Porin fără text integral din molecule izolate de bacterii marine Marinomonas primoryensis KMM 3633T Izolare,

Purificarea și denaturarea temperaturii porinei M. primoryensis KMM 3633 T (MpOmp): (A): Fracțiunea de anvelopă a celulei brute (membrana brută) a M. primoryensis KMM 3633 T (2, 3); proteine marker (1). Proba 3 este încălzită la 99 ° C. (B): MpOmp izolat din fracția de membrană brută a M. primoryensis KMM 3633 T după tratament cu 1% Sarcosyl (1, 2); MpOmp izolat din fracția de proteină OM combinată obținută ca rezultat al extracției de trei ori cu 0,5% POE de M. primoryensis KMM 3633 plic de celule T și cromatografie cu permeație pe gel pe Sephacryl S-300 (3, 4); proteine marker (5). Probele 2 și 3 sunt încălzite la 99 ° C. (C): MpOmp izolat cu extracție sarcosil (1-5); probele 2, 3, 4 și 5 au fost încălzite la 30, 40, 50 și respectiv 99 ° C; MpOmp izolat cu extracție POE (6-10); probele 7, 8, 9 și 10 au fost încălzite la 30, 40, 50 și respectiv 99 ° C; proteine marker (11).

Urme curente înregistrate după adăugarea porinei M. primoryensis KMM 3633 T la membrana lipidică cu două straturi (BLM) în prezența 1,0 M (A) și 0,2 M (B) NaCI; caracteristica curent-tensiune a canalului MpOmp (C); dependența curentului prin canalul MpOmp de concentrația NaCl (D).

Spectre CD în regiunile peptidice (A, C, E) și spectre de fluorescență intrinsecă la λex 280 nm (B, D, F) ale porinei M. primoryensis (MpOmp) în tamponul Tris-HCl (A, B) și în prezența POE (C, D) și SDS (E, F). Probele de proteine de MpOmp (1,0 μM și 6,0 μM pentru regiunile peptidice și, respectiv, aromatice) au fost dizolvate în tampon Tris-HCI 10 mM, pH 7,5, conținând 0,5% POE (1) sau 0,25% SDS (2). Probele 2, 3, 4 și 5 au fost încălzite la 30, 40, 50 și respectiv 80 ° C (C, D, E, F).

Abstract