Efectele suplimentării cu vitamina C și E asupra stresului oxidativ și a toxicității hepatice la șobolanii hrăniți a
Soo-Jung Lee
Departamentul de Alimentație și Nutriție, Colegiul de Științe Bio-Nano, Universitatea Hannam, 461-6 Jeonmin-dong, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Coreea.
Seon-Young Kim
Departamentul de Alimentație și Nutriție, Colegiul de Științe Bio-Nano, Universitatea Hannam, 461-6 Jeonmin-dong, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Coreea.
Hyesun Min
Departamentul de Alimentație și Nutriție, Colegiul de Științe Bio-Nano, Universitatea Hannam, 461-6 Jeonmin-dong, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Coreea.
Abstract
Introducere
Ingerarea acută sau cronică de etanol crește speciile reactive de oxigen (ROS) în ficat și plasmă, așa cum s-a demonstrat în studiile la animale și clinice [1-3]. Patogeneza bolii hepatice induse de alcool implică efectele adverse ale metaboliților etanolului și stresului oxidativ [4]. Stresul oxidativ din țesuturi se referă la generarea sporită de ROS și/sau la epuizarea antioxidanților [5]. Prin urmare, strategiile eficiente pentru a spori apărarea antioxidantă intracelulară și extracelulară în țesuturi pot ajuta la protejarea ficatului de leziuni.
Antioxidanții sunt esențiali pentru prevenirea leziunilor celulare cauzate de radicalii liberi. Vitaminele E (VE) și C (VC) sunt antioxidanți naturali care protejează împotriva deteriorării oxidative a radicalilor liberi. VE este principalul antioxidant liposolubil din ser și este transportat ca o componentă a lipoproteinei. VE scade în mod eficient susceptibilitatea in vitro și in vivo la peroxidarea lipidelor [6,7]. VC, un antioxidant solubil în apă, elimină radicalii apoși peroxil înainte de a deteriora lipidele [8].
Studiile anterioare au arătat că leziunea hepatică alcoolică indusă de etanol este asociată cu modificări ale metabolismului metioninei [21-23]. Ingerarea cronică de etanol scade concentrațiile plasmatice de folat și concentrațiile hepatice de S-adenosilmetionină (SAM) [24] și crește Hcy plasmatică și S-adenosilhomocisteina hepatică (SAH) la animale și oameni [18,22,23]. Epuizarea SAM hepatică și scăderea raportului SAM: SAH datorită expunerii cronice la etanol este asociată cu diferite grade de leziuni hepatice la animale, cum ar fi ficatul gras, inflamația și fibroza [18,21,23].
Scopul prezentului studiu a fost de a examina dacă stresul oxidativ indus de etanol și hepatotoxicitatea ar putea fi neutralizate prin suplimentarea dietetică cu VC sau VE la șobolani. Deoarece o dietă bogată în grăsimi joacă, de asemenea, un rol important în stresul oxidativ și în modificările hepatice patologice, șobolanii au fost hrăniți cu o dietă lichidă cu etanol de 36%, care era relativ scăzută în grăsimi (10%) pentru a examina toxicitatea hepatică datorată toxicității etanolului, mai degrabă decât o dietă bogată în grăsimi. Puține studii au examinat efectele suplimentelor VC sau VE asupra aminotiolilor plasmatici la șobolani tratați cronic cu etanol. Astfel, am măsurat activitățile de alanină transaminază plasmatică (ALT) și aspartat transaminază (AST) pentru a evalua hepatotoxicitatea și nivelurile plasmatice ale GSH, potențialul total de captare a radicalilor (TRAP), diene conjugate, aminotioli și SAM hepatic pentru a evalua modificările capacității antioxidante și stresul oxidativ.
Materiale și metode
Materiale
Sare L-homocistină, tri-n-butilfosfină, DL-metionină, metmioglobină, acid 2,2'-azino-bis (acid 3,2-etilbenzotiazolină-6-sulfonic) diamoniu (ABTS), heparină, ciclohexan, SAM și SAH au fost achiziționate de la Sigma (St. Louis, MO, SUA). Lactobacillus rhamnosus (ATCC 7469) a fost obținut din colecția American Type Culture Collection (Manassas, VA, SUA). Mediul de cazeină sărăcit cu acid folic a fost obținut de la Difco Laboratories (Detroit, MI, SUA). 7-Fluoro-benzo-2-oxa-1,3-diazol-4-sulfonat a fost obținut de la Wako Chemicals (Osaka, Japonia). Toate substanțele chimice au fost de cea mai mare puritate disponibile în comerț.
Animale și protocol experimental
Șobolani Wistar masculi de cinci săptămâni, cu o greutate de 170-180 g, au fost obținuți de la Orient Bio (Seongnam, Coreea) și au primit inițial o dietă chow până când au ajuns la greutăți corporale de 200-220 g. După o aclimatizare de 5 zile, animalele au fost repartizate aleatoriu la unul din cele patru grupuri de câte 8 șobolani fiecare: (1) grup de control (fără etanol); șobolanii au fost hrăniți cu o dietă lichidă care a fost în esență aceeași cu dieta descrisă de Lieber și DeCarli [25], cu excepția reducerii conținutului total de lipide de la 39,6 g/L la 10 g/L și adăugarea dextrinei-maltoză pentru a alcătui energia deficit. Proporția de energie din dieta lichidă de control a fost după cum urmează: 76% carbohidrați, 10% grăsimi și 14% proteine. Uleiul de soia a fost folosit ca sursă de grăsime în dieta lichidă. Etanolul a fost introdus în diete treptat timp de 5 zile. (2) grup Alc; proporțiile de energie în regimurile de șobolan hrănite cu etanol au fost după cum urmează: 36% etanol, 40% carbohidrați, 10% grăsimi și 14% proteine. (3) Grup Alc + VC (40 mg VC/100 g greutate corporală [BW]): aceste animale au fost hrănite cu dietă de etanol conținând 2 g VC/L (4) Alc + grup VE (0,8 mg VE/100 g BW): aceste animale au fost hrănite cu dietă cu etanol conținând 40 mg VE/L.