Troxerutina protejează împotriva sindromului ovarului polichistic indus de DHT la șobolanii SpringerLink
Este disponibilă o corecție la acest articol
Acest articol a fost actualizat
Abstract
Introducere
Sindromul ovarului polichistic (SOP) este o endocrinopatie reproductivă cu prevalență estimată la 6%
20% (în funcție de diferitele criterii de diagnostic utilizate), făcându-l cea mai frecventă afecțiune endocrină la femeile în vârstă de reproducere [1]. Caracteristicile de diagnostic ale SOP includ excesul de androgeni, disfuncția ovulatorie și ovarele polichistice [1]. Obezitatea este prezentă la 30-60% dintre pacienții cu PCOS, în funcție de țara de origine [2, 3]. Cea mai consistentă anomalie biochimică la femeile cu SOP este hiper-secreția de androgen, niveluri crescute ale hormonului luteinizant seric (LH) și niveluri scăzute până la normale ale hormonului foliculostimulant seric (FSH) [4, 5]. Modelele animale care reflectă caracteristicile PCOS sunt resurse cruciale pentru investigarea acestui sindrom. Un model de șobolan tratat cronic cu 5α-dihidrotestosteron (DHT) imită îndeaproape fenotipul PCOS uman și este un model adecvat pentru investigații despre PCOS.
Axa hipotalamus-hipofiză-gonadă (HPG) joacă un rol central în reglarea neuroendocrină rafinată a reproducerii. Secreția hipotalamică a hormonului de eliberare a gonadotrofinei (GnRH) a fost stabilită în mod robust ca cale cheie care controlează funcția de reproducere [6]. Axonii neuronilor GnRH ies în eminența mediană și eliberează GnRH, care prin sistemul portal hipofizar, pătrunde în hipofiza anterioară. Hipofiza anterioară, ținta principală a GnRH, răspunde la stimulare prin creșterea secreției de LH și FSH, care la rândul său duce la producerea de steroizi din ovare și stimulează geneza și ovulația foliculului [7]. Astfel, GnRH este cunoscut ca hormonul principal și oferă ieșirea finală comună a rețelei care reglează funcția de reproducere.
GnRH este influențat de factori extrinseci, cum ar fi neurotransmițătorii și neuropeptidele, orice modificare a neurotransmițătorilor de reglare a GnRH, cum ar fi inhibitorii acidului gamma-aminobutiric (GABA) și stimulatorii glutamatului (Glu), pot duce la disfuncții endocrine ale reproducerii [8]. De fapt, anovulația cronică caracteristică SOP este atribuită creșterii impulsului central de GnRH și a aberațiilor gonadotrofinei rezultate, care probabil rezultă din efectul cumulativ al modificării inhibitorilor de stimulare și neurotransmițător GnRH din hipotalamus și glanda pituitară [9]. Kisspeptina și ulterior a descoperit neurkinina B (NKB), două neuropeptide de reglare a GnRH, care s-au dovedit a fi esențiale pentru secreția normală de GnRH la om, au intrat în centrul atenției în ultimul deceniu [10, 11]. Descoperirea aferentă a căii kisspeptin-/neurokinin B−/dinorfină- (KNDy) a consolidat în continuare înțelegerea modulației secreției GnRH [12]. Neuronii KNDy care locuiesc în regiunea nucleului arcuit al rozătoarelor co-exprimă kisspeptina, NKB și DYN [12, 13]. NKB și kisspeptina derivată din KNDy stimulează eliberarea GnRH prin legarea receptorului Kisspeptin 1 (Kiss1r) și receptorului neurokininei 3 (NK3r) exprimat pe neuronii GnRH [14, 15].
Materiale și metode
Administrarea animalelor și a troxerutinei
Prelevarea de sânge și țesuturi
La terminalul studiului, șobolanii au fost decapitați și sângele din trunchi a fost colectat și centrifugat la 3000 rpm timp de 15 min. Plasma a fost separată și depozitată la - 80 ° C până când a fost analizată pentru analize biochimice și hormonale. Ovarele au fost curățate în soluție salină și administrate fără grăsimi. Ovarele au fost fixate în formalină tamponată 10% timp de 48 de ore și încorporate în parafină. Secțiunile de țesut încorporate în parafină au fost decerate, secționate (6 μm) și colorate cu hematoxilină și eozină (H&E). Numărul de foliculi a fost clasificat și numărat în fiecare secțiune a 40-a ovariană pentru 10 ovare per grup. Foliculii au fost numărați în conformitate cu următoarea definiție. Foliculul primordial a fost înconjurat de un singur strat de celule granuloase scuamoase. Foliculul primar conținea un singur strat de celule granuloase cuboidale. Foliculul secundar conținea două sau mai multe straturi de celule de granusola, dar niciun spațiu antral în stratul de granuloasă. Foliculul antral afișa mai multe straturi de celule de granusola cu prezența antrului folicular.
Vagin frotii și cicluri de est
Frotiurile vaginale au fost luate zilnic la 09:00 dimineața până în a 28-a zi după prima zi de tratament cu DHT, care au fost cele 10 zile finale ale studiului. Analiza microscopică (BX41, Olympus) a fost efectuată pentru a determina stadiul ciclului estru de tipurile celulare predominante în frotiurile vaginale după colorarea cu albastru de metilen (Solarbio, Beijing). Proestrul este format din celule epiteliale mărite, rotunde, nucleate; estul constă dintr-un număr mare de celule epiteliale scuamoase cornificate; metestrul este format din două tipuri de celule: celule epiteliale și leucocite cu aproximativ aceeași cantitate; iar diestrul se caracterizează printr-o cantitate mică de celule cu predominanță a leucocitelor.
Greutatea corporală, biochimică și analiza Western blot
Greutatea corporală a fost măsurată în fiecare săptămână după implantare pentru un total de 4 săptămâni.