Salting Out - ChemTime LibreTexts
Sarea este o metodă de purificare care utilizează solubilitatea redusă a anumitor molecule într-o soluție cu rezistență ionică foarte mare. Sarea este în mod tipic, dar nu limitată la precipitarea biomoleculelor mari, cum ar fi proteinele.
Introducere
In contrast cu sărând în, sărarea are loc în soluții apoase cu rezistență ionică ridicată care reduc solubilitatea moleculei determinând precipitarea anumitor proteine. În mod ideal, tipul de sare utilizat și concentrația de sare pot fi variate pentru a precipita selectiv o moleculă. În realitate, sărarea este un mijloc eficient pentru purificarea moleculei inițiale, dar nu are capacitatea de a izola cu precizie o proteină specifică.
Mecanismul din spatele sării
Conformarea biomoleculelor mari in vivo este de obicei controlată prin interacțiuni hidrofobe și hidrofile cu mediul celular. Aceste interacțiuni guvernează în mare măsură conformația finală a moleculei prin pliere în așa fel încât majoritatea grupurilor funcționale hidrofobe să fie protejate de mediul celular polar. Pentru a obține această conformație, molecula se pliază în așa fel încât toate părțile hidrofobe ale unei molecule sunt agregate împreună și grupurile hidrofile sunt lăsate să interacționeze cu apa. În cazul proteinelor, aminoacizii încărcați permit să apară sărarea selectivă. Aminoacizii încărcați și polari precum glutamatul, lizina și tirozina necesită molecule de apă care să le înconjoare pentru a rămâne dizolvate. Într-un mediu apos cu o putere ionică ridicată, moleculele de apă înconjoară sarcinile ionilor și proteinelor. La o anumită putere ionică, moleculele de apă nu mai sunt capabile să susțină sarcinile atât ale ionilor, cât și ale proteinelor. Rezultatul este precipitarea celui mai puțin solubil dizolvat, cum ar fi proteinele și moleculele organice mari.
Seria Hoffmeister
Sarea poate fi un instrument puternic pentru a separa clasele de proteine care variază în mărime, încărcare și suprafață, printre alte caracteristici. O metodă de control al precipitațiilor este utilizarea diferitelor efecte ale diferitelor săruri și ale concentrațiilor lor respective. Capacitatea unei sări de a induce precipitații selective depinde de multe interacțiuni cu apa și substanțele dizolvate. Cercetările efectuate de Franz Hofmeister la începutul secolului al XX-lea au organizat anioni și cationi diferiți prin capacitatea lor de a sără.
Ordinea cationilor și a anionilor se numește seria Hoffmeister (1). Cationii sunt aranjați după cum urmează