan), administrat de la înțărcare, asupra acestor modificări. Rezultatele prezente descriu modificările cardiovasculare cauzate de îmbătrânirea la șobolanul normal și efectul protector observat în acest sistem datorită inhibării pe termen lung a ANG II cu fiecare dintre acești agenți farmacologici. Mai mult, am determinat și influența fiecărui tratament asupra duratei de viață la șobolanul normal.
Șobolani și design experimental pentru tratamente medicamentoase
Șobolanii masculi Wistar au fost folosiți și au primit îngrijire în conformitate cu și sub o licență acordată de Comitetul nostru instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor și în conformitate cu Ghid pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator (National Institutes of Health, revizuit în 1996). Animale ( = 120) au fost împărțite la întâmplare în trei grupe egale după înțărcare: 1) control (apă de la robinet pentru a bea), 2) losartan (30 mg · kg −1 · zi −1 în apa potabilă) și 3) enalapril (10 mg · kg -1 -1 zi -1) (ambele medicamente de la Merck, Rahway, NJ). Șobolanii au fost adăpostiți în grupuri de câte cinci pe cușcă, cu un ciclu de lumină-întuneric de 12: 12 ore și un interval de temperatură de 20-22 ° C. Chow-ul de șobolan și materialul de băut erau disponibile gratuit.
Măsurarea tensiunii arteriale sistolice și greutatea cardiacă și aortică
Tensiunea arterială sistolică (SBP) a fost măsurată o dată pe lună pe întreaga perioadă experimentală la șobolanii conștienți la 30 ° C prin pletismografie cu coș-manșetă folosind un traductor de presiune (Narco Biosystems, Houston, TX) conectat la un osciloscop. Aportul de apă și greutatea corporală au fost determinate de două ori pe săptămână pentru a ajusta administrarea medicamentului. După 6 luni de tratament, 10 animale din fiecare grup au fost ucise sub anestezie pentobarbitală (40 mg/kg). În mod similar, după 18 luni, 10 șobolani din fiecare grup au fost uciși. Inima, aorta și artera mezenterică au fost excizate, curățate și cântărite. După îndepărtarea atriilor, ventriculul drept a fost separat și cântărit.
Lungimea cozii
Lungimea cozii ca măsură a creșterii (14) a fost măsurată cu o riglă metrică standard de la anusul animalului până la vârful cozii de către același experimentator pentru a asigura uniformitatea.
Evaluarea histologică
Ventriculul stâng și aceeași porțiune a aortei toracice au fost izolate, păstrate în 10% formaldehidă și încorporate în parafină pentru determinări histologice. Secțiunile histologice au fost colorate cu hematoxilină-eozină și tricromul lui Masson. Colagenul de tip III a fost, de asemenea, evaluat prin imunohistochimie (IHC) în ventriculul stâng. A fost cuantificat cu anticorpi monoclonali anti-colagen de tip III (Biogenex, San Ramon, CA), la o diluție de 1: 100. Lățimea aortică a fost evaluată prin IHC folosind anticorpi monoclonali α-actinici (Sigma, St. Louis, MO).
Analizele morfometrice au fost efectuate în ambele țesuturi; acestea au inclus diametrul transvers al cardiomiocitului și lățimea vasului. Au fost realizate douăzeci de secțiuni histologice din fiecare organ și s-au analizat 10 structuri vasculare pe secțiune histologică.
Secțiunile histologice au fost analizate cu un microscop cu lumină Nikon E400 (Nikon Instrument Group, Melville, NY). Pentru evaluare a fost utilizat software-ul Image-Pro Plus 4.5.1.29 (Media Cybernetics, Silver Spring, MD) 1) lățimea aortică și zona aortică, 2) diametrul miocardiocitelor și aria secțiunii transversale și 3) fibroza subendocardică și subpericardică.
Un singur investigator orbit de grupurile experimentale a efectuat analizele.
Tehnici morfometrice
Lățimea aortică.
Secțiunea transversală a navei a fost măsurată cu o linie perpendiculară care merge de la perimetrul extern la interior. Datele obținute sunt exprimate în micrometri.
Zona aortică.
Au fost măsurate patru zone opuse ale aortei pe navă, excluzând adventitia. Datele obținute sunt exprimate în milimetri pătrați.