Modificări ale consumului de grăsimi dietetice care modifică nivelurile plasmatice ale lipoproteinelor cu densitate scăzută oxidate și

De la Departamentul de Medicină Internă și Biocentru Oulu (M.-L.S., M.R., Y.A.K., S.H.), Universitatea din Oulu, Oulu, Finlanda; Institutul Național de Sănătate Publică (G.A., A.A.), Mannerheimintie, Helsinki, Finlanda; și Departamentul de Medicină (J.L.W.), Universitatea din California San Diego, La Jolla, California.

Vizualizați cea mai recentă versiune a acestui articol. Versiunile anterioare:

Abstract

Obiectiv- Pentru a evalua efectele modificărilor dietetice asupra lipoproteinelor oxidate cu densitate mică (LDL).

A existat un mare interes pentru agenții farmacologici și antioxidanți care scad oxidarea LDL in vitro 7-9 și scad ateroscleroza la modelele animale in vivo. 10 Datele la om, în primul rând cu vitamina E, au fost însă dezamăgitoare, deși motivele pentru aceasta au fost discutate recent. 11 Interesul sa concentrat, de asemenea, asupra agenților non-farmacologici și a antioxidanților, cum ar fi alimentele naturale, și capacitatea lor de a afecta oxidarea LDL. 12,13 Datele privind efectele dietelor întregi cu un aport ridicat de fructe și legume asupra oxidării LDL sunt limitate și contradictorii. 14-16

În studiul de față, am investigat modul în care modificările consumului alimentar de grăsimi, legume, fructe de pădure și fructe au afectat nivelurile plasmatice de antioxidanți și OxLDL. Am efectuat o intervenție dietetică încrucișată cu două diete, ambele cu un conținut scăzut de grăsimi dietetice, dar una cu un conținut scăzut de legume, iar cealaltă cu un conținut ridicat de legume, fructe de pădure și fructe, pentru a afla dacă un aport ridicat de antioxidanți naturali influențează nivelul plasmatic al OxLDL.

Metode

Subiecte

Am intervievat și examinat 86 de femei, dintre care 37 de voluntari sănătoși au fost selectați și au finalizat studiul. Criteriile de includere au fost: (1) indicele de masă corporală (IMC) 20 până la 29 kg/m 2; (2) glicemie de la 3,7 la 6,2 mmol/L; (3) colesterol plasmatic

figura 1. Proiectarea studiului.

Dietele

Lipide și lipoproteine plasmatice (a)

Concentrațiile plasmatice totale de triacilglicerol și colesterol au fost determinate enzimatic folosind un analizor de chimie clinică specifică (truse de Boehringer Mannheim, GmbH, Germania). Precipitarea plasmatică cu heparină - clorură de mangan a fost utilizată pentru a măsura colesterolul lipoproteinelor cu densitate mare (HDL). Concentrația de colesterol LDL 18 a fost calculată prin formula Friedewald. 19 Concentrațiile plasmatice de Lp (a) au fost determinate cu o metodă comercială imunosorbentă legată de enzime (Biopool Ltd) conform instrucțiunilor producătorului.

Autoanticorpi la LDL oxidat

Nivelurile de autoanticorpi IgM și IgG care se leagă de cupru OxLDL (CuOx-LDL) au fost determinate în probe de plasmă prin ELISA pe bază de chemiluminescență. 20 CuOx-LDL a fost generat așa cum este descris. S-au adăugat 3 antigeni la 10 μg/ml în PBS-EDTA (PBS cu 0,27 mmol/L EDTA, pH 7,5) și s-au incubat peste noapte la 4 ° C. Probele de plasmă au fost diluate 1: 1000 pentru IgM și 1: 500 pentru IgG și cantitatea de imunoglobulină legată a fost detectată cu IgM de capră anti-IgM (Sigma) marcată cu fosfatază alcalină sau IgG de capră anti-umană (Sigma) folosind Lumi-Phos 530 (Lumigen) ca substrat. Luminiscența a fost determinată cu un luminometru Victor 2 (Wallac, PerkinElmer).

CRP sensibil

Pentru măsurarea CRP sensibilă s-au folosit doi anticorpi monoclonali diferiți anti-CRP anti-om de șoarece (HyTest Ltd) și CRP uman purificat (HyTest Ltd). Pe scurt, anticorpul CRP anti-uman a fost acoperit la 2 μg/ml în tampon PBS peste noapte la 4 ° C. Probele de plasmă au fost diluate 1: 2000 și cantitatea de legat de CRP a fost detectată cu anticorp CRP anti-uman biotinilat. O probă de control comercial CRP (Roche) a fost inclusă în fiecare test.

LDL oxidat

O imunoanaliză chimiluminiscentă sandwich folosind un anticorp monoclonal murin bine caracterizat EO6, care se leagă în mod specific de fosfolipide oxidate, a fost utilizată pentru a măsura LDL oxidat în plasmă. 20.21 În primul rând, un anticorp monoclonal anti-apolipoproteină B-100, MB47, a fost placat la 5 μg/ml peste noapte la 4 ° C. Probele de plasmă au fost diluate până la 1:50 și cantitatea de epitopi fosfolipidici oxidați a fost măsurată cu anticorpul biotinilat EO6. În godeuri paralele, cantitatea de LDL legată a fost detectată cu anticorp anti-apoB biotinilat policlonal. Rezultatele sunt exprimate ca cantitatea de EO6 legată împărțită la cantitatea de anti-apoB legată în godeuri, rezultând cantitatea relativă de fosfolipidă oxidată detectată de EO6/apoB-100 (OxLDL-EO6). Această măsurare normalizează conținutul de fosfolipide oxidate per particulă apoB-100.