Dovezi pentru tratamentul de încorporare a catgutului acupunct și eliminarea genei TRPV1 crescând controlul greutății

  • Journal Home
  • Problemă actuală
  • Online timpuriu
  • Cele mai citite
  • Cele mai citate (dimensiuni)
    • Ultimii doi ani
    • Total
  • Cele mai citate (CrossRef)
    • Anul trecut 0
    • Total
  • Rețele sociale
    • Luna trecuta
    • Anul trecut
    • Total
  • Arhiva
  • informație
  • Trimiterea online
  • Informații pentru autori
  • Editarea limbii
  • Informații pentru recenzori
  • Politici editoriale
  • Academia editorială
  • Obiective și domeniu de aplicare
  • Abstractizare și indexare
  • Informații bibliografice
  • Informații pentru bibliotecari
  • Informații pentru agenții de publicitate
  • Reimprimări și permisiuni
  • Contactați editorul
  • Informatii generale
  • Despre Spandidos
  • Conferințe
  • Oportunități de muncă
  • a lua legatura
  • Termeni si conditii
  • Autori:
    • Chanya Inprasit
    • Yu - Chuen Huang
    • Yi - Wen Lin

  • Acest articol este menționat în:

    Abstract

    Introducere

    Potențialul receptor tranzitor vaniloid 1 (TRPV1) este unul dintre cei 6 membri ai subfamiliei canalului cationic. TRPV1 este prima unitate din această secvență care trebuie specificată și caracterizată cel mai puternic, datorită capacității sale de a acționa ca un canal cationic homotetrameric, neselectiv, permeabil la calciu (10,11). TRPV1 este bine cunoscut pentru rolul său în nocicepție și inflamație, care poate apărea la niveluri scăzute de pH (pH 6,0) și la temperaturi ridicate (43 ° C) (12). În afară de factorii menționați deja, există și alți factori care sunt asociați cu funcția TRPV1, cum ar fi creșterea patologică în greutate și anumite tulburări psihosomatice (13,14). Acest răspuns provoacă o cascadă de semnalizare în neuroni prin activarea protein kinazelor, incluzând protein kinaza activată cu mitogen (MAPK) și proteina de legare a elementului de răspuns AMP ciclic (CREB) (15). Aceste familii de proteine ​​kinază sunt mesagerii secundari care mediază semnalizarea intracelulară. Aceste kinaze includ protein kinaza A (PKA) și protein kinaza C (PKC). Aceste cascade de semnalizare sunt importante pentru menținerea homeostaziei și pot fi stimulate și/sau inhibate de diverși factori, cum ar fi acupunctura. O serie de mecanisme patologice sunt asociate cu dereglarea unuia, a multor sau a tuturor factorilor asociați cu aceste căi de semnalizare (16,17).

    încorporare

    Materiale și metode

    Animale experimentale
    Tratament de incorporare a catgutului acupunct
    Colectarea probelor

    În procesul de colectare a probelor, după ce subiecții au fost posti timp de 12 ore, 38 de subiecți au fost eutanasiați cu 5% izofluran prin inhalare. Probele de sânge au fost colectate din sinusul orbital în 3 tuburi de sticlă BD Vacutainer cu 5,4 mg K2 EDTA și 2 ml tuburi de sticlă BD Vacutainer cu 3 mg fluorură de sodiu și 6 mg Na 2 EDTA. Probele au fost centrifugate la 1.500 × g timp de 15 minute la 25 ° C, după care plasma separată a fost colectată în tuburi de microcentrifugă de 1,5 ml și depozitată la -80 ° C. După colectarea probelor de sânge, animalele au fost decapitate, iar creierele au fost excizate pentru analiza Western blot. Țesuturile adipoase au fost apoi colectate din diferite regiuni ale corpului; BAT din zona interscapulară, WAT subcutanat (sWAT) de pe ambele părți ale zonei flancului și WAT visceral (vWAT) din zona perigonadal (26). În cele din urmă, ficatul și ambii rinichi au fost imediat disecați și cântăriți.

    Analiza Western blot

    Analiza Western blot este o tehnică analitică care este utilizată pe scară largă pentru studiul proteinelor. Această metodă, descrisă pentru prima dată de Towbin și colab. (27), folosește un anticorp care recunoaște și se leagă de un epitop unic pentru proteina de interes. În prezentul studiu, după sacrificiu, hipotalamusul, cortexul prefrontal (PFC) și NTS au fost imediat disecate și congelate în gheață înainte de depozitare la -80 ° C. Proteinele totale au fost preparate prin abraziune și liză în soluție de 50 mM Tris-HCI pH 7,4, 250 mM NaCI, 1% NP-40, 5 mM EDTA, 50 mM NaF, 1 mM Na 3 VO 4, 0,02% NaN 3 și 1X cocktail inhibitor de protează (Amresco, LLC) înainte de centrifugare la 10.000 × g timp de 10 minute la 4 ° C. Proteinele din fiecare probă au fost încărcate în geluri de electroforeză SDS-Tris cu glicină 8% și transferate pe membrane PVDF, care au fost apoi blocate cu lapte negrăsit 5% în tampon TBS-T (10 mM Tris pH 7,5, 100 mM NaCl, 0,1 % Tween-20) și incubat timp de 1 oră la temperatura camerei cu următorii anticorpi primari: Anti-TRPV1