Genul Enterococ între potențialul probiotic și probleme de siguranță - o actualizare
Hasna Hanchi
1 Nutraceuticals and Functional Proteomics Potential of Biodiversity in Tunisia, Institutul Superior de Științe Biologice Aplicate din Tunis (ISSBAT), Universitatea din Tunis El Manar, Tunis, Tunisia
Walid Mottawea
2 Facultatea de Științe ale Sănătății, Școala de Științe Nutritive, Universitatea din Ottawa, Ottawa, ON, Canada
3 Departamentul de Microbiologie și Imunologie, Facultatea de Farmacie, Universitatea Mansoura, Mansoura, Egipt
Khaled Sebei
1 Nutraceuticals and Functional Proteomics Potential of Biodiversity in Tunisia, Institutul Superior de Științe Biologice Aplicate din Tunis (ISSBAT), Universitatea din Tunis El Manar, Tunis, Tunisia
Riadh Hammami
2 Facultatea de Științe ale Sănătății, Școala de Științe Nutritive, Universitatea din Ottawa, Ottawa, ON, Canada
Abstract
Introducere
Legislație
Avantajele enterococilor și bacteriocinelor acestora
Activitate cu spectru larg
Producători multi-bacteriocinici
Enterococii sunt în mod caracteristic toleranți la pH-uri extreme, temperaturi și concentrații mari de sare (Fisher și Phillips, 2009). Mai mult, unele tulpini de enterococi găzduiesc simultan multe gene legate de bacteriocină, care le oferă un avantaj competitiv față de alte specii microbiene din nișe ecologice (Vandera și colab., 2017). Aceste caracteristici sunt utile în aplicații alimentare împotriva deteriorării și contaminării organismelor patogene (Henning și colab., 2015). Cintas și colegii au raportat că E. faecium L50, un producător de enterocină L50A și L50B, este capabil să producă alte două bacteriocine suplimentare (enterocina P și enterocina Q) la 37 ° și respectiv 47 ° C (Cintas și colab., 2000 ). La fel, s-a arătat recent că E. durans 61A produce simultan forme formilate și neformilate de enterocine L50A și L50B, precum și durancină 61A, o nouă peptidă glicozilată 5217 Da (Hanchi și colab., 2016). Au fost raportate mai multe alte tulpini multi-bacteriocinogene, cum ar fi E. faecium NKR-5-3 (Perez și colab., 2012), E. faecium WHE 81 (Izquierdo și colab., 2009), E. faecium LM-2 (Liu G. și colab., 2011) și E. faecium MMRA (Rehaiem și colab., 2014).
Aplicațiile actuale ale enterococilor și bacteriocinelor acestora
Schema de decizie propusă pentru evaluarea siguranței candidaților probiotici Enterococci care conduc la cereri de alimente/furaje. Adaptat de la EFSA Panel on Biological Hazards (2011), EFSA (2012a) și Laulund și colab. (2017).
Rezumatul principalelor aplicații ale tulpinilor de enterococi și bacteriocinelor acestora.
Enterococi și bacteriocinele lor din alimente
tabelul 1
Metode recomandate pentru evaluarea siguranței Enterococcus (specii non-QPS).
| TESTE DE SUSCEPTIBILITATE ANTIBIOTICĂ | ||
| Sensibilitate fenotipică la antibiotice: Ampicilină | Concentrații minime de inhibitori MIC (mg/L sau μg/mL; Testare de sensibilitate: EUCAST/CLSI, standard ISO) | EFSA, 2012a |
| ALTE CONSIDERAȚII | ||
| Sensibilitate la antibiotice relevante clinic (vancomicină, gentamicină, kanamicină, streptomicină, eritromicină, clindamicină, tetraciclină, cloramfenicol) | Concentrații minime de inhibitori (MIC) (mg/L sau μg/mL; Testare de sensibilitate: EUCAST/CLSI, standard ISO) | EFSA, 2012b; Laulund și colab., 2017 |
| DETECȚIA MARCATORILOR DE VIRULENȚĂ ASOCIAȚI CU TÂRZILE SPITALULUI | ||
| IS16 | PCR | Werner și colab., 2011 |
| în special | Tehnici de hibridizare | Hendrickx și colab., 2007 |
| hylEfm | PCR | Rice și colab., 2003 |
| Metode alternative: -Hibridizare la lizatele coloniei-Pete sudice | Singh și colab., 1998 | |
| ALTE CONSIDERAȚII | ||
| * Evaluarea genotipică | - Tastarea secvenței multilocus (MLST) - Amprenta ADN - PCR | |
| Operonii de vancomicină (vanA, vanB, vanC, vanD, vanE, vanG, vanM, vanL, vanN) | Teo și colab., 2011 | |
| Gene adezive de suprafață (efaAfs, efaAfm) | Eaton și Gasson, 2001 | |
| Genele citolizinei (cylLL, cylLs, cylM, cylB, cylA) | ||
| Gena proteinei de agregare (agg) | ||
| Metalloendopeptidaza extracelulară gelE | Nakayama și colab., 2002 | |
| * Evaluarea fenotipică | ||
| Activitate hemolitică | Test de activitate hemolitică pe 5% plăci de agar Columbia din sânge de oaie sau de cal | Semedo și colab., 2003 |
| Hidroliza gelatinei | Test pentru activitatea gelatinazei pe plăci de agar Todd-Hewitt (TH) care conțin 3% gelatină | Qin și colab., 2000 |
| DETECTAREA AMINELOR BIOGENICE | ||
| - Histamina - Putrescine - Feniletilamina - Cadavru | - HPLC cu cromatografie lichidă de înaltă presiune | Grupul EFSA privind pericolele biologice, 2011 |
| Metode alternative (pentru histamină) - Metode fluorometrice - Imunoanalize | FDA, 2011 | |
| - Analiza injecției de debit | Hungerford și colab., 2001 | |
| - Metoda colorimetrică | Patange și colab., 2005 | |
| Detectarea microorganismelor aminoacizi decarboxilaz-pozitive | - Laborator cantitativ în timp real pentru producerea histaminei PCR - metodă de detectare in vitro (analiză enzimatică sau chimică) | Landete și colab., 2007; Grupul EFSA privind pericolele biologice, 2011; FDA, 2011 |
| PRODUCȚIE DE TOXINĂ | ||
| - Potențial citotoxic | Test de citotoxicitate cu celule Vero | Laulund și colab., 2017 |
| Genom complet (când este disponibil) | NGS | EFSA, 2012a |