Semnalizarea gratuită a receptorilor de estrogen cu text integral fără molecule și calea PI3KAkt sunt implicate

Acidul betulinic (BA) crește fosforilarea oxidului nitric sintetic endotelial (eNOS) la reziduul Ser 1177 într-o manieră dependentă de concentrație. Celulele endoteliale EA.hy 926 umane au fost tratate cu 1, 3, 10 30 sau 100 uM de BA timp de 30 de minute sau DMSO cu solvent de control. (A) Analiza Western blot a fost efectuată folosind un anticorp fosfo-specific și un anticorp eNOS total. ENOS total și β-tubulină au fost utilizate pentru normalizare. Coloanele reprezintă media aritmetică și deviația standard. * p n = 9; (B) prezintă pete reprezentative.

estrogen

Modelul Emax al creșterii procentuale a fosforilării eNOS induse de acidul betulinic la reziduul Ser 1177. O ecuație Hill cu o eficacitate maximă (Emax) de 85,9 și o concentrație efectivă jumătate maximă (EC50) de 0,57 µM și un factor de formă de 0,7374 este cea mai potrivită pentru datele experimentale.

Acidul betulinic (BA) crește fosforilarea eNOS la reziduul Ser 1177 sau într-o manieră dependentă de timp. Celule endoteliale EA.hy 926 umane au fost tratate cu 30 uM BA timp de 15, 30 și 60 min. Controalele (C) au fost incubate cu 1 (DMSO. (A) Analiza Western blot a fost efectuată cu un anticorp fosfo-specific și un anticorp eNOS total. ENOS total și β-tubulină au fost utilizate pentru normalizare. Coloanele reprezintă media arthmetică și deviația standard. * p n = 9; (B) prezintă pete reprezentative.

Fosforilarea eNOS indusă de acidul betulinic (BA) la reziduul Ser 1177 implică receptorul de estrogen și calea PI3K. Celulele endoteliale EA.hy 926 umane au fost pre-incubate timp de 60 de minute cu antagonistul receptorului de estrogen ICI 182.780 (10 µM; panou (A)), sau cu inhibitori ai fosfoinozidei 3-kinazei (PI3K) LY294002 (10 µM; panou (B )) și wortmannin (1 uM, panou (C)). Apoi, 30 uM BA au fost adăugați la celule și au fost incubați pentru încă 60 min. Analizele Western blot au fost efectuate cu un anticorp eNOS-Ser 1177 fosfo-specific și un anticorp eNOS total. ENOS total și β-tubulină au fost utilizate pentru normalizare. Coloanele reprezintă media aritmetică și deviația standard. * p n = 9.