Propunere completă Tautog
Intenția noastră este de a arăta că o baterie de măsurători biochimice de bază combinate cu măsurători simple de reper și analize morfometrice moderne pot ajuta la atribuirea unui indice cantitativ al stării de dezvoltare a etapelor embrionare și larvare ale peștilor. Această baterie de măsurători va utiliza o tehnologie modernă ieftină, care poate fi aplicată embrionilor individuali. Această abordare ar permite proiectarea experimentelor factoriale pentru a evalua diferite aspecte ale metodelor de acvacultură în funcție de rata și uniformitatea creșterii larvelor. Experimentele factoriale sunt proiectate de partenerii noștri NMF, Dean Perry și Laurel Ramseyer, pentru a testa eficacitatea regimurilor nutriționale aplicate definite. Factorii dietetici care urmează să fie testați includ diverse specii de alge vii cultivate la laboratorul Milford NMF care vor fi analizate în funcție de spectrul lor de conținut de acid gras polinesaturat și aminoacizi. Momentul conversiei la o dietă comercială mai puțin costisitoare din pește va fi un factor în proiectarea experimentală. Dietele contrastante vor fi construite din componente analizate cu acizii grași polinesaturați C3 și C6 (PUFA) ca variabile majore. 3. PROGRESUL METODOLOGIC
Metode biochimice.
Laboratorul Kunkel este familiarizat cu tehnicile de extracție a lipidelor, analiza aminoacizilor și determinarea gravimetrică a% lipidelor în probe biologice (Kunkel și Pan, 1976). Primele câteva luni din timpul proiectului nostru s-au petrecut dezvoltând tehnicile de extracție și analiză a lipidelor. Acum suntem capabili să pregătim extracte lipidice din probele care urmează să fie furnizate de laboratorul Milford la un singur nivel de pește. Profilurile polinesaturate sunt analizate sub conducerea profesorului asociat Eric Decker de la U. Mass. Departamentul de Științe Alimentare. Analiza conținutului de proteine, ARN și ADN al ouălor și larvelor rezultate va fi efectuată prin protocoale stabilite în laboratorul Kunkel. Am obținut o probă de 8 ml de ouă tautog cu care să purificăm calmodulina și Lv și să facem un antiser anti-tautog-Lv. Mai mult, procedurile noastre în acest sens au fost recent publicate pe măsură ce le-am aplicat la Winter Flounder (Hartling și colab., 1997, 1999)