P19Arf reprimă receptorul factorului de creștere derivat din trombocite β prin transcripție și

Figurile și datele articolelor

Cifre

Pierderea Pdgfrβ ameliorează hiperplazia vitroasă primară. (A) Fotomicrografii reprezentative ale secțiunilor colorate cu H & E ale ochilor mouse-ului E13.5. Săgețile indică spațiul vitros posterior lentilei. G, GFP. (B) Cuantificarea celulelor vitroase totale la 625 μm 2 (*, P

factorului

Pierderea Arf îmbunătățește ARNm Pdgfrβ in vivo. (A și B) Secțiuni reprezentative colorate H & E ale ochilor mouse-ului E13.5 Arf +/+ și Arf Gfp/Gfp înainte (de sus) și după (de jos) captarea cu laser a microdisecției spațiului vitros (V), a obiectivului (L ) și retină (R). (C la E) amplificarea qRT-PCR a mARN-urilor indicate extrase din vitros (V), cristalin (L) și retină (R). **, șoareci P +/+. (F) Colorare reprezentativă a imunofluorescenței care arată că expresia Pdgfrβ în coroidă (vârfuri de săgeți) este neschimbată prin prezența sau absența Arf în embrionii E13.5. De asemenea, rețineți masa Pdgfrβ-pozitivă (săgeată) din spatele lentilei (L) în ochiul Arf Gfp/Gfp, care este absent în ochiul de tip sălbatic.

p19 Represiunea mediată de ARF a Pdgfrβ este dependentă de p53. (A) Western blot reprezentativ care arată că eliminarea mediată de shRNA a p53 (benzile 3 și 4) blunt inducția p53, dar nu reprimarea Pdgfrβ în ARF lacZ/lacZ MEF transduse cu un vector retrovirus care exprimă GFP sau p19 Arf. (B) Cuantificare digitală care arată cantitatea de proteină Pdgfrβ în Arf lacZ/lacZ MEF cu sau fără knockdown p53 și expresie ectopică Arf, așa cum este descris și prezentat în panoul A. Expresia Pdgfrβ a fost normalizată la cea a Hsc70 și exprimată relativ la cea din GFP -celule transduse care exprimă shRNA de control (Cntrl). *, P lacZ/lacZ MEF cultivate și manipulate așa cum este descris pentru panoul A. **, P

Pierderea p53 îmbunătățește ARNm Pdgfrβ, provocând hiperplazie vitroasă primară la ochiul șoarecelui. (A) Fotomicrografii reprezentative ale secțiunilor colorate cu H & E ale ochilor C57BL/6 p53 +/+ și p53 -/- de șoarece cu expansiune hiperplastică a celulelor în spațiul vitros (săgeți) la două animale reprezentative. (B) Secțiuni reprezentative colorate cu H & E care prezintă ochi de șoarece preluați din embrioni E13.5 ai genotipurilor indicate și fotografiate înainte (de sus) și după (jos) microdisecția vitrosului. Rețineți că hiperplazia vitroasă primară este deja evidentă în acest stadiu fără p53 (săgeată). (C) Cuantificarea mARN-urilor Arf (de sus) și Pdgfrβ (de jos) extrase din spațiul vitros al embrionilor E13.5 din genotipul indicat. Țesutul a fost obținut prin microdisecție de captare cu laser așa cum se arată în panoul B. Expresia a fost măsurată prin qRT-PCR și normalizată la cea a Hprt. *, Embrioni P +/+.