Helicobacter pylori este ucis de nitrit în condiții acide Gut

Conectați-vă folosind numele de utilizator și parola

Meniu principal

Conectați-vă folosind numele de utilizator și parola

Esti aici

  • Acasă
  • Arhiva
  • Volumul 42, numărul 3
  • Helicobacter pylori este ucis de nitrit în condiții acide
  • Articol
    Text
  • Articol
    info
  • Citare
    Instrumente
  • Acțiune
  • Răspunsuri
  • Articol
    valori
  • Alerte
  1. R S Dykhuizen a,
  2. A Fraser b,
  3. H McKenzie c,
  4. M Golden a,
  5. C Leifert d,
  6. N Benjamin e
  1. a Departamentul de Medicină și Terapeutică, Școala Medicală, Forresterhill, Aberdeen AB9 2ZB, Marea Britanie, b Departamentul de Gastroenterologie, Aberdeen Royal Infirmary NHS Trust, c Departamentul de Microbiologie Medicală, Universitatea din Aberdeen, d Soil Science Institute, Universitatea din Aberdeen, e Departamentul de farmacologie clinică, St Bartholomew și Royal London Hospital School of Medicine and Dentistry
  1. Dr. Dykhuizen.

Abstract

Context - Datorită expresiei ureazei, Helicobacter pylori este capabil să se stabilească în stomacul uman în condiții acide. Un nou mecanism de apărare a gazdei a fost propus recent, sugerând că formarea nitriților salivari în simbioză cu bacteriile anaerobe facultative din orofaringe, vizează îmbunătățirea activității antimicrobiene a sucului gastric.

este

Obiective - Să investigheze dacă adăugarea de nitriți în concentrații fiziologice influențează rezistența H pylori la acid.

Metode - H pylori cultivat din probe de biopsie gastrică proaspătă a fost expus timp de 30 de minute la soluție salină normală și la tampon HCI/KCl (0,2 M) la pH 2 cu uree (5 mM) adăugată. S-a determinat influența azotitului de potasiu (50-1000 μmol/l) asupra supraviețuirii bacteriene.

Rezultate - Adăugarea de nitriți (1 mM) la soluțiile acide (pH 2) a dus la distrugerea completă a H pyloriwithin timp de expunere de 30 de minute, în timp ce acidul singur a permis organismului să supraviețuiască (p

Statistici de pe Altmetric.com

Helicobacter pylori este cel mai comun agent patogen la nivel mondial și peste jumătate din populația lumii de peste 40 de ani este colonizată.1 Provoacă gastrită cronică activă și este asociată cu ulcer duodenal și gastric și malignitate gastrică.2, 3

Majoritatea agenților patogeni bacterieni ingerați nu dau naștere niciodată colonizării tractului gastro-intestinal din cauza barierei acidului gastric.4 H pylori sintetizează însă o enzimă urează care creează un mediu alcalin pentru a proteja organismul de efectul bactericid al acidului.5, 6

Lucrările recente din laboratoarele noastre au sugerat un nou mecanism de apărare a gazdei în tractul gastro-intestinal superior al mamiferelor. Am arătat generarea de nitriți salivați în gură printr-o relație simbiotică cu bacteriile anaerobe facultative de pe suprafața limbii după ingestia nitratului alimentar.7-10 Adăugarea de nitriți la soluțiile acide in vitro realizează distrugerea agenților patogeni intestinali umani, în timp ce acidul singur permite creșterea continuă.11, 12 Am sugerat că înghițirea salivei bogate în nitriți după o masă bogată în nitrați poate spori apărarea gazdei împotriva agenților patogeni ingerați.

În lucrarea de față raportăm efectul antimicrobian al nitritului acidificat asupra H pylori in vitro. Supraviețuirea organismelor a fost studiată după expunerea la soluții testate cu acid singur, acid plus uree și acid plus uree și nitriți. A fost determinată dependența de doză a acțiunii antibacteriene a nitriților la pH 2.

Metode

PREGĂTIREA INOCULATULUI

H pylori, izolat din specimene de biopsie gastrică umană, a fost cultivat pe plăci de agar din sânge de cal incubate la 37 ° C într-o atmosferă de 10% CO2, 5% oxigen și 85% azot („campygas”). După trei zile de incubație, bacteriile au fost recoltate și suspendate în soluție salină normală la pH 7 pentru a da o concentrație finală de aproximativ 109 celule/ml (turbiditate = McFarland’s no 6).

EFECTUL EXPUNERII H PILORULUI LA ACID, UREA ȘI NITRIT

S-a adăugat inoculat (1 ml) la 4,5 ml tampon HCI/KCI 0,2 M la pH 2 cu sau fără uree (5 mM) în soluție. Imediat după aceea, s-au adăugat soluții saline normale (1 ml) sau nitrit de potasiu (1 ml) pentru a atinge o concentrație finală de 1 mmol/l în recipiente universale. Ca martor, experimentul a fost repetat cu 4,5 ml soluție salină normală la pH 7 în loc de 0,2 M tampon HCI/KCl.

Probele au fost incubate la 37 ° C. După 30 de minute, alicote din fiecare probă au fost diluate cu ser fiziologic normal în diluții seriale de 10 ori pentru a determina numărul de unități care formează colonii (ufc). Suspensiile diluate (10 μl) au fost inoculate pe plăci de agar din sânge de cal și incubate într-un incubator anaerob cu 5% CO2 timp de până la cinci zile. Numărul de colonii pe placă a fost calculat astfel: numărul de colonii × [1/diluție] × [1/0,01] pe ml. Limita inferioară de detectare a fost de 10 2 organisme/ml.

RELAȚIA DOZEI EFECTULUI ANTIMICROBIAN AL NITRITEI PE PILORI LA pH 2

S-a adăugat inoculat (1 ml) la 4,5 ml tampon HCI/KCI 0,2 M la pH 2 cu 5 mM uree în soluție. Imediat după aceea, s-a adăugat o soluție de nitrit de potasiu (1 ml) pentru a atinge concentrațiile finale de 0, 50, 100, 200, 500 și 1000 μmol/l. Ca martor, experimentul a fost repetat cu 4,5 ml soluție salină normală la pH 7 în loc de 0,2 M tampon HCI/KCl la pH 2.