Articolul original Exercițiul aerob combinat cu ulei de samara poate îmbunătăți hiperlipidemia prin reducere
Text complet
Articol original
Exercițiul aerob combinat cu uleiul de samara se poate îmbunătăți
hiperlipidemie prin reducerea PCSK9 și creșterea LDLR
Jin-Feng Zhao, Ya-Xin Wang, Yuan-Kun Dong, Jun-Zhen Shi, Hui Li, Bao-Ai Wu
Departamentul Universității Shanxi, orașul Taiyuan 030000, provincia Shanxi, China
Primit pe 5 decembrie 2018; Acceptat pe 10 aprilie 2019; Epub 15 mai 2019; Publicat la 30 mai 2019
Rezumat: Hiperlipidemia este un factor de risc pentru accident vascular cerebral, boli coronariene, infarct miocardic, moarte subită etc. Exercițiul aerob și o dietă rezonabilă sunt modalități eficiente de a regla metabolismul lipidelor, iar combinația de exerciții fizice și dietă poate îmbunătăți hiperlipidemia mai eficient. Cu toate acestea, mecanismul nu este complet clar. PCSK9 este o genă implicată în metabolismul colesterolului, provoacă o scădere a receptorilor LDL de pe suprafața hepatocitelor, ceea ce, la rândul său, reduce capacitatea hepatocitelor de a elimina particulele LDL-C, ducând la creșterea colesterolului. În acest studiu, exercițiile aerobe combinate cu uleiul de samara au redus nivelurile de TC, TG și LDL-C ( 0,05). Exercițiu combinat
cu ulei de samara a fost semnificativ mai bun decât intervenția unică și aproape a revenit la nivelul normal (p>0,05).
Aceste constatări arată că exercițiile aerobe combinate cu uleiul de samara pot îmbunătăți hiperlipidemia prin reglarea descendentă
expresia PCSK9 și reglarea în sus a expresiei LDLR.
Cuvinte cheie: Exercițiu aerob, ulei de samara, hiperlipidemie, PCSK9, LDLR
Hiperlipidemia (HL) se referă la concentrația de lipide din plasmă care depășește intervalul normal, care a fost numită și dislipidemie. Hiperlipidemia este un potențial factor patogen pentru bolile majore, cum ar fi ateroscleroza și bolile coronariene [1]. Prevenirea și tratamentul hiperlipidemiei are o semnificație practică foarte importantă pentru controlul incidenței și moralității bolilor cardiovasculare și cerebrovasculare [2]. În ultimii ani, studiile au descoperit că un dezechilibru de exprimare a anumitor gene determină modificări anormale ale receptorilor, apolipoproteinelor sau enzimelor implicate în medierea echilibrului lipidelor din sânge și sinteza, transportul și metabolismul lipopro-teinelor. niveluri anormale, crescătoare de lipide sistemice din sânge [3].
De când Seidah [4] a descoperit subtilizină/kexin tip 9 (PCSK9) pro-proteină convertază (PCSK9) în 2003, cercetătorii au descoperit că PCSK9 leagă domeniul factorului de creștere epi-dermic (EGF) al receptorului lipoproteinelor cu densitate scăzută (LDLR) pentru a promova LD-LR pentru co-internalizare și transport la lizozomi
pentru degradare. Astfel, LDLR nu se mai poate întoarce la membrana celulară pentru a funcționa. Se consideră că PCSK9 joacă un rol cheie în metabolismul lipidic [5-10] și a primit o atenție sporită [11].
consideră că exercițiul aerob [22] și uleiul de samara [15] au efecte pozitive în reducerea lip-id-urilor din sânge, respectiv, dar studiul asupra efectului exercițiului aerob combinat cu uleiul de samara asupra genelor importante ale metabolismului colesterolului PCSK9 și LDLR nu a fost raportat în detaliu. Prin urmare, acest studiu a conceput experiențe pentru a induce hiperlipidemie la șoareci C57BL/6J prin dietă bogată în grăsimi și a observa efectul exercițiului aerob combinat cu ulei de samara asupra PCSK9 și expresia LDLR la șoarecii hiperlipidemici.
Materiale și metode
Animalele și protocolul de exerciții
Un total de 50 de șoareci masculi C57BL/6J, cu o greutate (18-20) g, au fost furnizați de Experimental Animal Center din China National Food and Drug Administration, iar numărul de licență a fost SCXK (Beijing) 2014-0013. Șoarecii împărțiți în 5 cuști într-o cameră cu un ciclu lumină-întuneric de 12:12 ore, temperatura a fost 18 ° C-23 ° C și umiditatea a fost de 50% -60%. Șoarecii aveau acces gratuit atât la alimente, cât și la apă.
După 2 săptămâni de hrănire adaptivă, șoarecii au fost împărțiți în mod aleatoriu într-un grup de control normal (grup NC, n = 10), un grup bogat în grăsimi (grup M, n = 10), un grup bogat în grăsimi cu grup exercițiu (grup ME, n = 10), un grup bogat în grăsimi cu ulei de samara (grup MS, n = 10) și un conținut ridicat de grăsimi cu exerciții fizice și grup de ulei de samara (grup MES, n = 10). Dieta bogată în grăsimi a fost compusă din 22,4% proteine, 45,1% carbohidrați, 16,4% grăsimi, 5,8% fibre brute, 1,7% calciu, 1,1% fosfor. După modelarea cu succes la șoareci cu hiperlipidemie, grupurile MS au fost hrănite cu ulei de samara (0,5 mg/g) zilnic în timp ce hrăneau o dietă bogată în grăsimi, grupul NC și ME hrănit cu ser fiziologic. Grupul ME a fost utilizat pentru exerciții cu bandă de alergat după finalizarea traincompletării familiare. Grupul MES a fost utilizat pentru intervenția exercițiului aerob combinat cu ulei de samara. Intensitatea exercițiului aerob a fost stabilită ca fiind de 15 m/min × 45 min, înclinare de 6%, șase zile de exercițiu pe săptămână (începând cu ora 19:00) și fiecare exercițiu a avut o încălzire de 5 minute, total 8 săptămâni.
Colecția de țesuturi
După ultima desfășurare a experimentului, post de 12 ore, cântărit, s-a efectuat anestezie abdominală cu pentobarbital de sodiu la o doză de 80 mg/Kg și 2 ml aortică abdominală
s-a luat sânge. Șoarecii au fost eutanasiați și toți ficății au fost scoși rapid și spălați în mod repetat cu ser fiziologic răcit cu gheață până când nu a existat sânge și apa a fost ștearsă cu o hârtie de filtru, fotografiată și depozitată. După finalizarea colectării țesuturilor, carcasa șoarecelui a fost tratată în conformitate cu cerințele relevante.
Determinarea markerului plasmatic al colesterolului metabolism
Sângele de șoarece colectat a fost centrifugat la 12000 rpm timp de 2 minute la 4 ° C și serul superior a fost preluat și depozitat la -20 ° C până la analizare. Colesterolul total plasmatic (TC), trigliceridul (TG), colesterolul lipoproteinelor cu densitate scăzută (LDL-C) și colesterolul lipoproteinelor cu densitate ridicată (HDL-C) au fost măsurate de un cititor de microplăci folosind un kit de testare (Nanjing Institute of Bioengineering).
Determinarea dimensiunii leziunii țesutului hepatic de șoareci
O parte din țesutul hepatic al șoarecilor a fost fixată cu 10% formalină timp de 24 de ore. Gradientul etan-nol a fost deshidratat și transparent, încorporat în parafină, iar secțiunile au fost deprajate până la hidratare cu gradient de etanol, colorate cu hematoxilină și eozină (H&E). Modificările patologice ale ficatului au fost observate la microscop prin mărimea vacuolelor și a picăturilor de lipide.
Izolare ARN și proceduri PCR
Țesutul hepatic a fost măcinat sub formă de pulbere sub condiția adăugării continue de azot lichid, iar ARN-ul total al ficatului a fost extras în conformitate cu cerințele operaționale ale kitului de extracție a ARN-ului total al coloanei de țesut animal (Shanghai Shenggong Bioengineering Co., Ltd.), iar concentrația de ARN a fost măsurată folosind un spectrofotometru de fluorescență.
ARN-ul de țesut hepatic de șoarece a fost transcris invers într-un șablon de ADNc amplificat într-o baie de metal la 4 ° C conform instrucțiunilor kitului de transcripție inversă TaKaRa și adăugat sistemului de reacție RT-PCR ulterior. Primerii utilizați în RT-PCR sunt prezentați în
Western blot
centrifugat și supernatantul a fost păstrat pentru analize de proteine. O metodă colorimetrică BCA a fost utilizată pentru a determina concentrația de proteine. Proteina a fost cuantificată cu 120 μg, fiartă timp de 5 minute și încărcată pe un gel SDS-PAGE 10%, 1,5 ore, electrotransfer complet umed transferat la membrana PVDF. Blocați cu 5% lapte degresat
proteina a fost determinată de software-ul Image J pentru a obține nivelul de expresie relativ al proteinei țintă.
Toate datele experimentale sunt exprimate ca medie ± deviație standard (medie ± SD), iar analiza statistică a fost efectuată utilizând software-ul SPSS 17.0. După testul de normalitate și omogenitate al varianței, analiza unică a varianței a fost realizată, iar SNK-q a fost utilizat pentru comparație între grupuri. p 0,05).