Fosfolipidele din lipoproteine diferențe compoziționale între VLDL, LDL și HDL la femeile gravide
Abstract
Obiectiv
Scopul acestui studiu a fost de a analiza diferențele în compoziția fosfolipidică a monostratelor cu densitate foarte mică (VLDL), densitate scăzută (LDL) și lipoproteine cu densitate înaltă (HDL) la femeile gravide slabe și obeze.
Metode
LDL, HDL și VLDL au fost izolate din probe de plasmă de 10 femei gravide slabe și 10 obeze, iar compoziția lor de specii de fosfatidilcoline (PC) și sfingomieline (SM) a fost analizată prin spectrometrie de masă tandem-cromatografie lichidă. Testul U Wilcoxon-Mann-Whitney și analiza componentelor principale (PCA) au fost utilizate pentru a investiga dacă profilurile de metaboliți diferă între grupul slab/obez și între speciile de lipoproteine.
Rezultate
Nu s-au găsit diferențe semnificative la nivelurile de metabolit între femeile însărcinate obeze și cele neobeze. Componentele PCA 1 și 2 s-au separat între LDL, HDL și VLDL, dar nu între greutatea normală și femeile obeze. Doisprezece SM și un PCae au fost mai abundente în LDL decât în VLDL. În schimb, patru acil-alchil-PC și două diacil-PC au fost semnificativ mai mari în HDL comparativ cu LDL. VLDL și HDL au diferit în trei SM, șapte acil-alchil-PC și unul diacil-PC (valori mai mari în HDL) și 13 SM (mai mari în VLDL). De asemenea, am găsit asociații ale unor specii de fosfolipide cu colesterolul HDL și LDL.
Concluzie
La femeile gravide, compoziția fosfolipidelor diferă semnificativ în HDL, LDL și VLDL, similar cu constatările anterioare la bărbați și femei care nu sunt însărcinate. Femeile însărcinate obeze și slabe nu au prezentat diferențe semnificative în profilul lor de metabolit asociat lipoproteinelor.
Introducere
Obezitatea și comorbiditățile acesteia reprezintă o preocupare majoră pentru sănătatea publică [1]. S-a demonstrat că sarcina și viața timpurie pot stabili deja calea către o stare metabolică adversă ca și în cazul obezității. În acest sens, obezitatea maternă în timpul gestației este un factor de risc pentru obezitatea descendenților mai târziu în viață [2]. Din punct de vedere mecanic, lipoproteinele sunt una dintre principalele surse de aprovizionare cu nutrienți fetali, deoarece conțin triacilgliceroli (TG). Obezitatea este asociată cu un profil lipoproteic tulburat [3]. Prin urmare, nivelurile mai ridicate de lipoproteine și o structură modificată a monostratului fosfolipidic sunt un obiect important de cercetare, deoarece modificările ar putea avea consecințe asupra aprovizionării cu energie a fătului și programarea timpurie a rezultatelor adverse negative asupra sănătății din cauza supra-aprovizionării sau a insuficienței de energie.
În starea de post, funcția lipoproteinelor cu densitate foarte mică (VLDL) este de a transporta acizii grași sub formă de TG de la ficat la țesuturile extrahepatice și, în timpul sarcinii, la făt pentru metabolismul energetic și întreținerea structurală [4]. Particulele VLDL sunt transformate în lipoproteine cu densitate mică (LDL) care conțin mai puțin TG și mai mult colesterol decât VLDL. Colesterolul LDL poate fi preluat de țesutul mediat de receptorul LDL sau, la niveluri ridicate, poate fi depus în celulele scavenger în mediile intime ale vaselor de sânge, ceea ce contribuie la riscul bolilor cardiovasculare [5]. În schimb, HDL colectează colesterolul din țesuturile extrahepatice și îl transportă înapoi în ficat pentru excreția cu bilă, contribuind la reducerea riscului cardiovascular [6].
Acizii grași totali din plasmă sunt puternic asociați cu metabolismul lipoproteinelor și diverse caracteristici lipoproteice, precum colesterolul și conținutul speciilor saturate sunt legate de sănătatea cardiovasculară [7,8,9]. În ciuda dovezilor existente ale importanței compoziției acizilor grași lipoproteici pentru metabolismul și funcționalitatea unora dintre aceste particule [10], diferențele în speciile moleculare găsite în diferite lipoproteine au fost greu studiate.
Suprafața tuturor lipoproteinelor este formată din fosfolipide, în principal fosfatidilcolină (PC) și sfingomielină (SM) [11]. Aceste două grupuri de fosfolipide au fost asociate pozitiv cu IMC mai mare în studiile clinice metabolomice direcționate [12,13,14,15]. Majoritatea studiilor metabolomice actuale utilizează plasma întreagă pentru analizele cu acizi grași din sânge și fosfolipide [16] și, de obicei, lipoproteinele diferite nu sunt separate înaintea analizei. Astfel, diferențele în compoziția lipoproteinelor nu sunt luate în considerare.
Diferențele în compoziția fosfolipidică a lipoproteinelor s-au arătat anterior la bărbați și femele care nu sunt însărcinate [17].
Am urmărit să caracterizăm compoziția fosfolipidică a LDL, HDL și VLDL la femeile însărcinate obeze și slabe, care, în afară de speciile de lipoproteine din sarcină în general [18], nu a fost descrisă până acum în detaliu. Lipidele circulante se modifică considerabil în timpul sarcinii, iar nivelurile lipidelor au fost asociate cu antropometria descendenților [19]. Expresia placentară ridicată a lipazei endoteliale (EL), care scindează preferențial fosfolipidele, indică implicarea fosfolipidelor în transferul placentar al acizilor grași [20]. Astfel, o comparație a fosfolipidelor între lipoproteine la femeile gravide poate îmbunătăți înțelegerea metabolismului lipidic în timpul sarcinii și susține planificarea unor studii metabolomice ulterioare cu privire la includerea analizelor specifice lipoproteinelor.
Materiale și metode
Subiecte
Douăzeci de femei însărcinate au fost studiate în momentul nașterii (între 37 și 41 de săptămâni de gestație) în Serviciul de obstetrică și ginecologie al Spitalului Clinic Virgen de la Arrixaca, Murcia (Spania), inclusiv 10 femei obeze (IMC înainte de sarcină> 30 kg/m 2) și 10 femei cu greutate normală (IMC înainte de sarcină 20-25 kg/m 2). Toate femeile au îndeplinit următoarele criterii de incluziune: sarcină unică, naștere la termen, vârstă 18-40 de ani, dietă omnivoră, nu au consumat suplimente DHA în ultimul trimestru, nefumători, scanare Doppler fetală normală și supusă unei cezariene elective. Subiecții care raportează probleme de sănătate sau complicații ale sarcinii au fost excluși. Consimțământul informat scris a fost obținut de la toți subiecții. Acest studiu a fost aprobat de Comitetul de etică al spitalului.
Prelevarea de probe
Probele de sânge ale mamelor postite au fost colectate cu tuburi care conțin EDTA în momentul nașterii. Probele au fost centrifugate timp de 3 minute la 1200 g pentru a obține plasmă.
Analize biochimice
Insulina a fost analizată prin chemiluminiscență (DIAsource INSIRMA, Nivelles, Belgia) și glucoza, colesterolul total, TG, colesterolul LDL și colesterolul HDL au fost cuantificate printr-un analizator automat (Roche-Hitachi Modular PyD Autoanalyzer, Mannheim, Germania).
Izolarea lipoproteinelor
Lipoproteinele plasmatice materne au fost izolate din 1,5 ml de plasmă proaspătă prin ultracentrifugare folosind un gradient de densitate discontinuu NaCl/KBr [21] într-o ultracentifugă Optima L-100 XP echipată cu un rotor 100Ti (Beckman Coulter, CA, SUA). Restul plasmei a fost înghețat în azot lichid și depozitat la - 80 ° C până la analiză.