O metodă de cuantificare a consumului ilicit de droguri din metanfetamină în urină
Abstract
Analiza calitativă a urinei poate verifica abstinența abuzului de droguri, dar nu poate detecta modificări ale consumului de medicamente. Pentru medicamentele cu eliminare lentă, cum ar fi metamfetamina (MA), un singur episod de abuz poate duce la până la 5 zile de screening pozitiv al medicamentelor în urină. Astfel, intervențiile care produc scăderi substanțiale ale consumului de droguri, dar care nu obțin abstinența aproape completă sunt clasificate ca ineficiente. Folosind doze non-farmacologice de l-metamfetamină marcată cu deuteriu (l-MA-d3) am dezvoltat o metodă simplă și robustă care estimează în mod fiabil modificările aportului de MA. Doisprezece subiecți au fost dozați cu 5 mg de l-MA-d3 zilnic și au fost provocați cu 15, 30 și 45 mg de d-MA neetichetat (d-MA-d0) după ce au atins statutul stabil de plasmă de l-MA-d3. Raporturile de concentrație urinară de d-MA-d0 la l-MA-d3 au asigurat o separare clară a dozelor administrate cu creșteri ale dozei de 15 mg. Dozele administrate nu au putut fi rezolvate folosind numai concentrațiile de d-MA-d0. În concluzie, urinarul [d-MA-d0]: [l-MA-d3] oferă o măsură cantitativă și continuă a expunerii ilicite la MA. Metoda detectează în mod fiabil modificări mici, relevante din punct de vedere clinic, în aportul ilicit de MA de probe de urină aleatorii, este susceptibilă de desfășurare în studiile clinice și poate fi utilizată pentru a cuantifica modelele abuzului de MA.
Introducere
Epidemiile abuzului și dependenței de metamfetamină (MA) au loc în întreaga lume (Schifano și colab., 2007; Degenhardt și colab., 2008; McKetin și colab., 2008), alimentate de sinteza ilicită a 197-624 tone medicamente asemănătoare amfetaminei pe an, suficient pentru mai mult de 10 miliarde de doze MA de 30 mg (http://www.unodc.org/documents/wdr/WDR_2010/World_Drug_Report_2010_lo-res.pdf). Unii dintre acești agresori devin dependenți care creează consecințe sociale, de sănătate și criminalitate care afectează toate nivelurile societății (Watanabe-Galloway și colab., 2009). Astfel, există o nevoie urgentă de a dezvolta tratamente pentru dependența de MA. Din păcate, în ciuda unui efort intens din ultimii 20 de ani, niciun medicament nu s-a dovedit eficient pentru tratamentul dependenței de MA (Karila și colab., 2010).
Rezultatele testelor calitative de toxicologie a urinei sunt principalele măsuri de rezultate obiective pentru majoritatea studiilor antidicție, inclusiv studiile pentru dependența de MA. Imunoanalizele de urină care sunt sensibile (dar nu specifice) și ieftine și care pot fi desfășurate în clinică sunt frecvent utilizate în aceste studii. Pentru a elimina rezultatele fals pozitive, se confirmă identitatea medicamentului și se măsoară concentrația medicamentului în urină utilizând metode de testare sensibile și specifice care includ întotdeauna spectrometria de masă (SM). Deși aceste metode produc concentrații de urină precise și precise, mai mulți factori, inclusiv vârsta, starea de hidratare, pH-ul urinei și fluxul de urină, fac dificilă, dacă nu chiar imposibilă, extrapolarea înapoi de la concentrația de urină la cantitatea de droguri abuzată. În consecință, rezultatele testelor de droguri în urină sunt marcate doar ca o serie temporală de rezultate binare „pozitive” sau „negative”.
Abstinența este scopul tratamentelor pentru dependență, iar toxicologia calitativă a urinei este extrem de sensibilă pentru detectarea consumului de droguri la indivizii de obicei abstinenți. Cu toate acestea, nu este sensibil la detectarea reducerilor sau a perioadelor scurte (până la 2-3 zile) de abstinență la indivizi. Astfel, sunt necesare reduceri extrem de mari ale abuzului (poate până la 90%) înainte ca o reducere modestă a rezultatelor pozitive la analiza urinei să fie evidentă și tratamentul va fi acceptat ca fiind eficient (Institutul Național pentru Abuzul de Droguri/Colegiul pentru Probleme de Dependență de Droguri, 1999). Acest grad de strictețe poate fi motivul eșecului tuturor tratamentelor pentru dependența de MA testate până în prezent. Dacă este puțin probabil ca noile tratamente pentru abuzul de stimulente să producă abstinență totală bruscă, atunci metodele calitative care nu pot măsura mai puțin decât abstinența totală nu sunt susceptibile de a fi utile în selectarea medicamentelor sau a altor candidați la tratament care pot scădea, dar nu elimină aportul ilicit. Luând în considerare lista în creștere a studiilor eșuate pentru dependența MA, dezvoltarea metodelor care permit estimarea continuă nonbinară a aportului de medicamente a devenit esențială.
Pentru a determina aportul ilicit, am testat utilitatea administrării de doze orale mici, inactive farmacologic, de medicamente sau metaboliți etichetați cu deuteriu, care au profiluri farmacocinetice similare cu medicamentul de interes abuzat. Apoi, determinăm rapoartele de concentrație urinară ale medicamentului (sau metaboliților) marcat cu deuteriu neetichetat (ilicit și autoadministrat) pentru a ajunge la o estimare a aportului și a expunerii la droguri dependente. Metoda este analogă cu utilizarea unui standard intern în chimia analitică.
În acest articol prezentăm validarea de laborator a unei metode de estimare cantitativă a expunerii la MA. Atunci când este utilizată într-un studiu clinic, această metodă schimbă o măsură binară într-o măsură continuă și va permite evaluarea eficacității parțiale a unui tratament supus. Pentru a evalua aportul de MA am utilizat l-MA trideuterat cu etichetare deuteriu pe grupul metil. În lucrările anterioare am arătat că acest nivel de deuterare nu modifică farmacologia MA la om (Harris și colab., 2003). l-MA [de asemenea notat R - (-) - MA] este izomerul mai puțin activ farmacologic comparativ cu d-MA [notat și S - (+) - MA]. În lucrările care au condus la acest studiu, am stabilit că dozele orale de 5 mg de l-MA sunt complet absorbite, nu au efecte subiective sau cardiovasculare măsurabile și sunt ușor de detectat în urină (Li și colab., 2010).
Materiale și metode
Subiecte.
Doisprezece subiecți sănătoși, nedependenți, care utilizează MA (opt bărbați, patru femei; vârsta medie 31 ± 10 ani; greutate medie 72 ± 13 kg; 83% alb) au participat la acest studiu. Pentru a fi incluși subiecții trebuie să fi folosit MA timp de cel puțin 1 an cu mai mult de 20 de expuneri pe viață, dar să nu fie dependenți de MA după criteriile din Manualul de diagnosticare și statistic al tulburărilor mintale, ediția a patra. Participanții au avut o stare de sănătate bună, după cum s-a judecat prin examinarea medicală, testele de laborator (inclusiv chimia serică hematologică, hepatică și renală), analiza urinei și ECG. Studiul a fost aprobat de California Pacific Medical Center și de Universitatea din California, comitetele de revizuire instituționale din San Francisco. Studiul a fost realizat în conformitate cu Declarația de la Helsinki.
Design de studiu.
A fost folosit un design cu etichetă deschisă, cu secvență fixă, cu faze secvențiale ambulator-intern. Au fost administrate doze orale de 5 mg de l-MA-d3 timp de 14 zile. În zilele 1 până la 7 subiecți erau ambulatori. În această perioadă, o doză orală unică de 5 mg l-MA-d3 a fost administrată în fiecare dimineață sub supraveghere directă. Subiecții au fost admiși în secția de cercetare în ziua 7. În zilele de studiu 8, 10 și 12, s-au dat o serie de doze ascendente de d-MA-d0 intravenos de 15, 30 și 45 mg. Fiecare doză de d-MA-d0 a fost administrată timp de 1 min sub controlul pompei de perfuzie (Harvard Apparatus Inc., Holliston, MA). Doza de 15 mg a fost administrată sub formă de perfuzie unică. Doza de 30 mg a fost administrată ca două perfuzii de 15 mg cu doze separate de 1 oră. Doza de 45 mg a fost administrată sub forma a cinci perfuzii de 9 mg separate fiecare câte 1 oră. Acest model a fost conceput pentru a simula o binge d-MA.