Un studiu privind mecanismul adipokinei în ficatul gras nealcoolic la șobolani tratați cu patru plante medicinale
Informații despre articol
Wei Wei, Departamentul de Gastroenterologie, Spitalul Wangjing din China Academia de Științe Medicale din China, Nr. 6 din Wangjing Central South Road, districtul Chaoyang, Beijing 100102, China. E-mail: [e-mail protejat]
Abstract
Obiectivul studiului este de a determina mecanismul de eficacitate asociat cu adipokine al decoctului de Si He (SHD) pentru tratarea bolilor hepatice grase nealcoolice (NAFLD). Patruzeci și cinci de șobolani Sprague-Dawley (SD) au fost împărțiți aleatoriu în grupul martor, grupul model, grupul SHD cu doză mică, grupul SHD cu doză medie și grupul SHD cu doză mare. Cu excepția grupului de control, alții au fost hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi timp de 12 săptămâni pentru a stabili un model. Apoi, s-a efectuat colorarea cu H&E și roșu ulei și s-a folosit testul imunosorbent legat de enzimă (ELISA) pentru a detecta nivelul de expresie al moleculelor asociate adipokinei. Rezultatele colorării H&E și roșu uleios au arătat că tratamentul SHD pentru NAFLD ar putea îmbunătăți în mod eficient condițiile patologice ale ficatului comparativ cu cel din grupul model și cea mai bună eficacitate a fost observată în grupul cu doze mari SHD. Comparativ cu grupul model, tratamentul cu SHD ar putea reduce în mod eficient nivelul de expresie al factorului de necroză tumorală-alfa (TNF-α) și interleukina-6 (IL-6) și ar regla nivelul de expresie al visfatinei, adiponectinei (APN), leptinei (LEP), și rezistență la șobolani NAFLD. SHD poate îmbunătăți NAFLD prin mai multe mijloace de direcționare a adipokinelor.
Introducere
Materiale și metode
Animale experimentale
Un total de 45 de șobolani Sprague-Dawley (SD) masculi sănătoși de calitate curată (fără patogeni specifici (SPF), greutate corporală medie = 180 ± 10 g) au fost folosiți în acest studiu. Acești șobolani au fost cumpărați de la Beijing VitalRiver Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Licența nr. SCXK (Beijing) 2012-0001) și au fost crescute la Centrul Experimental pentru Animale, Spitalul Dongzhimen, Universitatea de Medicină Chineză din Beijing. Înainte de aceste experimente, acești șobolani SD au fost hrăniți în centrul experimental timp de 1 săptămână pentru a se adapta la mediu.
Dieta bogată în grăsimi
Dieta bogată în grăsimi din clasa SPF a fost achiziționată de la Beijing Keaoxieli Feed Co., Ltd. (Licența nr. SCXK (Beijing) 2009-0012). Dieta bogată în grăsimi (10 kg per ambalaj) conținea 88% furaje obișnuite, 2% colesterol și 10% untură, care a fost sterilizată cu cobalt 60 și depozitată la temperatura camerei.
Medicină tradițională chinezească
Rețeta TCM, Si He Decoction (SHD), a fost achiziționată de la farmacia spitalului Wangjing din Academia Chineză de Științe Medicină Tradițională Chineză, care a fost preparată în decoctul din camera de decoct de plante și a fost testată pentru volumul, greutatea specifică, și higiologie. Medicamentul lichid de 1 ml a echivalat cu 2 g de medicament brut. Ingredientele SHD au fost după cum urmează: 10 g de Bupleurum, 10 g de Fructus Aurantii, 30 g de pelin oriental, 9 g de gardenie, 6 g de rubarbă preparată, 30 g de rizom de pătlagină de apă orientală, 15 g de prăjit Atractylodes macrocephala, 9 g de Pinellia, 9 g de Magnolia officinalis, 20 g de semințe de coix, 6 g de semințe de cardamom rotunde, 15 g de talc, 12 g de coajă de mandarină, 9 g de rizom chuanxiong, 12 g de rizom galingale de nucă, 20 g de prăjit Radix Paeoniae Alba și 6 g de lemn dulce.
Reactivi principali
Formaldehidă (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.), 10% hidrat de clor, xilen, eozină și hematoxilină (Beijing Chemical Reagent Co., Ltd.), roșu ulei O (Sigma) și soluție salină (Beijing Double-Crane Pharmaceutical Co. ), Ltd.) au fost utilizate. Mai mult, kitul de testare imunosorbentă enzimatică (ELISA) pentru visfatină de șobolan (bază albastră), APN de șobolan și LEP, kit ELISA pentru rezistină de șobolan (Senxiong Technologies) și kituri ELISA pentru factorul de necroză tumorală la șobolan-alfa (TNF-α) și interleukina-6 de șobolan (IL-6) (Beijing Huanya Tektronix Biomedical Technology Co. Ltd.) au fost de asemenea utilizate.
Principalele instrumente
Principalele instrumente utilizate au fost mașina automată de încorporare a parafinei, microtomul semiautomatic ultra-subțire, microtomul de îngheț (Leica), un microscop și sistemul său corespunzător de fotografie (Olympus), un frigider criogenic de –80 ° C (Sanyo), balansul electronic Factory), un cititor de plăci multifuncțional complet automat (ThermoFisher), un incubator cu temperatură constantă (instrumentul Tianjin TAISITE) și o masă de agitare (QILINBEIER).
Metode experimentale
Protocolul experimental a respectat strict principiile experimentale de bază (randomizare, control și repetabilitate) și a fost aprobat de Comitetul de Etică al Spitalului Dongzhimen al Universității de Medicină Chineză din Beijing.