Un izomer de amfetamină a cărui eficacitate și siguranță la om nu a fost niciodată studiată,

Departamentul de Medicină, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115 SUA

Cambridge Health Alliance, Somerville, MA 02143 SUA

Corespondență către: Pieter Cohen, MD, 236 Highland Ave, Somerville, MA 02143, SUA. E-mail: [email protected]

Departamentul de Chimie, Haverford College, Haverford, PA, 19041 SUA

Departamentul de Medicină de Laborator, Universitatea din California, San Francisco, CA, 94143 SUA

Departamentul de Medicină, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115 SUA

Cambridge Health Alliance, Somerville, MA 02143 SUA

Corespondență către: Pieter Cohen, MD, 236 Highland Ave, Somerville, MA 02143, SUA. E-mail: [email protected]

Departamentul de Chimie, Haverford College, Haverford, PA, 19041 SUA

Departamentul de Medicină de Laborator, Universitatea din California, San Francisco, CA, 94143 SUA

Abstract

Introducere

În Statele Unite (SUA), Administrația SUA pentru Alimente și Medicamente (FDA) este însărcinată cu identificarea și eliminarea de pe piață a suplimentelor alimentare etichetate greșit, adulterate și periculoase. 1 Nu se cunoaște măsura în care FDA aplică legea.

Unele dintre cele mai periculoase suplimente vândute în prezent sunt cele care conțin stimulenți sintetici lipsiți de dovezi ale siguranței la om. 2-5 Recent, s-a constatat că suplimentele conțin analogi de amfetamină, metamfetamină și 1,3-dimetilamilamină (DMAA). 6-9 Singura sursă cunoscută a acestor stimulente este sinteza chimică; cu toate acestea, ele sunt adesea vândute ca și cum ar fi extracte botanice. De exemplu, un analog al metamfetaminei, ,α‐Dietilfeniletilamina (DEPEA), a fost etichetată ca și cum ar fi un extract de orhidee dendrobium, iar 1,3 - dimetilbutilamină (DMBA) a fost vândută ca și cum ar fi un extract de ceai Pouchung. 6, 7

Un alt stimulent introdus recent în suplimente și vândut ca și cum ar fi un extract botanic este β-metilfeniletilamina (BMPEA, Figura 1). 8 BMPEA a fost sintetizat în anii 1930 ca un potențial înlocuitor pentru amfetamină. 10, 11 Cu toate acestea, din motive necunoscute, nu au fost niciodată efectuate studii de eficacitate și siguranță la om, iar BMPEA nu a fost niciodată introdus ca medicament farmaceutic. BMPEA a rămas cunoscut doar ca substanță chimică de cercetare până la începutul anului 2013, când FDA a identificat BMPEA în mai multe suplimente etichetate ca conținând „Acacia rigidula”, chiar dacă stimulentul nu a fost niciodată identificat sau extras din Acacia rigidula, un arbust originar din Texas. 8 La mai bine de doi ani după descoperirea FDA, FDA nu a avertizat încă consumatorii despre prezența izomerului amfetaminic în suplimente.

Nu se știe, în urma cercetărilor publicate de FDA cu privire la Acacia rigidula suplimente, dacă producătorii au eliminat BMPEA din Acacia rigidula suplimente. Am cumpărat Acacia rigidula suplimente la vânzare în SUA la mai mult de un an după descoperirea FDA și au analizat suplimentele pentru prezența și cantitatea de BMPEA.

Materiale și metode

Materiale

Standardul de referință pentru BMPEA a fost achiziționat de la Sigma (St Louis, MO, SUA) în timp ce amfetamina - d5, care a fost utilizată ca standard intern, a fost obținută de la Cerilliant (Round Rock, TX, SUA). Toți solvenții, inclusiv metanolul și apa, au fost de cromatografie lichidă - spectrometrie de masă (LC - MS) și au fost obținuți de la Honeywell Burdick și Jackson (Muskegon, MI, SUA). Soluțiile stoc din standardele BMPEA au fost preparate la 1 mg/ml, alicotate la porțiuni de 1 ml în flacoane de chihlimbar și depozitate la -80 o C. Toate standardele de calibrare variind în concentrație de la 50 la 5000 ng/ml au fost preparate din soluția stoc.

Instrumentaţie

Toate analizele au fost făcute utilizând cromatografie lichidă - timp de cvadrupol - spectrometrie de zbor/masă (LC - QTOF/MS). Sistemul Agilent LC 1260 Infinity Binary LC echipat cu o pompă binară care poate livra 600 de bari a fost utilizat pentru a executa cromatografia cu gradient de eluție. Agilent 6550 iFunnel QTOF/MS a fost utilizat pentru a detecta BMPEA folosind o sursă de ionizare electrospray cu un nebulizator dual care permite introducerea constantă a masei de referință în timpul rulărilor.

Achiziționarea și pregătirea probelor

Suplimentele alimentare au îndeplinit criteriile noastre de includere dacă au fost: (1) etichetate ca conținând Acacia rigidula și (2) disponibile pentru vânzare online în SUA între ianuarie și aprilie 2014. Toate suplimentele au fost achiziționate online.

Două capsule, pastile sau lingurițe din fiecare supliment alimentar au fost analizate folosind LC - QTOF/MS (Agilent LC 1260‐ QTOF 6550). Conținutul total al fiecărei probe a fost cântărit folosind o balanță analitică (Sartorius CP124S). Fiecare replică a probei a fost dizolvată în suficient metanol pentru a obține o soluție care reprezintă componente solubile în 50 mg supliment pe ml de solvent de extracție. Din această soluție stoc s-au preparat diluții 1 mg/mL, 100ug/mL, 10ug/mL, 1ug / mL și 100ng/mL în 10% metanol. Ultimele trei diluții au fost utilizate în analiza LC - QTOF/MS.

Analiza chimica

O probă diluată de 2,5 uL a fost injectată într-o coloană Agilent Poroshell 120 C - 18 (2,1X 100 mm, 2,7 um) menținută la 55 ° C în fiecare cursă LC - QTOF/MS. Separarea cromatografică a fost realizată prin eluare în gradient folosind apă clasă LC - MS cu 0,05% acid formic și 5 mM formiat de amoniu ca fază mobilă A și metanol cu 0,05% acid formic ca fază mobilă B. Gradientul de eluție utilizat a fost de 0-0,5 min 5% B; 1,5 min = 30% B; 4,5 min = 70% B; 7,5 min = 100% B; 7,5-10 min = 100% B; și 10,01-12 min = 5% B.

Eluații din coloana cromatografică au fost ionizați în QTOF/MS folosind o sursă de ionizare cu electrospray funcționată în următoarele condiții: temperatura gazului la 225 ° C; temperatura gazului înveliș la 350 ° C; debit de gaz de uscare la 14 L/min; debit de gaz înveliș la 11 L/min; presiunea nebulizatorului la 14 psi; capac de tensiune la 3000V; și, tensiunea duzei la 500V. Achiziția de date a fost rulată la 2 GHz în modul cu interval dinamic extins. Spectrele TOF - MS și MS/MS au fost colectate în modul automat MS/MS folosind 500 de unități arbitrare ca prag pentru inducerea colectării datelor MS/MS. Fiecare probă a fost efectuată în polaritate pozitivă și injectată de trei ori separat.