Deficiența alimentară maternă a colinei modifică angiogeneza la hipocampul fetal de șoarece PNAS

Editat de Robert J. Cousins, Universitatea din Florida, Gainesville, FL și aprobat la 7 iunie 2010 (primit pentru revizuire la 11 decembrie 2009)

colinei

Abstract

Studii de imunohistochimie în creierul fetal. A și B: imagini fluorescente 200X reprezentative ale regiunii 1 CORNUS AMMONI (CA1) a hipocampului E17. O imunomarcare multiplex a fost efectuată pentru BrdU (colorare aurie - ALEXA 555, vârf de săgeată alb A), izolectină IB4 (fluorescență verde - ALEXA 488, vârf de săgeată roșie A) și DAPI (fluorescență albastră legată de ADN genomic, vârf de săgeată alb B). Indicele de proliferare a EC a fost calculat ca raport între numărul de nuclei BrdU pozitivi colocalizați cu izolectină (A) și nucleii DAPI pozitivi colocalizați cu izolectină (B). Insectele mici sunt imagini ale întregii zone de hipocamp capturate cu mărire 50X (A - izolectină-BrdU și B - DAPI-izolectină). C și D: colorarea factorului VIII RA a hipocampului fetal E17 de șoarece. Imagini fluorescente 200X reprezentative ale vaselor de sânge care exprimă factorul VIII RA într-o secțiune de hipocampal de 5 μm; achiziția imaginii a fost efectuată cu un filtru de rodamină - celulele sanguine fluorescente roșii (colorant ALEXA 546 nm; vârfuri de săgeți albe) și nuclei fluorescenți albastru (colorare DAPI). C prezintă vase de sânge mici cu traiectorii și niveluri diferite ale factorului VIII, precum și nuclee DAPI pozitive ale CE. D prezintă un vas de sânge mai intens, cu factor VIII pozitiv, cu un calibru mai mare situat în imediata apropiere a girusului dentat.

Deficitul de colină maternă scade proliferarea celulelor endoteliale în hipocampul fetal E17: Șoarecii însărcinați au fost hrăniți cu dietă CD, CT sau CS între zilele 12-17 ale gestației și creierele fetale au fost colectate la E17. La E15, toate barajele au primit o doză intraperitoneală (i.p.) de BrdU. Secțiunile cerebrale au fost sondate cu izolectină IB4 și anticorpi anti-BrdU. Indicele de proliferare al EC a fost calculat ca raportul dintre celulele pozitive BrdU-izolectină pozitivă și celulele pozitive DAPI-izolectină din ambele hipocampus (sau ambele gyri dentate) din fiecare creier în șase secțiuni consecutive de 5 μm. Suprafața hipocampului întreg (H) și a girusului dentat (DG) au fost măsurate pentru fiecare probă și s-a constatat că este constantă între tratamente (inserție mică). Datele sunt prezentate ca medie ± SE. n = 6 pui din 6 baraje/grup. Grupurile au fost comparate utilizând un mod ANOVA urmat de testul Tukey-Kramer. ** = p 25% în CD comparativ cu CT sau CS (p Vizualizați acest tabel:

  • Vizualizați în linie
  • Vizualizați fereastra pop-up

Deficitul de colină alimentară maternă scade numărul vaselor de sânge din hipocampul fetal

Deși am observat modificări în regiunea hipocampului, nu s-au observat diferențe în neocortexul cingulat și cel posterior (Tabelul S1). Sugerăm că colina acționează prin modificarea semnelor epigenetice și că acest lucru poate să apară în celulele progenitoare numai la o anumită perioadă în care acestea se divid și se diferențiază. Neurogeneza și angiogeneza în zonele corticale încep înainte de ziua embrionară 12, începutul manipulării noastre dietetice. Specificitatea regională reflectă probabil aceste diferențe.