Izolarea, caracterizarea și activitatea hipolipidemică a acidului ferulic în dietele bogate în grăsimi induse

Pankaj G. Jain

1 Institutul de educație și cercetare farmaceutică R. C. Patel, Shirpur, Dist-Dhule-425405, Maharashtra, India

Sanjay J. Surana

1 Institutul de educație și cercetare farmaceutică R. C. Patel, Shirpur, Dist-Dhule-425405, Maharashtra, India

Abstract

Introducere

Maladies ale sistemului cardiovascular sunt un pericol proeminent pentru sănătate care duce adesea la moarte. Stilul de viață sedentar și obiceiurile alimentare eronate care includ consumul de grăsimi și zaharuri rafinate duc la o scădere a activității filamentelor de miozină și actină (Brai și colab., 2007 [7]) accentuează riscul de hiperlipidemie, un factor de risc demn de cunoscut tulburări cardiovasculare, ateroscleroză și complexități cardiovasculare aliate. Aproximativ 17,5 milioane de persoane au murit din cauza bolilor cardiovasculare (BCV), reprezentând 31% din totalul deceselor la nivel mondial și se așteaptă să crească la peste 23,6 milioane până în 2030 (Mozaffarian și colab., 2016 [37]). Se anticipează că proporția persoanelor hipertensive din India va crește de două ori până în 2025 (Brai și colab., 2007 [7]). Boala coronariană ischemică este un factor de risc remarcabil în patogeneza evenimentelor cardiovasculare adverse preoperatorii care sporește riscul de mortalitate la o subpopulație de pacienți cu risc chirurgical ridicat (Howard-Alpe și colab., 2006 [15]).

Profilul colesterolului pacientului joacă un rol decisiv în tratamentul hiperlipidemiei. Numeroase părți antihiperlipidemice, inclusiv statine, fibrate, niacină, acizi biliari, ezitimib etc. scade nivelul colesterolului, deși printr-un mecanism diferit (Durrington, 2003 [12]). În prezent, medicamentele disponibile hipolipidemice oferă ameliorare pentru o fracțiune de pacienți și au fost asociate cu o serie de efecte secundare, inclusiv hiperuricemie, diaree, greață, miozită, agravare gastrică, înroșirea feței, piele uscată și funcția hepatică modificată (Santharam et al., 2015 ([43]).

În cele din urmă, au fost dezvoltate câteva modele experimentale de hiperlipidemie pentru a caracteriza segmente distincte ale formelor fiziopatologice care descriu această boală. În studiul de față, hiperlipidemia la șobolani a fost indusă prin administrarea de HFD pe o perioadă de 60 de zile. S-a dovedit că HFD a determinat o creștere semnificativă a HDL-C în studiile clinice și preclinice (Katan și colab., 1994 [27]; Nevin și Rajamohan, 2009 [38]). Studiul anterior efectuat în laboratorul nostru a constatat că extractul de etanol al Prosopis cineraria (L.) Druce (Leguminosae) (sin. Prosopis spicigera L.) posedă o acțiune puternică anti-hiperlipidemică împotriva hiperlipidemiei induse de dietă bogată în grăsimi (Jain și Surana, 2016 [17]). Cu toate acestea, purificarea, standardizarea și evaluarea activității antihiperlipidemice a extractului de etanol de P. cineraria (ET-PCF) nu sunt încă raportate. Prin urmare, prezentul studiu a fost întreprins cu un obiectiv de izolare și caracterizare a ET-PCF și evaluarea sa pentru efectul antihiperlipidemic asupra șobolanilor experimentali de laborator.

Materiale și metode

Droguri și substanțe chimice

Diferite medicamente și substanțe chimice au fost obținute de la un producător disponibil comercial, cum ar fi HFD (60 kcal% grăsime, # D12492, 5,24 kcal/g, Research Diet Inc., New Brunswick, NJ, SUA). Colesterol, trigliceride, kituri HDL-C și LDL-C (Accurex Biomedical Pvt. Ltd., Mumbai, India), eter de petrol (60:80) și dietil eter (Merck, India).

Colectarea materialului vegetal

Fructele proaspete ale plantei P. cineraria au fost colectate din regiunea Satpuda din Maharashtra, India. Profesorul L. K. Kshirsagar (Taxonomist, Departamentul de Botanică, Colegiul de Științe L. K. Dr. Ghogre din S.S.V.P.S, Dhule, Universitatea North Maharashtra, Jalgaon) autentifica planta.

Un exemplar al acestuia a fost trimis la ierbarul diviziei.

Prepararea extractului de etanol și izolarea

Caracterizarea chimică a moleculei izolate

Tehnica cum ar fi UV, IR, 1H RMN, 13C RMN și LC-MS au fost utilizate pentru a determina structura chimică a compusului izolat. Spectrul IR a fost înregistrat folosind pelete KBr pe un spectrometru IR Perkin-Elmer (Perkin-Elmer, Waltham, MA). Spectrele 1H RMN și 13 C RMN au fost înregistrate folosind CDCl3 ca solvent pe Bruker Advance II 400 RMN și spectrele LC - MS au fost înregistrate la rezoluție înaltă pe un spectrometru de masă (sistemul Perkin Elmer Auto) la spectrometrul SAIF Panjab University, Chandigarh, datele sunt date în valori m/z.

Animale experimentale

Șobolani Sprague-Dawley masculi (180-220 g) au fost obținuți de la casa de animale de la facultate a Institutului R. C. Patel de Educație și Cercetare Farmaceutică, Shirpur, India. Au fost adăpostite în cuști bine ventilate și menținute la o temperatură controlată de 22 ± 2 ° C cu un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore și control standard de laborator. Animalele au avut acces gratuit la chow standard pentru pelete (Pranav Agro-Industries Ltd., Sangli, India) și au filtrat apa ad libitum pe tot parcursul protocolului experimental. Comitetul de etică animală instituțională al Colegiului RCPIPER, Shirpur a aprobat protocolul de studiu (IAEC/RCPIPER/2012-13/09).

Dezvoltarea șobolanilor cu hrană bogată în grăsimi

Cele două regimuri dietetice, cum ar fi dieta normală cu pelete (NPD) și dieta bogată în grăsimi (HFD, 58% grăsimi, 25% proteine și 17% carbohidrați, ca procent din kcal total, ad libitum) au fost hrănite șobolanilor pentru prima dată perioada de 60 de zile. Compoziția și prepararea HFD așa cum au fost descrise în altă parte (Jain și Surana, 2016 [17]).

Proiectare experimentală

Studiile au fost efectuate la următoarele grupuri de animale

Grupa I: Șobolani normali: șobolanii au primit dietă normală pe pelete și au fost tratați cu vehicul (10 mg/kg de apă distilată)

Grupa II: Control HFD: șobolanii au primit o dietă bogată în grăsimi și au fost tratați cu vehicul (10 mg/kg de apă distilată)

Grupa III: AT (1,2): șobolanii au primit o dietă bogată în grăsimi și au fost tratați cu atorvastatină (1,2 mg/kg)

Grupa IV: FA (10): șobolanii au primit o dietă bogată în grăsimi și au fost tratați cu acid ferulic (10 mg/kg)

Grupa V: FA (20): șobolanii au primit o dietă bogată în grăsimi și au fost tratați cu acid ferulic (20 mg/kg)

Grupa VI: FA (40): șobolanii au primit o dietă bogată în grăsimi și au fost tratați cu acid ferulic (40 mg/kg).

Doza de FA (10, 20 și 40 mg/kg, p.o.) a fost selectată pe baza unei metode raportate anterior (Balasubashini și colab., 2004 [3]). Vehiculul sau atorvastatina sau FA au fost administrate pe cale orală timp de 60 de zile consecutive. După terminarea tratamentului, șobolanii au postit peste noapte și, după 24 de ore, au fost anesteziați secvențial cu eter anestezic timp de aproximativ 30-40 s. Sângele a fost retras prin puncție retro-orbitală. Fiecare probă de sânge a fost colectată în flacoane separate pentru determinarea parametrilor serici.

Pregătirea probelor de ser și estimări biochimice

Serul a fost separat prin centrifugare folosind o criocentrifugă Eppendorf (modelul nr. 5810, Eppendorf, Hamburg, Germania), menținut la 4 ° C și rulat la o viteză de 7000 rpm timp de 15 minute. Nivelurile de lipoproteine cu densitate mare (HDL), lipoproteine cu densitate mică (LDL), trigliceride (TG) și colesterol total (TC) au fost măsurate cu ajutorul unui spectrofotometru (spectrofotometru vizibil UV, Jasco V-530, Tokyo, Japonia) utilizând kituri de reactivi disponibile comercial conform procedurii furnizate de producător (Accurex Biomedical Pvt. Ltd., Mumbai, India) (Adil și colab., 2015 [1]; Honmore și colab., 2015 [14]).