Reducerea oxigenării țesutului adipos în diabetul obezității umane

Dovezi privind rarefacția, chimiotaxia macrofagelor și inflamația fără răspuns angiogen

  1. Magdalena Pasarica,
  2. Olga R. Miercuri,
  3. Leanne M. Redman,
  4. Diana C. Albarado,
  5. David T. Hymel,
  6. Laura E. Roan,
  7. Jennifer C. Rood,
  8. David H. Burk și
  9. Steven R. Smith
  1. De la Pennington Biomedical Research Center, Baton Rouge, Louisiana
  1. Autor corespondent: Steven R. Smith, smithsrpbrc.edu

Dovezi privind rarefacția, chimiotaxia macrofagelor și inflamația fără răspuns angiogen

Abstract

OBIECTIV- Pe baza studiilor de rozătoare, am examinat ipoteza că masa crescută a țesutului adipos (AT) la obezitate fără un sprijin adecvat al vascularizației ar putea duce la hipoxie, infiltrare de macrofage și inflamație.

reducerea

PROIECTARE ȘI METODE DE CERCETARE— Presiunea parțială a oxigenului (AT pO2) și temperatura AT la AT abdominal (9 bărbați și femei slabe și 12 supraponderali/obezi) au fost măsurate prin inserarea directă a unui electrod polarografic Clark. Compoziția corpului a fost măsurată prin absorptiometrie cu raze X cu energie dublă, iar sensibilitatea la insulină a fost măsurată prin clemă hiperinsulinemică-euglicemică. Țesutul subcutanat abdominal a fost utilizat pentru colorare, RT-PCR cantitativă și testarea secreției de chemokine.

REZULTATE— AT pO2 a fost mai mic la subiecții supraponderali/obezi decât la subiecții slabi (47 ± 10,6 vs. 55 ± 9,1 mmHg); cu toate acestea, acest nivel de pO2 nu a activat țintele clasice de hipoxie (piruvat dehidrogenază kinază și factorul de creștere endotelial vascular [VEGF]). AT pO2 a fost corelat negativ cu procentul de grăsime corporală (R = -0,50, P 2) sau supraponderal/obez (27-35 kg/m 2). Recrutarea a fost efectuată prin hârtie de ziar, cărți poștale și pagina web a Pennington Biomedical Research Center (PBRC). Subiecții au fost excluși dacă au avut afecțiuni renale, cardiace, hepatice, pulmonare sau neurologice semnificative. Hipertensiunea arterială a fost acceptabilă dacă tensiunea arterială a fost de 2 pe minut) a fost continuată timp de 3-4 ore. Insulina a fost perfuzată timp de cel puțin 1 oră după atingerea unei concentrații de glucoză ∼90 mg/dl. Glucoza plasmatică a fost măsurată la fiecare 5 minute și menținută printr-o infuzie variabilă de 20% glucoză. Rata medie a perfuziei exogene de glucoză în timpul stării de echilibru (ultimele 30 de minute) a fost corectată pentru modificările glicemiei și împărțită la masa fără grăsimi pentru a evalua sensibilitatea la insulină.

Măsuri de laborator.

Următoarele analize au fost făcute pe sânge prelevat după un post peste noapte. Glucoza a fost analizată folosind un Beckman Coulter DXC 600 Pro (Brea, CA) și insulină prin test imunologic pe Siemens Immulite 2000 (Siemens, Los Angeles, CA).

AT biopsie.

Pielea a fost anesteziată cu un amestec de lidocaină (2%) și bupivocaină (0,025%). AT a fost obținut folosind un ac cu capăt contondent conceput pentru liposucție (ac de liposucție „mercedes” cu diametrul de 3 până la 4 mm; MD Resource, Hayward, CA) și prelucrat la noptieră prin spălare în PBS la 37 ° C și fixare congelată sau conservată în 10% formalină pentru blocarea parafinei. Biopsiile obținute de la primii 14 subiecți completați (8 subiecți de sex feminin și 6 de sex masculin) au fost folosiți pentru următoarele proceduri.

Eliberarea AT pe termen scurt a citokinelor.

După cum s-a descris anterior (16), AT proaspăt a fost colectat în mediu pre-gazat la 37 ° C 199 și tocat în fragmente de 2 până la 5 mg și spălat pe o plasă de nailon. Alicote au fost incubate timp de 3 ore în mediu 199 conținând 1% BSA sub o atmosferă de 95% O2 până la 5% CO2 într-o baie de apă agitată (60 cicluri/min, 37 ° C).