Antagonistul estrogenilor EM - 652 și dehidroepiandrosteronul previn dieta - și ovariectomia - indusă

Centrul de cercetare al spitalului Laval, Universitatea Laval, Quebec, Canada

Centrul de Cercetări în Endocrinologie Moleculară și Oncologie al Universității din Laval, Departamentul de Anatomie și Fiziologie, Facultatea de Medicină, Universitatea din Laval, Quebec, Canada

Centrul de cercetare al spitalului Laval, Universitatea Laval, Quebec, Canada

Departamentul de Anatomie și Fiziologie, Facultatea de Medicină, Universitatea Laval, Quebec, QC, Canada G1K 7P4. E-mail: [email protected] Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Centrul de cercetare al spitalului Laval, Universitatea Laval, Quebec, Canada

Departamentul de Anatomie și Fiziologie, Facultatea de Medicină, Universitatea Laval, Quebec, QC, Canada G1K 7P4. E-mail: [email protected] Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Abstract

Obiectiv: EM - 652 este un antiestrogen pur în celulele cancerului de sân și uter uman care reduce, de asemenea, pierderea osoasă și nivelul lipidelor plasmatice la șobolan. Acest studiu a avut ca scop evaluarea capacității EM-652, singur sau cu dehidroepiandrosteron (DHEA), de a preveni obezitatea și anomaliile metabolice asociate induse de o dietă care promovează obezitatea și ovariectomia.

Metode și proceduri de cercetare: Șobolanii femele au fost hrăniți cu o dietă bogată în zaharoză, bogată în grăsimi (HSHF), au fost lăsați intacti sau ovariectomizați (OVX) și au fost tratați cu EM-652, DHEA sau ambele timp de 20 de zile. Au fost evaluate variabilele de echilibru energetic și factorii determinanți ai metabolismului lipidic și sensibilității la insulină.

Rezultate: Dieta HSHF (vs. chow) și OVX au crescut aportul și câștigul de energie, precum și eficiența energetică. Atât EM - 652, cât și DHEA au prevenit câștigul de energie indus de dietă și de OVX, în principal prin scăderea depunerii de grăsimi, fără a fi aditivi. Creșterea modestă a trigliceridelor hepatice induse de EM-652 a șobolanilor intacti a fost prevenită prin combinarea sa cu DHEA. EM - 652, dar nu DHEA, a scăzut colesterolemia. Dieta HSHF și OVX au redus sensibilitatea la insulină, efect care a fost atenuat de EM-652 și abrogat de DHEA și EM-652 + DHEA. Tratamentul cu EM - 652, DHEA sau combinația lor a abolit dieta - și creșterea indusă de OVX a activității lipiproteinelor lipazice adipoase care a însoțit creșterea grăsimilor.

Discuţie: EM - 652 este un agent eficient pentru prevenirea obezității induse de dietă și OVX și de factorii de risc cardiovascular asociați, precum rezistența la insulină. Adăugarea de DHEA previne acumularea de lipide hepatice și ameliorează în continuare sensibilitatea la insulină. Prin urmare, efectele metabolice benefice ale unei astfel de terapii combinate cu steroizi se pot dovedi relevante din punct de vedere clinic.

Introducere

OVX duce la o creștere semnificativă a rezervelor de energie corporală ale șobolanului (15), (16)) datorită îndepărtării estrogenului (15), (16), (17)), ceea ce duce la creșterea eficienței energetice (18)). Prin urmare, la om, pierderea treptată a estrogenului poate contribui la creșterea în greutate, în special ca grăsime viscerală, care a fost raportată la femei în timpul și după menopauză (19), (20)). Consecințele pierderii de estrogen asupra echilibrului energetic pot deveni deosebit de relevante în societățile bogate caracterizate prin consumul de diete cu conținut ridicat de energie. La modelele animale, obezitatea indusă fie de OVX (5), (17)), fie de diete cu conținut ridicat de energie (21), (22), (23)) duce la anomalii ale metabolismului glucozei și lipidelor care amintesc de cele tipice sindromul de rezistență la insulină umană sau sindromul X, care cuprind rezistența la insulină a metabolismului glucozei, hiperinsulinemie, dislipidemie, hipertensiune arterială, un cadru pro-inflamator și disfuncție endotelială (24), (25), (26)).

Metode și proceduri de cercetare

Animale și tratamente

Greutatea corporală, aportul alimentar și câștigurile corporale în energie, grăsimi și proteine

Colecția de sânge și țesuturi

În momentul sacrificării, sângele colectat prin puncție cardiacă a fost centrifugat la 1500g, 4 ° C timp de 15 min. Plasma a fost depozitată la -70 ° C pentru măsurători biochimice ulterioare. O probă de ficat a fost imediat înghețată și depozitată la -70 ° C până la determinarea ulterioară a conținutului de lipide. Țesuturile adipose albe retroperitoneale și inghinale (WAT) au fost excizate și țesuturile au fost cântărite. Aproximativ cincizeci de miligrame au fost omogenizate, folosind polizoare de țesut din sticlă (Kontes, Vineland, NJ), în 1 ml dintr-o soluție conținând 0,25 M zaharoză, 1 mM EDTA, 10 mM Tris-HCL și 12 mM deoxicolat, pH 7,4. Omogenatele au fost centrifugate la 12.000g, 4 ° C timp de 20 min. Fracțiunea dintre stratul superior de grăsime și sedimentul inferior a fost îndepărtată după felierea tubului, diluată cu 4 volume de soluție de omogenizare fără deoxicolat și stocată la -70 ° C până la măsurarea ulterioară a conținutului de proteine și a activității lipoprotein lipazei (LPL).

Măsurători plasmatice

Concentrațiile de glucoză plasmatică au fost măsurate cu ajutorul analizorului de glucoză Beckman (Beckman Instruments, Palo Alto, CA). Colesterolul plasmatic a fost cuantificat folosind un kit de reactivi de la Roche Diagnostics (Montreal, Quebec, Canada). Trigliceridele plasmatice au fost testate printr-o metodă enzimatică utilizând un kit de reactivi de la Roche Diagnostics care a permis corectarea glicerolului liber. Insulina plasmatică a fost determinată prin radioimunotest folosind un set de reactivi de la Linco Research (St. Charles, MO) cu insulină de șobolan ca standard. Un indice al rezistenței la insulină la jeun, constând din produsul glucozei și insulinei la jeun, a fost estimat conform evaluării modelului homeostaziei de rezistență la insulină (HOMA-IR) descris de Matthews și colab. ((38)).

Măsurători ale țesuturilor

Analize statistice

Datele sunt prezentate ca medii ± SEM și au fost analizate statistic prin ANOVA factorială. În primul rând, pentru a aprecia efectele obezității - promovarea tratamentelor în sine, efectele respective și interactive ale dietei (dieta chow și HSHF) și a stării ovariene (intacte și OVX) asupra punctelor finale au fost analizate printr-o ANOVA factorială 2 × 2. În al doilea rând, efectele tratamentelor medicamentoase individuale la animalele hrănite cu dieta care promovează obezitatea au fost analizate la animale intacte și OVX separat, cu un factor ANOVA. Comparații perechi între tratamentele medicamentoase au fost făcute atunci când s-a obținut un efect semnificativ general al medicamentului într-un statut ovarian dat. Coeficienții de corelație Pearson au fost calculați pentru a stabili asociații statistice între unele variabile. În toate analizele, a valoarea ≤ 0,05 a fost considerată semnificativă statistic.

Rezultate

Creșterea cumulativă (A) și cea finală în greutate corporală (B) a șobolanilor intacti și OVX hrăniți cu o dietă favorabilă obezității și tratați timp de 20 de zile cu placebo, EM-652, DHEA sau ambele medicamente. Fiecare punct și bară reprezintă media ± SEM a opt animale. Analiza statistică a fost efectuată numai la creșterea finală în greutate. Barele care nu partajează un supercript comun sunt diferite între ele în cadrul cohortei intacte sau OVX la