Asociere între activitatea enzimei salivare amilază și obezitate în Arabia Saudită
Norah Mubarak Aldossari
un Departament de Economie Interioară, Colegiul Educației - Wadi Addawasir, Universitatea Prince Sattam Bin Abdulaziz
b Departamentul de Științe Alimentare și Nutriție, Colegiul de Științe Alimentare și Agricole, Universitatea King Saud, Arabia Saudită
Eman E. El Gabry
b Departamentul de Științe Alimentare și Nutriție, Colegiul de Științe Alimentare și Agricole, Universitatea King Saud, Arabia Saudită
c Biochimie medicală, Universitatea din Cairo, Institutul Național de Nutriție, Egipt
Gihan E.H. Gawish
d Departamentul de Biochimie Medicală, Colegiul de Medicină, Universitatea Islamică Imam Mohammad Ibn Saud (IMSIU)
și Societatea Saudită pentru Chimie Clinică, SCFHS, Arabia Saudită.
Abstract
1. Introducere
Obezitatea este o problemă semnificativă de sănătate publică care predispune persoanele la un risc ridicat de mortalitate prematură, printr-un risc crescut de boli cronice, inclusiv diabet zaharat de tip 2 (T2DM), boli cardiovasculare, hipertensiune și cancer. [1] Prevalența obezității crește la nivel mondial, într-un ritm alarmant, atât în țările în curs de dezvoltare, cât și în cele dezvoltate. [2] La nivel global, aproximativ 2,1 miliarde de oameni, aproape 30% din populația lumii, sunt fie supraponderali, fie obezi. [3] Până în 2030, aproximativ 38% din populația adultă a lumii va fi supraponderală, iar alți 20% vor fi obezi. [4] În Arabia Saudită, prevalența obezității în populația generală este de aproximativ 28% la bărbați și 44% la femei. [5]
AMY1 este o enzimă produsă și excretată din celulele glandei salivare sensibile la noradrenalină. [6,7] Este responsabil de hidroliza amidonului, care începe în cavitatea bucală, pentru a produce maltoză, maltotrioză și dextrină, [8] reprezentând cel puțin 50% din proteina salivară. [9] Cantitatea de AMY1 variază între indivizi. Această variație se datorează unui număr de factori de mediu, inclusiv niveluri de stres, [6,10] și ritmuri circadiene. [11] În plus, există dovezi că populațiile cu o lungă istorie de consum de alimente bogate în amidon au concentrații mai mari de AMY1 decât cele ale populațiilor care consumă alimente bogate în proteine. [12]
În ultimul deceniu, studiile clinice timpurii au raportat o amilază serică scăzută atât la șoareci obezi, cât și la oameni. [13-18] Studiile anterioare au raportat, de asemenea, că concentrațiile serice scăzute de AMY1 au fost asociate cu creșterea indicelui de masă corporală (IMC) [19-22] și WC. [16,19] În schimb, un alt studiu a sugerat că activitățile AMY1 au fost mai mari la persoanele supraponderale decât cele ale persoanelor de control. [23] Relevanța clinică a AMY1 și mecanismele de bază nu au fost pe deplin elucidate, [16,24] evidențiind, prin urmare, constatări contrastante în acest domeniu. Până în prezent, nu s-au efectuat studii epidemiologice la scară largă în Arabia Saudită pentru a studia relația dintre nivelurile scăzute de AMY1 și obezitate. Acest studiu a avut ca scop evaluarea relației dintre activitatea AMY1 și IMC la 200 de bărbați și femei adulți din Arabia Saudită din Riyadh.
2. Metode
2.1. Studiați populația și participanții
Acest studiu a inclus un total de 200 de participanți saudiți cu vârste cuprinse între 20 și 50 de ani. Participanții au fost împărțiți în 2 grupuri; primul grup a inclus 100 de indivizi care erau supraponderali și obezi (50 de bărbați și 50 de femei), iar al doilea grup a inclus 100 de indivizi care aveau greutate corporală normală (grupul de control) (50 de bărbați și 50 de femei). Au fost recrutați din cluburi de fitness fizic și erau angajați ai școlii în orașul Riyadh. Au fost aleși aleatoriu din ianuarie 2017 până în august 2017. Toți participanții au semnat consimțământul informat în scris și au fost primite formularele de consimțământ aprobate și semnate. Criteriile de includere s-au bazat pe valorile IMC stabilite de Forța Internațională de Obezitate/Organizația Mondială a Sănătății (OMS) după cum urmează: 18,5-24,9 kg/m 2 este considerat normal, 25-29,9 kg/m 2 este considerat supraponderal, și> 30 kg/m 2 este considerat obez. [25] Aprobarea etică a fost obținută de la Comitetul de etică al Colegiului Centrului de Cercetare Științifică al Universității King Saud, Riyadh, Arabia Saudită.
2.2. Colectare de date
Aportul alimentar a fost evaluat folosind o rechemare dietetică de 24 de ore efectuată de un intervievator utilizând un chestionar pretestat. Următoarele informații personale au fost colectate folosind un chestionar: vârsta, greutatea, înălțimea, sexul, starea civilă, nivelul educațional, istoricul sănătății obezității parentale și activitatea sportivă. Participanții au fost instruiți să folosească rigle, cupe de măsurare și linguri în propria gospodărie. Datele au fost introduse și analizate folosind Departamentul pentru Agricultură al Statelor Unite pentru Sănătate, Căutare Software și Compoziție Alimentară pentru Orientul Mijlociu [26] și de un alt studiu local pentru compoziția alimentară tradițională. [27] Adecvarea alimentară a fost evaluată prin compararea aportului participanților cu valoarea disponibilă a aportului dietetic de referință (DRI), în loc de evaluarea stării nutriționale a grupului de control pentru evaluarea dietei. [28]
2.3. Analiza antropometrică
Caracteristicile antropometrice ale participanților, inclusiv greutatea și înălțimea, au fost determinate folosind metode convenționale standardizate. IMC a fost calculat utilizând următoarea formulă: greutatea în kilograme (kg) împărțită la înălțimea în metru pătrat (m 2). Tensiunea arterială a fost măsurată în conformitate cu recomandările Comitetului Național Mixt, utilizând un tensiometru mercurial standard cu manșetă pe brațul superior drept. [29] Două citiri ale tensiunii arteriale au fost luate la distanță de 5 minute, cu participanții în poziție așezată timp de 10 minute. S-a notat media celor 2 citiri.
2.4. pregătirea unei mostre
Cu cel puțin 30 de minute înainte de a mânca, bea sau fuma, probele de salivă au fost colectate de la fiecare participant folosind recipiente sterile de polipropilenă de 15 ml timp de 3 minute sub limbă. Un total de 3 ml de probă de salivă au fost colectate și plasate în recipientul din polipropilenă pentru evaluarea activității AMY1. Probele au fost transportate imediat în orașul Abdulaziz pentru știință și tehnologie și depozitate la -20 ° C până la analiză.
2.5. Măsurarea activității AMY1 în salivă
Activitatea AMY1 a fost măsurată de un cititor de fluorescență cu microplacă folosind EnzChek Ultra Amylase Assay Kit (E33651) achiziționat de la Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA) incluzând amidonul de stingere a vopselei (amidon DQ), un derivat de amidon de porumb etichetat cu vopsea BODIPY Fluorescein, care a fost utilizată ca substrat. Acest substrat a fost degradat de AMY1, rezultând fragmente puternic fluorescente care au fost proporționale cu activitatea AMY1. Conform instrucțiunilor producătorului, au fost preparate pe scurt, tampon de reacție, soluție stoc de 1 mg/ml de substrat de amidon DQ, curbă standard de amilază între 0 și 20 mU/ml și mai multe diluții ale probei. S-au adăugat în godeuri 50 μl din probe și 50 μl soluție standard AMY1 în duplicat. S-a adăugat apoi soluția de substrat de amidon DQ (1 mg/ml, 50 pl/godeu). Placa a fost incubată la temperatura camerei, protejată de lumină, timp de 30 de minute. Fluorescența a fost înregistrată folosind un cititor de fluorescență cu microplacă cu lungimi de undă de excitație și emisie de 505 nm și respectiv 512 nm. Valorile normale sunt cuprinse între 27 ± 3,8 și 1440 ± 160 U/ml. [30]