Analiza răspunsului imunitar adaptativ intratumoral în bine diferențiat și diferențiat
1 Departamentul de chirurgie, secția de oncologie chirurgicală, Universitatea din California de Sud, Los Angeles, CA 90033, SUA
2 Hoag Memorial Hospital Presbyterian, Newport Beach, CA 92663, SUA
3 Departamentul de Oncologie Medicală a Melanomului, Universitatea din Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX 77030, SUA
4 Departamentul de Biostatistică, Universitatea din Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX 77030, SUA
5 Departamentul de Biologie al Cancerului, Universitatea din Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX 77030, SUA
6 Departamentul de oncologie medicală a sarcomului, Universitatea din Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, TX 77030, SUA
7 Division of Surgical Oncology, James Comprehensive Cancer Center, Ohio State University Medical Center, Columbus, OH 43210, SUA
8 Lion Biotechnologies, Woodland Hills, CA 91637, SUA
9 Departamentul de Imunologie, H. Lee Moffitt Cancer Center, Tampa, FL 33612, SUA
Abstract
1. Introducere
Deși majoritatea sarcoamelor țesuturilor moi apar la extremitățile superioare și inferioare, aproximativ 20% se găsesc în retroperitoneu, unde tumorile pot provoca adesea morbiditate și mortalitate semnificative [1]. Liposarcomul bine diferențiat (WD) și diferențiat (DD) sunt tumori maligne de origine adipocitară și cel mai frecvent subtip histologic întâlnit în retroperitoneu. Tumorile WD constau în cea mai mare parte adipocite atipice, în timp ce tumorile DD au o porțiune celulară suplimentară, de înaltă calitate [2, 3]. Liposarcomul DD poate apărea din liposarcomul WD; cu toate acestea, relația precisă este încă nedovedită.
În liposarcomul retroperitoneal WD/DD, chirurgia este pilonul principal al tratamentului; cu toate acestea, deoarece tumorile sunt de obicei masive ca dimensiune (medie = 30 cm) și pot invada organele viscerale adiacente și structurile critice, rezecția este adesea destul de dificilă [4, 5]. Recurența locoregională apare frecvent, iar pacienții sunt supuși mai multor intervenții chirurgicale cu potențialul unor rate crescute de complicații [4]. În afară de intervenția chirurgicală, există puține alte opțiuni de tratament eficiente. Rolul radioterapiei nu este bine stabilit [5]. Chimioterapia citotoxică pe bază de doxorubicină este administrată frecvent, în special pentru boala DD; cu toate acestea, o analiză retrospectivă mare și recentă a raportat o rată de răspuns obiectivă de numai 12% [6].
În ultimul deceniu, s-au făcut progrese semnificative în înțelegerea biologiei moleculare a liposarcomului WD/DD. Schimbarea genetică distinctivă a acestei boli pare să fie amplificarea cromozomială la 12q13-15 [2, 3, 5]. Această regiune include câteva sute până la mii de gene, inclusiv MDM2 și CDK4. Amplificarea MDM2 are loc în aproape toate tumorile și detectarea prin fluorescență hibridizare in situ este adesea utilizată în diagnosticul liposarcomului WD/DD [2, 3]. Mai multe terapii noi, conduse de biologia bolii, au apărut recent și sunt în prezent evaluate în faza incipientă a studiilor clinice [7]. Datele preliminare publicate cu o serie mică de pacienți sugerează că se poate realiza stabilizarea bolii; cu toate acestea, ratele de răspuns obiective sunt încă extrem de scăzute: 5% pentru inhibitorul MDM2, RG7112 și 3% pentru inhibitorul CDK4/6, PD-0332991 [8, 9].
În melanom, blocarea punctului de control imun este o strategie imunoterapeutică care sa dovedit recent a avea rate de răspuns obiective impresionante și chiar prelungirea supraviețuirii, în ciuda stadiului avansat al bolii și al sarcinii tumorale severe [10-13]. Aceste terapii inhibă punctele de control moleculare (CTLA4, PD-1) sau „frânele” care apar în mod natural într-o celulă T activată. Spre deosebire de vaccinuri, blocarea punctului de control imun nu induce țintirea unui antigen tumoral specific, ci menține activarea și funcția citotoxică în celulele T care se infiltrează în tumori, care sunt deja sensibilizate în mod natural la o varietate de antigeni tumorali. Prin blocarea atât a CTLA4, cât și a PD-1 la pacienții cu melanom metastatic, Wolchok și colab. o rată de răspuns obiectivă de 53% cu contracție tumorală de până la 80% la mulți respondenți [12]. Eficacitatea clinică a blocării punctului de control imun este raportată tot mai mult pentru alte tumori solide avansate [14, 15].
Având în vedere opțiunile de tratament limitate și ineficiente disponibile în prezent pacienților cu liposarcom retroperitoneal WD și DD, am căutat să studiem micromediul tumorii naturale din punct de vedere imunologic ca primul pas pentru a explora fezabilitatea potențială a imunoterapiei în această boală. Spre deosebire de liposarcomul mixoid care are o expresie ridicată a cancerului antigenului testiculului NY-ESO-1 [16], după cunoștințele noastre, niciun antigen tumoral consistent și fiabil nu a fost identificat vreodată în liposarcomul WD/DD, ceea ce face ca strategiile de vaccinare să fie mai puțin atrăgătoare. Scopul nostru a fost de a studia răspunsul imun adaptiv și în special celulele T care se infiltrează în tumori și expresia lor a PD-1. Aceste date pot fi apoi utilizate pentru a ghida evaluarea ulterioară a strategiilor de blocare a punctelor de control imune în liposarcomul WD/DD.
2. Material și metode
Aprobarea pentru toate porțiunile acestui studiu a fost obținută de către Institutional Review Board de la Universitatea din Texas, MD Anderson Cancer Center.
2.1. Prelucrarea și analiza tumorilor proaspete prin citometrie în flux
2.2. Imunohistochimia țesutului FFPE
2.3. Corelarea clinicopatologică și metodele statistice
Datele despre rezultatele clinice au fost obținute dintr-o bază de date retrospectivă a sarcomului instituțional pentru pacienții cu și fără TLS identificate în secțiunile tumorale FFPE disponibile. Curbele Kaplan-Meier au fost utilizate pentru a estima supraviețuirea fără recurență și globală (RFS, OS) între grupurile de pacienți. Comparațiile dintre RFS și OS între grupurile de pacienți au fost efectuate utilizând teste log-rank. Toate testele au fost bilaterale și