Nivelurile crescute ale interleukinei 6 sunt reduse în ser și în țesutul adipos subcutanat al obezilor
Jean-Philippe Bastard, Claude Jardel, Eric Bruckert, Patricia Blondy, Jacqueline Capeau, Martine Laville, Hubert Vidal, Bernard Hainque, Niveluri ridicate de interleukină 6 sunt reduse în ser și în țesutul adipos subcutanat al femeilor obeze după pierderea în greutate, Journal of Clinical Endocrinologie și metabolism, volumul 85, numărul 9, 1 septembrie 2000, paginile 3338–3342, https://doi.org/10.1210/jcem.85.9.6839
Abstract
În studiul de față, am urmărit: 1) compararea concentrațiilor serice de IL-6, TNFα și leptină la subiecții sănătoși de control slab și la pacienții obezi cu și fără diabet zaharat de tip 2 (noninsulinodependent); și 2) pentru a măsura nivelurile acestor citokine atât în ser, cât și în țesutul adipos sc la 14 femei obeze înainte și după 3 săptămâni de dietă cu conținut scăzut de calorii (VLCD).
Subiecte și metode
Subiecte
Studii 1. Douăzeci și nouă de femei caucaziene voluntare [8 slabe nediabetice (vârstă, 24-69 ani; IMC, 18,4-23,2 kg/m 2), 14 nondiabetice obeze (vârstă, 28-64 ani; IMC, 32,9-48,7 kg/m 2), și 7 femei obeze diabetice de tip 2 (vârsta, 51-66 ani; IMC, 29,0-39,6 kg/m 2)] au fost incluse în acest studiu. Diabetul de tip 2 a fost evaluat utilizând noile criterii ale Asociației Americane de Diabet (17). În afară de obezitate, toți subiecții obezi nondiabetici au avut o stare bună de sănătate și au avut greutate corporală stabilă timp de cel puțin 12 luni. Niciunul nu a fost implicat în niciun tip de program de exerciții fizice sau a fost excesiv de sedentar. Toți acești subiecți au fost implicați în investigații clinice (18, 19) care au fost aprobate de comitetul etic al Hospice Civils de Lyon sau de la Assistance Publique-Hôpitaux de Paris și care au fost efectuate în conformitate cu legislația franceză. Probele de sânge au fost extrase dimineața (între orele 0800 și 0900) după un post peste noapte.
Studiul 2. Cele 14 femei obeze nondiabetice au participat la un program VLCD timp de 21 de zile. Aportul de energie a fost limitat la 3,9 ± 0,1 MJ (941 ± 27 kcal)/zi, cu 45% carbohidrați, 20% grăsimi și 35% proteine. Biopsiile de țesut adipos abdominal subcutanat au fost luate înainte și după 21 de zile de VLCD, după un post peste noapte, folosind metoda percutanată de mini-liposucție descrisă anterior (20). Cele două biopsii au fost luate din locuri distincte, la nivelul ombilicului. Subiecții consumau în continuare dieta hipocalorică în momentul celei de-a doua biopsii. Probele de țesut adipos au fost imediat congelate în azot lichid și depozitate la -80 C până la analiza proteinelor. Toți subiecții și-au dat acordul scris după ce au fost informați despre natura, scopul și posibilele riscuri ale studiului. Protocolul experimental a fost aprobat de comitetul etic al Asistenței Publice-Hôpitaux de Paris și realizat conform legislației franceze (legea Huriet).
metode de analiză
Probele de sânge venos au fost prelevate între 0800 și 0900 h, după un post peste noapte, înainte și la sfârșitul perioadei de dietă și depozitate la -80 C înainte de analiza imuno-testelor. Glicemia a fost testată enzimatic (hexokinază) utilizând un analizor multiparametric (Hitachi 911; Roche Molecular Biochemicals, Meylan, Franța). Concentrațiile serice de insulină au fost măsurate folosind truse RIA comerciale (Bi-Insulin IRMA; ERIA-Pasteur, Paris, Franța). Nivelurile serice de leptină, TNFα și IL-6 au fost determinate prin testul imunosorbent legat de enzime (Quantikine leptin; Quantikine High Sensitivity TNFα și Quantikine IL-6; R&D Systems, Oxford, Marea Britanie). Sensibilitatea acestor teste a fost de 7,8 pg/ml, 0,18 pg/ml și 0,70 pg/ml pentru leptină, TNFa și, respectiv, IL-6. Aceleași kituri de testare imunosorbente legate de enzime au fost utilizate pentru a determina conținutul de leptină imunoreactivă, TNFα și IL-6 în probele de țesut adipos după omogenizarea a 200 mg de țesut înghețat în 400 μL dintr-un tampon (pH 7,4) conținând 10 mmol/Tris-HCI, 250 mmol/l zaharoză și un amestec de inhibitori de protează (complet; Roche Molecular Biochemicals). Proteina C reactivă (CRP) a fost evaluată prin imuno-nefelometrie pe Nefelometrul 2 Behring (Dade-Behring, La Défense, Franța). Sensibilitatea testului a fost de 0,18 mg/L. Estimarea rezistenței la insulină în starea de post [indicele de rezistență la insulină la post (FIRI)] a fost calculată din glicemia plasmatică și nivelurile de insulină la post (FIRI = glucoză la post × insulină la post/25) (21). O analiză a compoziției corpului prin absorptiometrie cu raze X a fost efectuată numai la femeile obeze nondiabetice, utilizând QDR 1000 de la Hologic, Inc. (Waltham, MA).
Prezentarea rezultatelor
Toate rezultatele sunt prezentate ca medie ± se. Testul de sumă de rang nonparametric Wilcoxon pentru date asociate a fost utilizat pentru a compara valorile înainte și după dietă. Diferențele dintre grupuri au fost determinate folosind ANOVA unidirecțional și testul Kruskal-Wallis, urmat de un test protejat de Fisher, cel mai puțin semnificativ, pentru diferențele dintre perechi. Semnificația corelațiilor a fost examinată folosind testul de corelație de rang nonparametric al lui Spearman. Analiza de regresie multiplă a fost efectuată pentru variabila continuă, IL-6. Pragul de semnificație a fost stabilit la P = 0,05.
Rezultate
Toate femeile obeze nondiabetice și diabetice au fost caracterizate de obezitate android (raportul talie la șold> 0,90 și IMC> 30 kg/m 2). Așa cum era de așteptat, femeile diabetice de tip 2 au avut glicemie la post mai mare. După cum se indică prin valorile FIRI, femeile obeze nondiabetice și diabetice au fost rezistente la insulină, în timp ce controalele slabe nu au fost, subiecții diabetici fiind cei mai rezistenți la insulină. Nivelurile serice de citokine IL-6, TNFα și leptină și de CRP au fost semnificativ mai mari la femeile obeze diabetice și nondiabetice decât la subiecții slabi sănătoși (Tabelul 1).
Caracteristicile clinice și metabolice ale subiecților (n = 29)
| Vârstă (an) | 42 ± 5 a | 45 ± 4 a | 58 ± 2 |
| IMC (kg/m 2) | 20,6 ± 0,6 | 39,5 ± 1,1 b | 36,6 ± 1,0 b |
| Raportul talie/șold | 0,77 ± 0,01 | 0,96 ± 0,02 b | 0,98 ± 0,03 b |
| Glucoza (mmol/L) | 5,3 ± 0,2 c | 5,3 ± 0,2 c | 11,1 ± 1,5 |
| Insulină (pmol/L) | 42 ± 6 | 84 ± 12 zile | 90 ± 18 zile |
| FIRI (mmol × mU × L −2) | 1,39 ± 0,18 | 3,04 ± 0,37 e f | 6,14 ± 1,16 b |
| Leptină (ng/ml) | 9,5 ± 1,7 | 54,9 ± 4,5 b f | 33,0 ± 5,6 d |
| IL-6 (pg/ml) | 0,39 ± 0,06 | 2,78 ± 0,30 b | 3,58 ± 0,51 b |
| TNFα (pg/mL) | 0,74 ± 0,09 | 1,48 ± 0,15 b | 1,08 ± 0,12 |
| CRP (mg/L) | 1,2 ± 0,3 | 6,3 ± 1,1 d | 5,8 ± 1,1 d |