Sub piele Ixodes bifează în țesutul subcutanat al vulpilor roșii (Vulpes vulpes) din Germania
Abstract
fundal
Ixodes spp. sunt vectori ai agenților patogeni zoonotici. Toate cele trei etape active ale vieții (larve, nimfe, adulți) trebuie să se hrănească cu o gazdă pentru a se dezvolta. De obicei căpușele parazitează atașate la suprafața exterioară a pielii gazdelor lor. Interesant este că, în unele cazuri, căpușele pot fi găsite și în țesutul subcutanat într-o varietate de gazde, cum ar fi vulpile roșii (Vulpes vulpes), câini ratonNyctereutes procyonoides) și câini.
Metode
Partea viscerală a 126 de blănuri de vulpe roșie din Germania a fost examinată vizual căutând căpușe. Localizarea căpușelor a fost înregistrată și atribuită la zece părți specifice ale corpului. Identificarea morfologică a căpușelor a fost efectuată conform protocoalelor taxonomice standardizate. Căpușele care nu au putut fi identificate în continuare au fost examinate genetic prin intermediul PCR convențional care vizează 16S ARNr și cox1 genă. Colorarea hematoxilinei și eozinei (H&E) a fost folosită pentru examenul histopatologic.
Rezultate
În 111 din 126 (88,1%) straturi examinate, cel puțin o căpușă a fost găsită în țesutul subcutanat. Un total de 1203 căpușe au fost îndepărtate din țesutul subcutanat. Căpușele bine conservate ar putea fi identificate pe baza criteriilor morfologice, dar majoritatea căpușelor se aflau într-o stare progresivă de descompunere. Aici, identificarea speciilor morfologice nu a avut succes. De asemenea, metodele PCR nu au condus la identificarea cu succes a speciilor. Următoarele specii și etape de dezvoltare au fost găsite prin identificare morfologică: Ixodes ricinus (Femeie, = 289; masculin, = 8; nimfă, = 1), I. hexagon (Femeie, = 2), I. canisuga (Femeie, = 1). Masculin I. ricinus au fost găsite individual sau copulând în perechi cu femele. Căpușele subcutanate au fost localizate la trei părți ale corpului afectate predominant: urechi, regiune axilară și inghinală. Examenul histologic al căpușelor subcutanate a evidențiat o paniculită granulomatoasă.
Concluzii
Din cunoștințele autorilor, aceasta este prima constatare a căpușelor subcutanate foarte răspândite la vulpile roșii din Germania. Localizarea subcutanată a căpușelor pare a fi foarte frecventă la vulpile roșii și la regulă, mai degrabă decât la excepție. Incorporarea profundă a longirostrei și timpul lung de hrănire a femelelor par să favorizeze localizarea subcutanată. Majoritatea vulpilor au fost infestate în zona inghinală, unde pielea este subțire și mai puțin păroasă.
fundal
Căpușe aparținând genurilor Ixodes și Dermacentor (Familia: Ixodidae) sunt cele mai răspândite în Europa [1]. Toate etapele de viață activă a căpușelor (larva cu șase picioare, nimfa cu opt picioare și femele) necesită mese de sânge de la gazde pentru mutare (imaturi) sau pentru ovipoziție (femele), cu excepția masculilor care se hrănesc facultativ și sunt localizați pe gazde, în special pentru împerechere scopuri [1, 2].
În Germania specia Ixodes ricinus, I. hexagon, I. canisuga și I. kaiseri au fost frecvent colectate de la vulpi [3,4,5,6,7,8]. În plus, Dermacentor reticulatus și Haemaphysalis concinna s-au găsit ocazional atașați de pielea vulpilor roșii [7, 9]. Căpușele sunt de obicei atașate puternic de suprafața exterioară a gazdelor lor pentru a rămâne la locul lor pentru o masă de sânge. Prin urmare, piesele bucale ale căpușelor pătrund în diferite straturi ale pielii, în funcție de lungimea lor. Căpușe cu piese bucale lungi (longirostra de ex. Amblyomma, Hialomma și Ixodes) încorporat în straturi adânci ale dermei în timp ce căpușele cu părți bucale scurte (brevirostra de ex. Dermacentor, Haemaphysalis și Rhipicephalus) abia pătrund în epidermă [10, 11]. Ixodes ricinus larvele sunt atașate timp de 2-4 zile, nimfele timp de 4-6 zile și femelele timp de 6-10 zile [12].
Interesant este că, în unele cazuri, căpușele pot fi găsite și în țesutul subcutanat într-o varietate de gazde, inclusiv vulpile roșii. Prezența căpușelor subcutanate, cum ar fi I. ricinus, I. hexagon, I. crenulatus și D. reticulatus a fost remarcat la vulpile roșii în mai multe studii de caz din Marea Britanie, Polonia, Austria, România, Slovacia și Republica Cehă [13,14,15,16,17,18,19,20]. În SUA, specia nativă de căpușe Amblyomma americanum a fost, de asemenea, descoperit în țesutul subcutanat al vulpilor roșii [21].
În afară de vulpile roșii, rapoartele de caz unic de căpușe subcutanate au fost înregistrate anterior la câinii raton (Nyctereutes procyonoides) din Polonia [22], la un câine din Suedia [23] și la un copil din Coreea de Sud [24].
Până în prezent, dimensiunile mici ale eșantioanelor au fost raportate în majoritatea cazurilor, de asemenea, mai degrabă ca rezultate ocazionale [13,14,15,16,17, 21]. Până în prezent, nu există date publicate despre căpușele subcutanate la vulpile roșii sau alte animale din Germania. Acesta este motivul pentru care acest studiu își propune să evalueze frecvența căpușelor subcutanate la vulpile roșii din Germania folosind un număr mare de probe. Localizarea căpușelor subcutanate în diferite regiuni ale corpului vulpii roșii nu a fost încă analizată; prin urmare, am documentat localizarea fiecărei căpușe pentru a determina abundența acestor căpușe în țesutul subcutanat. Identificarea precisă a speciilor de căpușe subcutanate pe baza criteriilor morfologice este posibilă numai într-o măsură limitată datorită procesului avansat de degradare în țesutul subcutanat, așa cum s-a văzut în studiile anterioare [18]. Prin urmare, acest studiu își propune să utilizeze tehnici de biologie moleculară pentru a identifica căpușe subcutanate la nivelul speciilor.
Metode
Colectarea animalelor
În perioada noiembrie 2018 - februarie 2019 vânătorii locali au împușcat vulpi roșii și alte vânate sălbatice într-un curs de vânătoare tradițională. În cooperare cu o stație de răzuire (Fellwechsel Berlin, Germania), vânătorii locali din toată Germania au depus carcase de vulpe în pungi de plastic etichetate cu data și locația geografică exactă în congelatoare. Doar vulpile adulte cu stare nutrițională bună au fost selectate de vânătoare. Cadavrele de vulpe au fost depozitate la - 80 ° C până la descuamare. Pentru a permite studiile histologice, o vulpe a fost jupuită direct după vânătoare.
Colectarea și identificarea căpușelor
Partea viscerală a fiecărei blănuri a fost examinată vizual pentru prezența căpușelor subcutanate. Localizarea căpușelor a fost înregistrată pe o imagine schematică pre-desenată și atribuită la zece părți specifice ale corpului (urechi, gât, regiunea axilară, umăr, spate, burtă, regiune inghinală, regiune anorectală, picioare și coadă) pentru a crea un corp harta densității căpușelor (Fig. 1), după cum recomandă Lydecker și colab. [25]. Ulterior, căpușele au fost disecate individual din țesutul subcutanat cu o forceps cu vârf fin și un bisturiu și depozitate la - 20 ° C (Fig. 2). Căpușele bine conservate ar putea fi identificate pe baza criteriilor morfologice în conformitate cu protocoalele taxonomice standardizate [26] sub un binoclu la mărire de 50 × (Motic SMZ-171, Motic Deutschland GmbH, Wetzlar, Germania).