ADIPOCITUL (PRO) DEFICIENȚA RENIN-RECEPTORUL INDUCE LIPODISTROFIA, STEATOZA FICATULUI ȘI MĂREȘTE SÂNGE
Chia-Hua Wu
1 Departamentul de farmacologie și științe nutriționale, Universitatea din Kentucky, Lexington, KY
Shayan Mohammadmoradi
1 Departamentul de farmacologie și științe nutriționale, Universitatea din Kentucky, Lexington, KY
Joel Thompson
2 Divizia de endocrinologie și medicină moleculară, Universitatea din Kentucky, Lexington, KY
Wen Su
3 Departamentul de fiziologie, Universitatea din Kentucky, Lexington, KY
Ming Gong
3 Departamentul de fiziologie, Universitatea din Kentucky, Lexington, KY
Genevieve Nguyen
4 Institutul Național al Sănătății și Cercetării Medicale (INSERM) și Collège de France, Unitatea de Medicină Experimentală, Paris, Franța
Frédérique Yiannikouris
1 Departamentul de farmacologie și științe nutriționale, Universitatea din Kentucky, Lexington, KY
Date asociate
Abstract
Hipertensiunea este principala cauză a bolilor cardiovasculare la nivel mondial și, potrivit NHANES III, prevalența hipertensiunii arteriale continuă să crească. 1,2 Obezitatea este un factor de risc important pentru hipertensiune. 1 Sistemul de renină angiotensină (RAS) este recunoscut pentru că joacă un rol critic în reglarea tensiunii arteriale și a homeostaziei de sodiu și apă. Ștergerea componentelor RAS, de exemplu angiotensinogen (AGT) în ficat sau în țesutul adipos, previne hipertensiunea arterială legată de obezitate. 3.4
Metode și animale
Toate procedurile care implică animale au fost efectuate în conformitate cu Ghidul Institutelor Naționale de Sănătate pentru Îngrijirea și Utilizarea Animalelor de Laborator și au fost aprobate de Comitetul Instituțional de Îngrijire și Utilizare a Animalelor de la Universitatea din Kentucky (numărul protocolului IACUC al Universității din Kentucky: 2013-1109 ). Șoarecii femele cu situsuri loxP care înconjoară exonul 2 al genei PRR (PRR fl/fl) au fost crescuți la șoareci masculi transgenici (PRR fl/Y) care exprimă recombinaza Cre sub controlul promotorului adiponectinei (Denumirea tulpinii: B6; FVB-Tg ( Adipoq-cre) 1Evdr/JB6; FVB-Tg (Adipoq-cre) 1Evdr/J) 24 (Figura 1A). Dietele, măsurătorile plasmei, histologia, radiotelemetria și analizele statistice sunt descrise în Suplimentul de date numai online.
(A) Reprezentarea schematică a alelei PRR flancate loxP înainte de (a) și după recombinare cu expresia Cre (Ad) de la Adiponectin (b). (B) PRR mRNA abundență de adipocit diferențiat de țesutul adipos subcutanat al șoarecilor PRR fl/Y și PRR Adi/Y. Datele sunt medii ± SEM de 3 până la 6 șoareci. * Șoareci P fl/Y.
analize statistice
Rezultatele sunt exprimate ca medie ± SEM. Toate datele au fost analizate folosind Sigma Plot și Graph Prism. ANOVA (și măsurile repetate ANOVA, atunci când este cazul) au fost utilizate pentru a compara dieta și efectele genotipului, urmate de teste post-hoc folosind corecții Holm-Sidak sau Bonferroni pentru comparații multiple. Când ipotezele care stau la baza ANOVA-urilor nu au fost îndeplinite altfel, datele au fost transformate neliniar; cu toate acestea, pentru ușurarea ilustrării, cifrele arată date netransformate. GraphPad QuickCalcs (testul lui Grubbs) a fost utilizat pentru a determina valorile aberante statistice și s-a folosit un test t pentru a compara nivelurile medii de insulină între șoarecii alimentați cu HF și LF. Semnificația statistică a fost definită ca Pf/Y) și șoarecii cu deficit de adipocite PRR (PRR Adi/Y) au fost diferențiați în adipocite (Figura 1A). Abundența PRR mARN a fost redusă semnificativ în adipocite diferențiate de șoarecii PRR Adi/Y în comparație cu șoarecii PRR fl/Y de control (Figura 1B; P Figura 2A) fără nicio diferență semnificativă între genotipuri. Masa de grăsime a fost semnificativ redusă la PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y (Figura 2B) și nu a crescut odată cu vârsta la șoarecii PRR Adi/Y care sugerează că șoarecii PRR Adi/Y nu acumulează țesut adipos (Figura S1) . Masa tuturor țesuturilor adipoase albe a fost semnificativ redusă la șoarecii PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y (Tabelul S1, șoarecii P fl/Y au relevat prezența adipocitelor diferențiate pe toată secțiunea, în timp ce analiza histologică a țesutului adipos rezidual din în jurul epididimului PRR Șoarecii Adi/Y au arătat un număr neașteptat de mic adipocite diferențiate (Figura S2). Pentru a determina dacă PRR adipocit a fost implicat în diferențierea adipocitelor, PRR a fost redus la tăcere in vitro în celulele 3T3-L1 (Figura S3). Au fost evaluate PPARγ, o genă importantă implicată în diferențierea adipocitelor și proteina 4 care leagă acidul gras (Fabp4 sau aP2), un marker pentru adipocite diferențiate și o proteină purtătoare pentru acizii grași. Abundența de ARNm PPARγ și Fabp4 au fost semnificativ reduse în celule siPRR diferențiate în comparație cu celulele de control.
Deficitul de adipocite PRR a redus masa grasă la șoarecii hrăniți cu o dietă standard. (A) Curbele greutății corporale ale șoarecilor PRR fl/Y și PRR Adi/Y. Datele sunt medii ± SEM de 4 până la 6 șoareci. (B) Masa grasă (% din greutatea corporală) pentru șoareci din fiecare grupă. Datele sunt medii ± SEM de 4 până la 6 șoareci. * P fl/Y .
Greutatea țesuturilor la ficat, splină și pancreas a fost semnificativ mai mare la șoarecii PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y (Tabelul S1). Concentrațiile plasmatice de leptină au fost mai mici la șoarecii PRR Adi/Y decât la șoarecii PRR fl/Y (Tabelul S1). Toleranța la glucoză nu a diferit între genotipuri în săptămânile 5, 9 sau 13 ale experimentului (Figura S4).
Deficitul specific de adipocite al PRR a declanșat acumularea de lipide la ficatul șoarecilor masculi hrăniți cu o dietă standard
Examinarea microscopică a secțiunilor hepatice a evidențiat o creștere a acumulării de grăsime hepatică cuprinzând vacuole mici și mari de grăsime la șoarecii PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y (Figura S5). Lipidele neutre au fost semnificativ crescute în ficatul șoarecilor PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y. Trigliceridele plasmatice nu au diferit semnificativ între grupuri (Tabelul S1).
Deficitul specific de adipocite al PRR a crescut tensiunea arterială sistolică la șoarecii masculi hrăniți cu o dietă standard
SBP și presiunea pulsului au fost semnificativ mai mari la șoarecii PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y (Figura 3). Presiunea arterială medie, tensiunea arterială diastolică și ritmul cardiac nu au diferit semnificativ între grupuri (Tabelul S2).
Deficitul de PRR adipocitar a crescut tensiunea arterială sistolică (SBP; 24 ore) la șoarecii care au primit o dietă standard. (A) SBP (24 ore) pentru șoareci PRR fl/Y și PRR Adi/Y șoareci. Datele sunt medii ± SEM la 4 șoareci. * Șoareci P fl/Y.
Deficitul specific de adipocite al PRR a crescut concentrațiile plasmatice de sPRR
Deficitul specific de adipocite al PRR nu a modificat concentrația plasmatică a AGT (Figura 4A). Activitatea reninei plasmatice (PRA) și concentrația reninei plasmatice (PRC) nu au diferit semnificativ între șoarecii PRR Adi/Y și șoarecii PRR fl/Y (Figura 4B), sugerând că deficiența specifică a adipocitelor PRR nu a influențat AGT, PRA sau PRC . În mod surprinzător, nivelurile plasmatice de sPRR au crescut de trei ori la șoarecii PRR Adi/Y comparativ cu șoarecii PRR fl/Y (Figura 4C).