ARN T4 Ligaza 2, KQ NEB trunchiat
Nu sunteți sigur ce ligă să alegeți? Consultați diagrama proprietăților ADN și ARN Ligază.
T4 ARN Ligaza 2, KQ trunchiată ligează capătul 5 ’pre-adenilat al ADN-ului sau ARN-ului la capătul 3’ al ARN-ului.
- Activitate redusă de adenilare a lizilului
- Izolat de o sursă recombinantă
- Livrat cu tampon de reacție 10X
- Necesită ARN sau ADN pre-adenilat 5 'pentru ligare
- Testat pentru absența endonucleazelor, exonucleazelor, RNazelor și fosfatazelor
- Nu sunteți sigur ce ligă să alegeți? Consultați diagrama proprietăților ADN și ARN Ligază
Video prezentat
Evitarea contaminării cu RNase
T4 ARN Ligaza 2, KQ trunchiată (T4 Rnl2tr R55K, K227Q) ligează în mod specific capătul 5´ preadenilat al ADN-ului sau ARN-ului la capătul 3´ OH al ARN-ului. Enzima nu folosește ATP pentru ligare, dar necesită linkeri pre-adenilați.
T4 Rnl2tr R55K, K227Q este un mutant în dublu punct al T4 ARN ligazei 2, trunchiat (NEB # M0242). Mutația K227 în T4 ARN Ligaza 2 reduce enzima lizil adenilare (1). K227Q reduce formarea produselor de ligatură nedorite (concatemeri și cercuri) de către T4 Rnl2tr (2,3), prin reducerea activității de urmărire a T4 Rnl2tr în transferul grupelor adenilil de la linkeri la 5´-fosfați de intrare ARN (3). Mutația R55K în T4 Rnl2tr K227Q crește activitatea de ligare a enzimei la niveluri similare cu T4 Rnl2tr (3).
Excluderea ATP, utilizarea linkerilor pre-adenilate și activitatea redusă a enzimei lizil adenilării oferă cel mai mic fond posibil în reacțiile de ligare. Această enzimă a fost utilizată pentru ligarea optimizată a linkerului pentru construirea unei biblioteci de secvențializare cu randament ridicat de ARN mic (4).