ANALIZA MODELULUI HEMOGLOBINEI - Prevenirea talasemiilor și a altor tulburări ale hemoglobinei - NCBI

Bibliotecă NCBI. Un serviciu al Bibliotecii Naționale de Medicină, Institutele Naționale de Sănătate.

hemoglobinei

Old J, Harteveld CL, Traeger-Synodinos J, și colab. Prevenirea talasemiilor și a altor tulburări ale hemoglobinei: Volumul 2: Protocoale de laborator [Internet]. Ediția a II-a. Nicosia (Cipru): Federația Internațională Talasemie; 2012.

Prevenirea talasemiilor și a altor tulburări ale hemoglobinei: Volumul 2: Protocoale de laborator [Internet]. Ediția a II-a.

3.1. METODE CROMATOGRAFICE (PENTRU DETERMINAREA HbA2)

Determinarea cantitativă a HbA2 este cel mai valoros test pentru identificarea purtătorului β-talasemiei. Au fost stabilite mai multe metode, dar doar câteva sunt recomandate acum pentru acuratețea lor. Trebuie subliniat faptul că precizia și acuratețea determinării HbA2 utilizând scanarea densitometriei după electroforeza cu acetat de celuloză nu este satisfăcătoare și utilizarea sa trebuie evitată (1). Focalizarea isoelectrică (IEF) are o rezoluție excelentă care permite o cuantificare precisă, dar este greoaie și consumă mult timp. Electroforeza capilară (CE) este utilizată tot mai mult într-un cadru de diagnostic clinic pentru diagnosticarea hemoglobinopatiilor. Mai multe studii au arătat o corelație excelentă între electroforeza capilară și cromatografia cu schimb de cationi de înaltă performanță (HPLC) pentru analiza calitativă și cantitativă a hemoglobinei (2-4).

Cele mai utilizate metode pentru măsurarea HbA2 sunt CE, HPLC și mai rar microcromatografia pe DE-52 (5-8). Aceste metode sunt foarte precise, rapide și simple. În plus, CE și HPLC identifică și măsoară multe variante de hemoglobine, inclusiv variantele frecvent întâlnite HbS, HbC, HbE și Hb D-Punjab. Figura 3.1 prezintă exemple de cromatograme HPLC de la 4 analizoare diferite (Variant II, HA 8160, G7 și Ultra 2) în comparație cu CE.

FIG. 3.1

Exemple de cromatograme HPLC în comparație cu CE (adaptat de la van Delft și colab. 2009 ref 4). De la stânga la dreapta: Capilare CE, Varianta II, HA 8160, G7 și Ultra 2. a = normal; b = HbA/S; c = HbA/C; d = HbA/E; e = HbA/D; f = β-talasemie heterozigotă HbA2 ridicată. (Mai mult.)

3.1.1. HPLC PENTRU PROIECTAREA EMOGLOBINOPATIILOR

Cation: schimbul de cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) a apărut ca metodă de alegere pentru cuantificarea HbA2, HbF și pentru detectarea și cuantificarea variantelor de Hb, în ​​special cele care pot interacționa cu β-talasemia, cum ar fi HbS, E, C, O -Arab, D și Lepore.