Studiul E
Petre Shotadze Tbilisi Medical Academy, G. Eliava Institute of Bacteriophages, Microbiology and Virology, Georgia
* Autor corespondent: Taras Gabisonia
Petre Shotadze Tbilisi Medical Academy
Institutul de bacteriofagi G. Eliava
Microbiologie și virologie, Georgia
Tel: +99577423225
E-mail: [e-mail protejat]
Data primiriiStk #: 03 decembrie 2019; Data acceptată: 20 decembrie 2019; Data publicării: 27 decembrie 2019
Citare: Gabisonia T, Loladze M, Zarnadze M, Kekenadze N, Lomidze M, și colab. (2020) Studiul agenților patogeni E.coli care cauzează infecții intențioanale și utilizarea preparării bacteriofagului-fagul Coli. Arch Clin Microbiol Vol. 11 Nr. 1:99
Abstract
Conform datelor Organizației Mondiale a Sănătății (OMS), aproximativ 2 miliarde de persoane se îmbolnăvesc anual de infecții intestinale. Agenții patogeni care se răspândesc prin alimente și apă sunt principalele cauze ale bolii și mortalității; acestea duc la moartea a aproximativ 1,8 milioane în fiecare an. Rezultând din problema menționată, are o importanță deosebită efectuarea cercetării microbiologice și moleculare a agenților patogeni bacterieni care cauzează infecții intestinale. Unul dintre principalii agenți patogeni, care se răspândește prin ape, este o varietate de Salmonella, patogen Escherichia coli și Shigella. Monitorizarea agenților patogeni legați de alimente și apă ar facilita procesul de reducere a frecvenței acestora în mediu, ceea ce, de la sine, ar reduce riscul de răspândire a bolilor cauzate de agentul patogen menționat în rândul oamenilor. Identificarea timpurie a acestor agenți patogeni are importanța vitală pentru un tratament rapid și eficient.
Cuvinte cheie
Agenți patogeni; E coli
Introducere
Alternativa pentru antibiotice sunt medicamentele comerciale pentru fagi, printre care se numără bacteriofagul Coli, care conține bacteriofagi specifici, care are bacteriofagi specifici împotriva E. coli patogen. Utilizarea medicamentelor pe bază de fagi este inofensivă pentru corpul uman, deoarece fagii au doar activitate de liză către bacteriile patogene [11,12].
Lucrarea prezentată aici își propune să identifice E. coli patogen care cauzează infecții intestinale în probele clinice, precum și în alimente (carne de vită). Pentru a defini sensibilitatea antibioticelor față de tulpinile menționate, de asemenea, împreună cu medicamentul comercial pentru fagi - Coli Phage, a cărui structură conține bacteriofagi împotriva E. coli patogen. În plus, pentru a determina sensibilitatea tulpinilor patogene față de acest medicament.
Materiale și metode
Izolarea tulpinilor de E. coli
Pentru izolarea tulpinilor de E. coli, o buclă din specimenele diluate a fost inoculată în agar MacConkey și incubată la 37 ° C timp de 18-24 ore. Coloniile bacteriene au fost identificate pe baza morfologiei brute, a unui număr de colonii și a modelului hemolitic. Testele biochimice și serologice adecvate au fost efectuate pe coloniile izolate pentru a identifica agenții patogeni.
Serogruparea izolatelor de E. coli
Serogrupurile de E. coli au fost identificate serologic prin testul de aglutinare cu diapozitive folosind antiseruri standard de E. coli polivalente și monovalente (O114, O86, O26, O55, O36, O111, O119, O125, O126, O142, O157) conform Edwards și Ewing (1972) ) [13].
Testarea susceptibilității antimicrobiene
Pentru a analiza profilul anti-biogramă al izolatelor, toate tulpinile izolate de E. coli au fost testate pentru sensibilitate la 15 agenți antimicrobieni diferiți, care sunt cei mai utilizați în clinici: penicilină (P), ampicilină (A), carbenicilină (Cb), ampiox (Ap) cloramfenicol (C), streptomicină (S), tetraciclină (T), gentamicină (G), kanamicină (K), eritromicină (E), meticilină (M), fortum (F), cefamezină (Cf), ketotefen ( Kt), claforan (Cl) Azithromycin (Az), Ciprofloxacin (Cip), Imipenem (Im), Cefazoline (Cef), Polymoxin (Pm). Sensibilitatea acestor izolate la agenți antimicrobieni a fost realizată prin metoda de difuzare a discului în conformitate cu standardele Comitetului Național pentru Standarde de Laborator Clinic [14].
Sistem de identificare a bacteriilor din grupul intestinal
Reprezintă un sistem standardizat, care conține 21 de mini teste biochimice și este aplicat pentru a identifica bacteriile din grupul gastro-intestinal și alte bacterii gram-negative.
Principiu
Api 20 E constă din 20 de micro-eprubete, care conțin substraturi deshidratate. Suspensia bacteriană introdusă în bandă intră în reacție cu un substrat dat. În timpul incubației, culoarea se schimbă, ceea ce ar putea fi definit direct sau prin adăugarea reactivilor.
Procesul de citire a reacțiilor se realizează prin utilizarea tabelului interpretativ respectiv.
În timp ce se acumulează rezultate pozitive, se creează profilul digital și, prin catalogul analitic respectiv, se definesc numele și varietatea cauzei.
Izolarea bacteriofagului
Bacteriofagii au fost izolați din apele uzate prin filtrare, urmat de adăugarea de concentrat de bulion și culturi de 18 h de diferite tulpini (tulpini de testat) la filtrat. După 24 de ore de incubație într-un termostat, amestecul a fost filtrat prin filtre cu un diametru al porilor de 0,45 μm (Millipore, Statele Unite), iar filtratele au fost testate la fața locului pentru prezența fagilor prin aplicarea filtrului (0,1 ml) pe gazonul tulpinii testate pe un mediu nutritiv solid. Rezultatul a fost considerat pozitiv dacă a existat o zonă de liză pe gazon în 18-24 ore de cultivare la 37 ° С [15]. Tulpinile bacteriofage foarte specifice au fost selectate și selectate prin metoda plăcii conform Gracia [16].
Clonarea bacteriofagilor prin izolarea repetată a plăcii unice