Rolul nutriției minerale în ameliorarea stresului termic la plantele de bumbac cultivate în seră și
Subiecte
Abstract
Introducere
Prin urmare, având în vedere rolul crucial al macro (K) și micro nutrienților (Zn și B) în protejarea culturilor de o gamă largă de stresuri abiotice, aplicarea exogenă în condiții de stres s-ar putea dovedi un instrument puternic pentru a atenua impactul advers al stresului. Prezentul studiu compară rolul potențial al sprayului foliar de macronutrienți (potasiu) în fotosinteză, reglarea relațiilor de apă și a conductanței stomatale și a micronutrienților (zinc și bor) în reproducere și antioxidanți. Aceste reglementări fiziochimice ar putea induce toleranță în atributele morfologice ale culturii de bumbac expuse diferitelor regimuri termice la pătrat, înflorire și formarea bolilor. Prin urmare, s-au efectuat o serie de experimente de seră și de câmp cu obiectivele de a (1) vedea efectul diferitelor regimuri de temperatură asupra fiziologiei frunzelor și a randamentului de scame din bumbac și de a (2) dezvălui rolul macro și micro nutrienților (K, Zn și B) pentru ameliorarea impactului stresului la temperaturi ridicate.
Materiale și metode
Experiment de seră
Experiment pe teren
Observații
Analize biochimice
Probele de frunze cu o greutate de 0,5 g au fost extrase cu 10 ml tampon fosfat (pH 7,8) pentru extragerea enzimelor. Supernatantul a fost utilizat pentru determinarea enzimei după centrifugă și reziduurile au fost aruncate. Materialul extras a fost depozitat la 4 ° C 27. Probele pentru toți antioxidanții enzimatici și non-enzimatici au fost pipetate în plăci cu 96 de godeuri. Plăcile au fost, apoi, citite de cititorul de plăci micro (ELX800, Bio-Tek Instruments, Inc., Winooski, VT, SUA) la diferite lungimi de undă. Conținutul de superoxid dismutază a fost determinat prin metoda 28. Superoxid dismutaza a fost cuantificată ca unități enzimatice care au inhibat foto-reducerea nitrobluetetrazolului (NBT) și au înregistrat absorbanța la 470 nm. În timp ce, CAT a fost măsurat ca unități enzimatice care au convertit H2O2 în H2O și O2 folosind protocolul descris de Liu 29. Amestecul de reacție [50 mM tampon fosfat (pH 7) + 5,9 mM H2O2] a fost amestecat cu 0,1 mL extract de enzimă și s-a citit absorbanța la 240 nm. Conținutul de peroxidază a fost determinat folosind metoda dată de 29. Peroxidaza a fost cuantificată ca unități de enzime care au oxidat guaiacol. Amestecul de reacție a fost format din 50 mM tampon fosfat (pH 5) + 40 mM H2O2 + 20 mM guaiacol și 0,1 mL de extract enzimatic per probă. Absorbanța a fost înregistrată la o lungime de undă de 470 nm.
Pentru estimarea acidului ascorbic, 900 µL dist. H2O + 100 uL extract de probă + 1 ml diclorfenol-indofenol + 100 uL 0,1% Meta H3PO4 au fost amestecate într-o eprubetă și absorbanta a fost înregistrată la 520 nm 30. Pentru determinarea TPC 31 a fost utilizată metoda reactivului Folin-Ciocalteu (FC). Probele de frunze de 0,5 g în greutate au fost extracte cu acetonă 80% (10 ml) și centrifugate. Extractul enzimatic (20 uL) + reactiv FC (100 uL) + 1,5 ml apă au fost amestecate într-o cuvă și plasate timp de 30 de minute. Apoi, s-a adăugat 700 mM Na2CO3 și s-a incubat la temperatura camerei pentru o perioadă de 2 ore. Absorbanța a fost luată la 765 nm având 200 uL probă în fiecare godeu. Conținutul de MDA în frunzele de bumbac a fost determinat în conformitate cu urmarea procedurii adaptate de 32. Proba de frunze (0,5 g) a fost omogenizată în 10 ml soluție de acid tricloracetic 0,1% (TCA) și centrifugată la 12000 × g timp de 15 minute. Pentru fiecare ml de extract s-au utilizat 4,5 ml acid tiobarbituric (0,5%) cu amestecul de reacție și s-a încălzit la 95 ° C timp de 30 min și s-a răcit. Absorbanta a fost luata la 532 si 600 nm si concentratia MDA a fost determinata folosind formula:
A = Coeficient de absorbție cu valoarea de 156 mm −1 cm −1 .
Conținut de clorofilă
Frunzele de bumbac (0,5 g) au fost măcinate în 10 ml de acetonă rece 80% și tuburile au fost depozitate în întuneric la 20 ° C peste noapte, indicând modificări minore ale metodei descrise anterior 33. Amestecul a fost filtrat printr-un Whatman nr. 1. S-a trecut un semifabricat cu 80% acetonă; măsurătorile au fost luate la 645 și 663 nm printr-un spectrofotometru. Conținutul de clorofilă a fost calculat din formula:
unde W este greutatea probei de frunze în timp ce V este volumul probei utilizate în spectrofotometru (U-2001, Hitachi, Japonia).