Proteina 4 care leagă retinolul în diabetul obezității umane
Abstract
PROIECTAREA ȘI METODELE CERCETĂRII
Studiu clinic.
Comitetul de revizuire instituțională a aprobat toate studiile (transversal, pierderea în greutate, microdializă și adipogeneza in vitro) și toți subiecții au dat consimțământul scris în prealabil. Dintr-o populație descrisă anterior (10) de femei menopauză caucaziene, am comparat femeile menopauze slabe, supraponderale și obeze într-un studiu transversal. În studiul de scădere în greutate, 30 de femei caucaziene la menopauză au început un protocol dietetic de reducere a greutății și au fost sfătuiți să reducă aportul de energie cu 600 kcal/zi, așa cum s-a descris anterior (11). Șaptesprezece femei au atins obiectivul de reducere a greutății cu 5% după 13 săptămâni și au fost incluse în analiza expresiei genei țesutului adipos și a RBP4 seric. În ambele studii, niciun participant nu a fost diabetic sau a avut boli renale sau hepatice, insuficiență cardiacă congestivă sau boli coronariene. Terapia de substituție hormonală a fost întreruptă cu 4 săptămâni înainte și toate celelalte medicamente cu o săptămână înainte de studii. Participanții nu și-au schimbat greutatea corporală cu> 1 kg în cele 3 luni înainte de începerea studiului. Măsurătorile antropometrice și probele de sânge au fost obținute la 9:00 a.m. în urma unui post peste noapte. Țesutul adipos subcutanat periumbilical a fost obținut prin biopsie cu ac așa cum s-a descris anterior (10,11).
Studiu de microdializă.
Studiu de adipogeneză in vitro.
Țesutul adipos subcutanat mamar a fost obținut de la femeile sănătoase (IMC 25-30 kg/m 2, cu vârsta cuprinsă între 35-58 ani) prin intervenție chirurgicală de reducere a sânilor pentru izolarea celulelor adipoase umane. Celulele stromavasculare și adipocitele mature au fost izolate prin digestia colagenazei și cultivate peste noapte în mediu conținând ser, așa cum s-a descris anterior (13). ARN total a fost izolat din probe pereche de celule stromavasculare și adipocite mature de la fiecare donator după o zi suplimentară de cultură în condiții fără ser pentru a compara expresia genei RBP4. Adipogeneza în celulele stromavasculare a fost indusă de un cocktail de insulină, izobutilmetilxantină, cortizol și triiodotironină așa cum s-a descris anterior (13). Secreția RBP4 în mediul de cultură a fost comparată între celulele stromavasculare și adipocitele diferențiate în ziua 12 după inducerea adipogenezei.