Prevalența ridicată a autoanticorpilor la transglutaminaza tisulară la rudele de gradul I ale
Abstract
OBIECTIV—Pentru a determina gradul de autoimunitate celiacă la pacienții cu diabet zaharat de tip 1 și suprapunerea între autoimunitatea insulă și celiacă la rudele lor nondiabetice.
PROIECTAREA ȘI METODELE CERCETĂRII—Anticorpii IgA la transglutaminaza tisulară au fost determinați în ser prelevat de la 433 pacienți cu diabet zaharat de tip 1 și 1.442 de rude nediabetice de gradul I. Probele cu anticorpi transglutaminazici peste percentila 97,5 a 347 de școlari au fost, de asemenea, testați pentru anticorpii anti-endomiziali IgA (EMA). Markerii autoimunității insulelor (anticorpi ai celulelor insulinei și autoanticorpi împotriva insulinei, glutamatului decarboxilazei și proteinelor tirozin fosfatazei IA-2) au fost măsurați anterior la toate rudele.
REZULTATE—În absența bolii celiace cunoscute, prevalența nivelurilor de anticorpi transglutaminazici peste percentila 97,5 a elevilor a fost de 13,4% la pacienții diabetici și de 7,0% la rudele nediabetice. EMA au fost găsite în plus față de anticorpii transglutaminazici la 2,6% din probandi și la 1,9% din rudele de gradul I, dar niciunul dintre școlari. S-a constatat că anticorpii transglutaminazici persistă la 10 din 30 de pacienți și la 30 din 59 de rude cu probe de urmărire prelevate la cel puțin 2 ani după proba inițială. Din 186 de rude nediabetice cu autoanticorpi din insulă, doar 10 aveau și anticorpi transglutaminazici.
CONCLUZII—Am constatat o prevalență ridicată a autoimunității celiace la pacienții și rudele de gradul întâi ale copiilor cu diabet zaharat de tip 1, dar am găsit o suprapunere limitată între autoimunitate insulină și celiacă la rudele nediabetice. Prevalența ridicată a autoimunității celiace poate fi explicată prin susceptibilitatea genetică comună și identifică o populație în cadrul căreia screeningul pentru boală poate fi justificat.
Copiii și adulții cu diabet de tip 1 prezintă un risc crescut de boală celiacă (1-2), iar acest risc crescut poate fi parțial explicat de susceptibilitatea genetică comună, deoarece, deși sunt poligenice, ambele boli sunt asociate cu alelele HLA clasa II DQA1 * 0,501 și DQB1 * 0,201 (3). Diabetul de tip 1 și boala celiacă sunt ambele considerate ca origine autoimune și se crede că sunt precipitate de o interacțiune între factorii genetici și de mediu (4,5).
Atât diabetul de tip 1, cât și boala celiacă au un prodrom lung, timp în care pot fi detectați autoanticorpi către insuline sau antigene intestinale în circulație (6,7). Acești autoanticorpi pot fi utilizați pentru a identifica indivizii cu insuliță subclinică sau autoimunitate celiacă care prezintă un risc ridicat de a dezvolta boală (7,8). Anticorpii cu celule de insulă (ICA) (9) și anticorpii anti-endomiziali IgA (EMA) (7) sunt markeri sensibili ai diabetului de tip 1 și, respectiv, a bolii celiace, dar testele sunt intensive în muncă, subiective și dificil de standardizat. Testele pentru anticorpii la antigenul insulelor GAD, proteina tirozin fosfatază IA-2 și insulina au înlocuit în mare măsură testul ICA în screening-ul populațiilor mari pentru diabetul de tip 1 (8), deoarece acestea sunt mai ușor de standardizat și sunt mai potrivite pentru un randament ridicat . Identificarea recentă a antigenului endomizial major ca transglutaminază tisulară (tTG) (10) a permis dezvoltarea unor teste sensibile de mare viteză pentru anticorpi împotriva tTG adecvate pentru screening-ul populațiilor mari pentru boala celiacă (11-15).
Studiile efectuate pe diferite populații au constatat o prevalență relativ ridicată a EMA (16-20) și a anticorpilor tTG (21-23) la pacienții cu diabet zaharat de tip 1, ceea ce a sugerat că ar trebui să fie depistați activ pentru boala celiacă (24). Cu toate acestea, puține studii au investigat prevalența EMA la rudele pacienților cu diabet de tip 1. Boudraa și colab. (25) au găsit EMA la 5% din 381 de rude de gradul I ale pacienților cu diabet zaharat de tip 1 din Algeria de Vest. Mai recent, o prevalență crescută a autoimunității celiace a fost găsită la copiii cu părinți diabetici de tip 1 (26). Scopurile acestui studiu au fost, prin urmare: 1) să investigheze gradul de autoimunitate celiacă latentă sau subclinică la o populație europeană mare de copii diabetici de tip 1 și rudele lor de gradul I prin măsurarea anticorpilor IgA la tTG; și 2) pentru a determina gradul de suprapunere între autoimunitate insulară și celiacă, oferind astfel o indicație a măsurii în care aceste boli au o etiologie comună.
Proiectare și metode de cercetare
Anticorpii IgA la tTG au fost măsurați pe primul eșantion de ser disponibil din primele 500 de familii recrutate în studiul familiei Bart's Oxford, un studiu prospectiv bazat pe populație a probanților și rudelor copiilor diagnosticați cu diabet de tip 1 înainte de vârsta de 21 de ani în Oxford regiunea Regatului Unit (27). Probele au fost disponibile de la 433 probanzi diagnosticați între 1985 și 1992 (vârsta medie 12,2 ani, interval 0,8-22,4, 248 bărbați) și 1,442 rude nediabetice, inclusiv 410 tați (vârsta mediană 41 ani, interval 21,8-70,2), 461 mame 38,5 ani, interval 23,1-55,5), 273 frați (vârsta mediană 13,2 ani, interval 0-30,5) și 298 surori (vârstă mediană 13,1 ani, interval 0-26,2). Un istoric clinic al bolii autoimune a fost colectat de la fiecare familie la intrarea în studiu și actualizat prin vizitele lucrătorilor de teren sau a devenit un chestionar.
Seruri colectate de la școlari neselectați (vârsta medie de 11,3 ani, interval 9,0–13,8) care locuiesc și în regiunea Oxford din Marea Britanie. au fost utilizate pentru a defini pragurile pentru fiecare anticorp.
Analize
Strategie.
Anticorpii IgA împotriva tTG au fost măsurați pe toate probele de la probanzi și rude nediabetice. Acele probe care s-au dovedit a avea anticorpi tTG peste percentila 97,5 din 347 dintre școlari (vârsta medie 10,6 ani, interval 9,0-13,3) au fost analizate pentru EMA IgA. ICA și anticorpii împotriva GAD, IA-2 și insulină au fost măsurați anterior pe toate probele (28). Pentru a investiga modificările temporale ale nivelurilor de anticorpi, anticorpii tTG au fost măsurați în cel mai recent eșantion, prelevat cel puțin 2 ani după testarea inițială de la rudele și probanții cu anticorpi tTG peste percentila 97,5 a elevilor. Acele probe de urmărire cu anticorpi tTG crescute persistent au fost apoi testate pentru EMA.
Test pentru anticorpii transglutaminazici.
Anticorpii IgA la transglutaminaza tisulară au fost măsurați utilizând un test de legare radio care a fost descris anterior (15). Serul a fost incubat peste noapte cu transglutaminaza C a țesutului uman 35 S marcat in vitro transcris și tradus (primit de la Dr. E. Bonifacio), iar complexele imune IgA au fost apoi precipitate cu IgA anti-umane de oaie (anticorpi terapeutici, Llandysul, Ceredigion, REGATUL UNIT). După spălare și adăugare de scintilant (Microscint 40; Packard Instrument, Pangbourne, Berks, Marea Britanie), precipitatele au fost numărate într-un contor de scintilație (Topcount; Packard Instrument). Rezultatele au fost exprimate în unități arbitrare derivate dintr-o curbă standard. Standardele constau în diluții de ser prelevate de la un pacient cu boală celiacă cu ser uman normal pentru a acoperi intervalul de la 0,4 unități (1/512) la 100 de unități (1/2). Coeficientul de variație inter-test al testului anticorpului IgA-tTG a fost de 19% la 8 unități și 28% la 51 de unități.