Remodelarea arterei spirale și invazia trofoblastelor în preeclampsie și restricție de creștere fetală

De la Institute of Medical Genetics, College of Medicine, Veterinary and Life Sciences, University of Glasgow School of Medicine, Glasgow, Marea Britanie (F.L.); și Reproductive and Vascular Biology Group, Institute of Cellular Medicine, The Medical School, Newcastle University, Newcastle upon Tyne, Marea Britanie (J.N.B., S.R.).

Vizualizați cea mai recentă versiune a acestui articol. Versiunile anterioare:

Abstract

Preeclampsia, definită de hipertensiune și proteinurie, afectează 3% până la 7% din sarcini, contribuie major la morbiditatea și mortalitatea maternă și fetală2 și este responsabilă de 50.000 de decese anual la nivel mondial. 3 Deși preeclampsia este adesea asociată cu restricția de creștere a fătului (FGR), FGR poate apărea în absența caracteristicilor materne. Mamele și copiii unei sarcini complicate de preeclampsie prezintă un risc crescut pe termen lung de boli cardiovasculare și deces prematur. 4.5 Originea preeclampsiei nu este înțeleasă, dar este puternic asociată cu eșecul sau eșecul parțial al remodelării arterei spirale. 1 Considerat inițial că este specific pentru vasele miometriale, 6 remodelări suboptimale au fost raportate și în vasele deciduale. 7.8 Vasele nemodificate/parțial modificate pot furniza impulsuri ridicate sau intermitente ale fluxului de presiune și astfel deteriorarea placentei rezultă din stres hidrostatic sau din modificări ale livrării oxigenului. 9.10

A fost propus un model în 3 etape de preeclampsie. 11 Prima etapă implică eșecul parțial al toleranței imune materne la antigeni exprimată prin EVT derivată paternal. Acest lucru duce la reducerea invaziei celulelor EVT fetale și la remodelarea redusă a arterelor uterine spirale (etapa 2) și, în cele din urmă, la o circulație uteroplacentară disfuncțională cu stres oxidativ și generarea de factori eliberați în circulația maternă (etapa 3).

Studiile histologice clasice asupra patului placentar în preeclampsie au fost derivate din observații pe secțiuni de parafină; interpretările au fost limitate din cauza lipsei de anticorpi pentru a identifica tipuri și structuri de celule specifice. Dificultățile în obținerea biopsiilor din patul placentar au împiedicat cercetările ulterioare. În acest studiu, am folosit metode imunohistochimice aplicate secțiunilor înghețate ale patului placentar pentru a dezvălui noi perspective asupra modificărilor fiziologice eșuate în preeclampsie și FGR și, pentru prima dată, am legat aceste modificări de parametrii clinici materni și fetali.

Materiale și metode

Subiecte

Masa. Detalii clinice ale pacienților recrutați pentru prelevarea de probe de pat placentar

Imunohistochimie

Secțiunile seriale ale fiecărei biopsii (care conțin același vas) au fost imunomarcate folosind o tehnică avidină - biotină - peroxidază (kit Vectastain Elite; Vector Laboratories, Marea Britanie) pentru citokeratină pentru identificarea EVT, pentru desmin pentru identificarea mușchiului vascular și miometrial și pentru von Factorul Willebrand sau CD31 (molecula de adeziune a celulelor endoteliale) pentru identificarea endoteliului. Fiecare anticorp monoclonal a fost optimizat înainte de utilizare: citokeratine LP34 5, 6, 18 (Novocastra, Marea Britanie) 1: 200; desmin (NCL-DES-DE-R-11) 1: 100 (Novocastra); și factorul von Willebrand (Dako, Marea Britanie) 1: 800 (pentru detalii, consultați suplimentul de date numai online). Secțiunile citokeratin-imunizate au fost în continuare colorate cu acid periodic - tehnica Schiff pentru a detecta fibrinoidul; după dezvoltarea reacției DAB (3,3-diaminobenzidină), secțiunile au fost incubate timp de 5 minute în acid periodic 1% (Sigma), spălate și acoperite timp de 10 minute cu reactiv Schiff (Sigma). După o spălare suplimentară, secțiunile au fost contracolorate cu hematoxilină Mayer timp de 30 de secunde. Au fost utilizate în total 6 lamele, inclusiv o pată de hematoxilină și eozină.

Analiza modificărilor structurale în patul placentar

Modificările structurale ale biopsiilor din patul placentar au fost clasificate pe baza unui sistem descris anterior. 18.19 Secțiunile au fost punctate de 2 observatori (F.L. și J.N.B.) orbiți de identitatea secțiunilor. Acordul pentru notarea tuturor caracteristicilor histologice între cei 2 observatori a fost foarte mare (98%). Exemple de notare a categoriilor histologice sunt prezentate în secțiunea Rezultate și în publicațiile noastre anterioare. 20.21 Secțiunile care conțin vase deciduale sau miometriale au fost analizate separat.

figura 1. Exemple de diferite metode de colorare utilizate pentru a identifica celulele și structurile celulare în biopsiile din patul placentar. A, Vasul miometrial preeclampsic imunocolorat pentru desmin (scor = complet conservat). Asteriscul denotă miometru. , Preeclampsie vas miometrial complet conservat imunocurat pentru citokeratină (scor trofoblast extravilos interstițial [EVT] scor = 1 [mai mare]; scor EVT endovascular = 2 [absent]). C, Preeclampsie, vas miometrial complet conservat, imunocurat pentru citokeratină (scor EVT interstițial = 2 [normal]; scor EVT perivascular [indicat de săgeată] = 2 [normal]). D, Vas decisiv normal al sarcinii imun colorat pentru desmin (scor media = complet distrus; scor EVT endovascular = 1 [prezentat prin săgeată]). E, Vase deciduale de sarcină imunocolorate pentru factorul VIII și secțiune paralelă imunocolite pentru citokeratină (F). Scorul EVT endovascular = 1. Săgeata indică mufa endovasculară EVT. G, Vas decidual al sarcinii imunotratat pentru desmin (scor media = scor dezorganizat, fibrinoid

Întreruperea mass-media

Figura 2 arată gradul de perturbare a mediului în toate arterele spirale. În grupul normal, 86% din vasele deciduale au avut medii absente/dezorganizate grosolan, iar în 14% din medii au fost dezorganizate. În preeclampsie, 53% din vasele deciduale au prezentat medii absente/dezorganizate, 23% dezorganizare, 12% separare, în timp ce media a fost păstrată în 11%. În FGR, 75% din vasele deciduale au avut medii absente/dezorganizate brut și 25% au fost dezorganizate. În timpul sarcinii normale, 88% din vasele miometriale au avut medii absente/dezorganizate gros și 12% au prezentat o separare medială. În contrast, în preeclampsie, doar 5% din vasele miometriale au prezentat medii absente/gros dezorganizate, 22% au prezentat medii dezorganizate și 32% medii separate, în timp ce în 41%, mediile au fost complet conservate. În FGR, 25% din vasele miometriale aveau medii absente/dezorganizate, 33% dezorganizate, 34% separate și 8% medii conservate. A existat mai puțină întrerupere a mediilor în arterele spirale miometriale atât în preeclampsie (= 0,0001; SAU, 0,14; 95% CI, 0,05-0,33) și FGR= 0,0001; SAU, 0,13; IC 95%, 0,05-0,32) comparativ cu controalele. Nu a existat nicio diferență între preeclampsie și FGR (= 0,93; SAU, 0,9; IC 95%, 0,85-9,6).