Suplimentarea dietetică cu acid arahidonic mărește conținutul de acid arahidonic la labă, dar da

Abstract

fundal

Acidul arahidonic (ARA) este un acid gras esențial și un constituent major al biomembranelor. Este transformat în diferiți mediatori lipidici, cum ar fi prostaglandina E2 (PGE2), care este implicată în dezvoltarea artritei reumatoide (RA). Cu toate acestea, efectele ARA dietetice asupra RA nu sunt clare. Obiectivul nostru a fost clarificarea efectelor ARA dietetice asupra unui model experimental de artrită de șobolan.

Metode

Șobolanii Lew au fost hrăniți cu trei conținuturi de dietă ARA (0,07%, 0,15% sau 0,32% ARA în dietă (g/g)), o dietă cu acid docosahexaenoic (DHA) (0,32% DHA) sau o dietă de control. După 4 săptămâni, artrita a fost indusă prin injectarea adjuvantului complet al lui Freund în tamponul posterior. Am observat dezvoltarea artritei timp de încă 4 săptămâni și am evaluat severitatea artritei, conținutul de mediatori de acizi grași și lipide din labă și expresia genelor legate de formarea mediatorului de lipide și citokinele inflamatorii. De asemenea, a fost evaluat tratamentul cu indometacin.

Rezultate

Conținutul de ARA al fosfolipidelor din labă a fost semnificativ crescut cu ARA dietetică într-o manieră dependentă de doză. ARA dietetică, precum și DHA nu au afectat severitatea artritei (edem labe, scor artrită și eroziune osoasă). Conținutul de PGE2 din labă a fost crescut prin inducerea artritei, dar nu a fost modificat de ARA dietetică. ARA dietetică nu a afectat conținutul altor mediatori lipidici și expresia genică a ciclooxigenazei (COX) -1, COX-2, lipoxgenazelor și citokinelor inflamatorii. Indometacinul a suprimat severitatea artritei și conținutul de PGE2 la labă.

Concluzie

Aceste rezultate sugerează că ARA dietetică crește conținutul de ARA la nivelul labei, dar nu are niciun efect asupra severității artritei și asupra conținutului de PGE2 al labei la un model de artrită de șobolan.

Introducere

Acizii grași polinesaturați (PUFA), cum ar fi acidul arahidonic (ARA) și acidul docosahexaenoic (DHA), sunt nutrienți naturali prezenți în produsele alimentare obișnuite (de exemplu, gălbenușul de ou, carnea și uleiul de pește) și sunt constituenți importanți fiziologic ai biomembranelor. ARA este un acid gras n-6 și este convertit din acid linoleic (LA) in vivo. ARA acționează, de asemenea, ca substrat pentru diferiți mediatori lipidici, cum ar fi prostaglandinele (PG), leucotrienele, lipoxinele (LX), endocanabinoizii și epoxieicosatetranoații [1-3]. Studiile recente au demonstrat că capacitatea de conversie de la LA la ARA a scăzut odată cu îmbătrânirea [4] și că suplimentarea dietetică cu ARA a îmbunătățit răspunsul cognitiv [5, 6] și funcția cardiovasculară [7, 8] la șobolanii vârstnici și vârstnici.

S-a clarificat că ARA dietetică afectează conținutul de ARA al fosfolipidelor la oameni și animale [9-14]. Un studiu ex vivo utilizând celule preparate din animale în care a fost manipulat aportul de acizi grași din dietă a arătat că diferite diete au afectat producția de PG și leucotriene [15-18]. Am raportat că suplimentarea ARA la persoanele în vârstă japoneze sănătoase a crescut ARA plasmatică, dar nu a crescut mediatorii lipidici derivați de ARA sau parametrii clinici, inclusiv parametrii inflamatori precum proteina C reactivă, interleukina-6 (IL-6) și factorul de necroză tumorală α (TNF-α) [12]. Recent am studiat efectele ARA dietetice asupra inflamației acute și am raportat că ARA dietetică a crescut conținutul ARA și LXA4 din colon, dar nu a afectat severitatea inflamației sau conținutul de PGE2 într-un model de colită murină [14].

Poliartrita reumatoidă (RA) este una dintre bolile autoimune majore și este asociată cu inflamația cronică a articulațiilor și a oaselor. Medicamentele antireumatice biologice care modifică boala sunt frecvent recomandate pentru terapia RA, indicând faptul că citokinele inflamatorii sunt molecule importante în patologia RA [19-21]. Medicamentele antiinflamatoare nesteroidiene (AINS) și inhibitorii ciclooxigenazei (COX) nu mai sunt medicamente de primă linie pentru RA, dar înainte de apariția terapiei biologice, acești agenți erau folosiți pe scară largă pentru RA, deoarece mediatori lipidici produși din ARA de către COX, precum PGE2, sunt implicate în dezvoltarea RA [22, 23]. Prin urmare, metabolismul ARA este încă important în tratamentul RA, dar efectele ARA dietetice asupra inflamației cronice, cum ar fi RA, nu sunt pe deplin înțelese.

În prezentul studiu, pentru a clarifica efectele ARA dietetice asupra inflamației cronice și a statusului PGE2, am evaluat efectele ARA la diferite doze asupra severității unui model de artrită indusă de adjuvant (AIA) la șobolani și am determinat conținutul ARA și mediatori de lipide derivate din ARA și expresia genelor legate de acești mediatori de lipide și citokine inflamatorii.

Materiale și metode

Animale, diete și design experimental

Experimentele au fost aprobate de Comitetul de îngrijire și utilizare a animalelor din Suntory Holdings Ltd. (Osaka, Japonia) și am urmat liniile directoare pentru îngrijirea și utilizarea animalelor Suntory Holdings Ltd. Șaptezeci de șobolani Lew de sex masculin de 4 săptămâni au fost obținuți de la Charles River Japonia (Yokohama, Japonia). Șobolanii erau găzduiți în condiții standard și aveau acces gratuit la apă și la dietă.

Inducerea și evaluarea AIA

Procedura experimentală pentru modelul de artrită indusă de adjuvantul de șobolan în prezentul studiu.

Analiza acizilor grași

Lipidele din diete, labe și plasmă au fost extrase și purificate prin metoda lui Folch și colab. [26]. Lipidele din labă și plasmă au fost separate în fosfolipide (PL) și alte fracțiuni lipidice prin cromatografie în strat subțire folosind silicagel 60 (Merck, Darmstadt, Germania). Sistemul de solvent consta din hexan/dietil eter (7/3, v/v). Reziduurile de acizi grași din lipidele extrase sau fosfolipidele separate au fost analizate prin metoda Sakuradani și colab. [27]. Pe scurt, fiecare fracțiune lipidică a fost incubată cu un standard intern (acid pentadecanoic) în HCI metanolic la 50 ° C timp de 3 ore pentru a transmetila resturile de acid gras în esteri metilici ai acidului gras, care au fost extrase cu -hexan și analizat prin cromatografie capilară gaz-lichid.