Tratamentul cu tamoxifen determină o rezistență precoce la insulină hepatică SpringerLink
Introducere
Tamoxifenul este utilizat pe scară largă ca tratament adjuvant eficient și pentru prevenirea cancerului de sân pozitiv la receptorii de estrogen [1]. Tamoxifenul scade aportul de alimente, greutatea corporală și (cel puțin pe termen scurt) masa de grăsime la rozătoare. În ciuda scăderii greutății corporale la femeile obeze, tamoxifenul poate crește incidența diabetului zaharat [2]. Acest efect secundar potențial a fost atribuit scăderii β-supraviețuirea și proliferarea celulelor, dar și steatoza hepatică la rozătoare [3]. Noi și alții am demonstrat recent că tamoxifenul afectează glucoza, metabolismul lipidic, modificările tranzitorii ale compoziției corpului care pot proveni din necroza țesutului adipos indusă de tamoxifen, urmată de recrutarea adipocitelor de novo și de redistribuirea grăsimilor, inclusiv acumularea de grăsime în ficat pe termen lung [3, 4]. Într-adevăr, dezvoltarea ficatului gras a fost observată încă la 3 luni de la inițierea tratamentului cu tamoxifen la femeile cu cancer de sân [5]. Cu toate acestea, mecanismele precise ale potențialelor efecte diabetogene ale tamoxifenului nu sunt încă pe deplin clare. Prin urmare, ne-am propus să elucidăm în mod sistematic dezvoltarea hiperglicemiei legate de tamoxifen utilizând cleme hiperinsulinemice - euglicemice.
Metode
Experimente pe animale
Toate studiile efectuate pe animale au fost aprobate de autoritățile locale ale statului Saxonia, Germania, după cum recomandă comitetul local de evaluare a eticii animalelor (Landesdirektion Leipzig, TVV21/12, T03/13 Germania). Șoareci femele C57BL/6NTac de 12 săptămâni ( = 8) au fost adăpostite într-un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore cu apă și alimente (chow standard, Sniff Spezialdiäten, Soest, Germania) ad libitum. Animalele au fost crescute și ținute în Laboratoarele de animale de la Universitatea din Leipzig. Tamoxifenul (Tam, Sigma - Aldrich, Taufkirchen, Germania, # T5648) a fost soluționat în ulei de trigliceride (Fagron, Barsbüttel, Germania, # 700.282) și a fost injectat intraperitoneal cu 1 mg pe zi în cinci zile consecutive. Controalele au fost injectate numai cu solvent. După 24 de zile de tratament Tam, cateterele au fost implantate în vena jugulară stângă. Au fost efectuate cleme hiperinsulinemice - euglicemice la patru șoareci femele din fiecare grup experimental, așa cum este descris [3]. Pe scurt, clema hiperinsulinemică - euglicemică a fost efectuată cu o perfuzie continuă de insulină umană la o rată de 20 mU/kg/min pentru a reduce nivelurile de glucoză plasmatică în intervalul fiziologic (
5 mmol/l). Concentrațiile de glucoză din sânge au fost menținute prin ajustarea ratelor de perfuzie a unei soluții de glucoză de 20%. Starea de echilibru a fost definită ca niveluri constante de glucoză timp de 20 min la o rată stabilă de perfuzie a glucozei (GIR), care a fost atinsă în intervalul 120-240 min. Starea de echilibru a fost menținută timp de 45 de minute, iar probele de sânge (10 μL) au fost prelevate la momentul inițial, la fiecare 5 minute și la fiecare 10 minute în timpul stării de echilibru. Toate perfuziile au fost aplicate folosind pompe de micro-dializă (TSE Systems, Chesterfield, MO, SUA). Producția de glucoză hepatică (HPG, mg × kg -1 -1 min min -1) a fost calculată ca diferență între rata de apariție a glucozei și rata de perfuzie a glucozei. Imediat după clemă, șoarecii au fost uciși prin luxație cervicală și ficat, au fost extrase și cântărite grăsimi subcutanate (SC), epigonadale (EPI) și intercapulare brune.
Înainte de efectuarea studiilor cu clamp, valorile glicemiei au fost determinate din probe de sânge venos integral folosind un analizor automat (COBAS 8000, Roche Diagnostics, Mannheim, Germania). Concentrațiile serice de insulină au fost măsurate prin ELISA utilizând standarde pentru șoareci, conform recomandărilor producătorului (Insulina ELISA; CrystalChem. Inc, Downers Grove, IL). Într-un al doilea subgrup de animale ( = 6 per grup de tratament), concentrațiile serice de trigliceride (TG), acizi grași liberi (FFA), colesterol total (Chol) și aspartat aminotransferază (AST) au fost analizate folosind analizorul modular COBAS 8000 (Roche Diagnostics, Mannheim, Germania).