Făina de semințe de struguri Chardonnay ameliorează steatoza hepatică și rezistența la insulină prin alterare

Colegiul de medicină veterinară de afiliere, Universitatea Konkuk, Hwayang-dong, Gwangjin-gu, Seul, Coreea de Sud

Afiliere USDA, ARS, Albany, California, Statele Unite ale Americii

Colegiul de Medicină Veterinară de Afiliere, Universitatea Konkuk, Hwayang-dong, Gwangjin-gu, Seul, Coreea de Sud

Colegiul de medicină veterinară de afiliere, Universitatea Konkuk, Hwayang-dong, Gwangjin-gu, Seul, Coreea de Sud

Departamentul de Afiliere pentru Alimentație și Nutriție, Universitatea Hanyang, Wangsimni-ro, Seongdong-gu, Seul, Coreea de Sud

Afiliere USDA, ARS, Albany, California, Statele Unite ale Americii

Kun-Ho Seo,
Glenn E. Bartley,
Christina Tam,
Hong-Seok Kim,
Dong-Hyeon Kim,
Jung-Whan Chon,
Hyunsook Kim,
Wallace Yokoyama

Cifre

Abstract

Citare: Seo K-H, Bartley GE, Tam C, Kim H-S, Kim D-H, Chon J-W și colab. (2016) Făina de semințe de struguri Chardonnay ameliorează steatoza hepatică și rezistența la insulină prin expresia modificată a genei hepatice pentru stresul oxidativ, inflamația și sinteza lipidelor și ceramidelor la șoarecii obezi induși în dietă. PLoS ONE 11 (12): e0167680. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0167680

Editor: Carlos M. Rodriguez-Ortigosa, Universitatea din Navarra, SPANIA

Primit: 8 aprilie 2015; Admis: 18 noiembrie 2016; Publicat: 15 decembrie 2016

Acesta este un articol cu acces liber, fără drepturi de autor și poate fi reprodus, distribuit, transmis, modificat, construit sau utilizat în orice mod de către oricine în orice scop legal. Lucrarea este pusă la dispoziție sub dedicarea domeniului public Creative Commons CC0.

Disponibilitatea datelor: Toate datele relevante se află în hârtie și în fișierul său de informații justificative.

Finanțarea: Această lucrare a fost susținută de subvenția Fundației Naționale de Cercetare din Coreea (NRF) finanțată de guvernul Coreei (MSIP) (Nr. 2015R1A2A2A01005017) și parțial de un grant al Institutului Național de Alimentație și Agricultură (NIFA) pentru faza I a Programului de cercetare pentru inovare în întreprinderi mici ( NIFA/SBIR 2013-00549).

Interese concurente: Autorii au declarat că nu există interese concurente.

Introducere

Boala ficatului gras nealcoolic (NAFLD) este recunoscută ca o problemă semnificativă de sănătate publică. Prevalența NAFLD este de 20-30% din populația generală a țărilor occidentale [1]. NAFLD variază de la steatoză (ficat gras simplu) la steatohepatită nealcoolică (NASH), o afecțiune care crește morbiditatea și mortalitatea legată de ficat. Acumularea excesivă de lipide hepatice, stresul oxidativ și al reticulului endoplasmatic (ER), inflamația și rezistența la insulină sunt manifestările majore ale progresiei acestei boli. Deși etiologia NAFLD nu este pe deplin înțeleasă, „ipoteza cu două lovituri” este larg acceptată [2]. În această ipoteză, acumularea excesivă de lipide hepatice este urmată de stres oxidativ crescut și inflamație, rezultând leziuni hepatice.

Majoritatea studiilor privind efectele benefice ale semințelor de struguri asupra NAFLD au fost realizate folosind extracte polifenolice apoase sau alcoolice din semințe de struguri [14-17]. Recent, accentul pus pe beneficiile flavonoide pentru sănătate din produsele din struguri sa extins la semințele de struguri de vin, un produs secundar al procesului de vinificare. Semințele de struguri întregi pot conține cantități semnificative de compuși fenolici inextractabili care contribuie la activitatea lor biologică. Semințele de struguri conțin două treimi din flavonoidele extractibile ale strugurilor și au cele mai mari concentrații din cele mai comune flavonoide, flavan-3-olii (flavanoli). Flavanolii includ catehină, epicatechină, 3-O-galatele lor și dimeri (epi) catehină, oligomeri și polimeri. Catehina monomerică (epi) este ușor absorbită de intestinul subțire. Oligomerii și polimerii nu sunt absorbiți, dar sunt absorbiți metaboliții lor de acid fenolic produși de bacteriile intestinale.

Materiale și metode

Animale și diete

Colectare cu plasmă și ficat

Șoarecii au fost lipsiți de hrană timp de 12 ore și au fost anesteziați cu un vaporizator (VetEquip, Livermore, CA) cu 4% izofluran (Phoenix Pharmaceutical, St. Joseph, MO, SUA) și 1L/min debit de oxigen într-o cameră de inducție. Animalele culcate au fost menținute la 2-4% izofluran prin noseconă, iar sângele a fost colectat prin puncție cardiacă cu seringi clătite anterior cu soluție EDTA de potasiu (15% g/v). Ficatele și țesuturile adipose epididimale au fost ulterior colectate, cântărite și congelate imediat în azot lichid pentru o analiză ulterioară. Plasma a fost separată după centrifugare la 2.000 × g timp de 30 de minute la 4 ° C.

Conținut lipidic total hepatic

După uscare prin congelare, ficatul praf a fost cântărit și amestecat cu 2 ml CHCI3/MeOH (2: 1), sonicat timp de 5 minute și incubat peste noapte. Probele au fost centrifugate timp de 10 minute la 1000 rpm și supernatantele au fost îndepărtate. S-au adăugat încă 2 ml CHCI3/MeOH înainte de sonicare și au stat peste noapte pentru extracție. Solventul a fost îndepărtat din extractele combinate sub azot și conținutul total de lipide hepatice totale a fost determinat gravimetric.

Conținut extras de flavonoizi

O probă de 0,2 g a fost extrasă cu 20 ml de metanol timp de 30 de minute cu agitare, urmată de sonicare și centrifugare. Supernatanții au fost supuși cromatografiei lichide de înaltă performanță (HPLC) și analizei fenolice totale. Fenoli totali și compuși flavonoizi au fost analizați folosind metodele Folin-Ciocalteu și respectiv HPLC standard, așa cum s-a descris anterior [20].

Analiza lipidelor plasmatice

Colesterolul lipoproteic plasmatic a fost determinat prin cromatografie de excludere a dimensiunii, așa cum s-a descris anterior [21]. HPLC a fost efectuată utilizând un cromatograf HPLC Agilent 1100 cu o coloană Superose 6HR HPLC (Pharmacia LKB Biotechnology, Piscataway, NJ, SUA) constând dintr-o bobină de amestecare (1615–50 Bodman, Aston, PA, SUA) într-o apă cu temperatură controlată sacou (Aura Industrials, Staten, NY, SUA). O pompă HPLC Hewlett-Packard (79851-A; Agilent Technologies, Palo Alto, CA, SUA) a fost utilizată pentru a livra reactiv de colesterol (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, SUA) la un debit de 0,2 ml/min. Standardele de lipoproteine ale colesterolului bovin au fost folosite pentru calibrarea semnalelor pe baza zonelor de vârf.