Noul candidat la medicament oral antigripal oral AV5075S Journal of Antimicrobial Chemotherapy Oxford

Alexandre V. Ivachtchenko, Yan A. Ivanenkov, Oleg D. Mitkin, Pavel M. Yamanushkin, Vadim V. Bichko, Natalia A. Shevkun, Olga V. Mokrushina, Olga O. Nevolina, Ruben N. Karapetian, Irina A. Leneva, Irina T. Fedyakina, Mark S. Veselov, candidat la medicament anti-gripal oral AV5075S, Jurnalul de chimioterapie antimicrobiană, volumul 69, numărul 5, mai 2014, paginile 1311–1324, https://doi.org/10.1093/jac/ dkt507

Abstract

Dezvoltarea unui medicament nou candidat cu activitate îmbunătățită împotriva virusului gripal neuraminidază (NA) în comparație cu terapiile disponibile în prezent.

Compușii sintetizați au fost evaluați in vitro și in vivo. Andocarea moleculară tridimensională a fost aplicată cu succes pentru a clasifica compușii din serie după potența inhibitoare. Stabilitatea a fost investigată pe probe de sânge și pe modele animale. Un studiu farmacocinetic a fost efectuat la câini și șobolani utilizând administrare orală și intravenoasă.

Un nou medicament puternic candidat [[3R, 4R, 5S) -4- (2,2-difluoroacetilamino) -5-amino-3- (1-etil-propoxi) -ciclohex-1-enecarboxilic; AV5027] și esterul său etilic promedical (AV5075S) au fost sintetizate și testate. AV5027 și AV5075S prezintă activitate picomolară împotriva virusului gripal NA. AV5075S a inhibat NA într-un model de pneumonie utilizând virusul A/Aichi/2/68 (H3N2) adaptat la șoarece semnificativ mai puternic decât fosfatul de oseltamivir. O cale metabolică generală a fost construită pentru compusul părinte pe baza rezultatelor experimentale și a analizelor teoretice.

AV5075S poate fi considerat în mod rezonabil ca un candidat nou pentru medicamente orale „următorul din clasă” pentru tratamentul gripei.

Introducere

Structurile oseltamivirului, analogilor săi, zanamivirului, laninamivirului și compușilor descriși în această lucrare (AV5027, AV5075, AV5095, AV5102 și AV5092).

Recent, am anunțat un nou compus [[3R, 4R, 5S) -4- (2,2-difluoroacetilamino) -5-amino-3- (1-etil-propoxi) -ciclohex-1-enecarboxilic; AV5027] cu activitate picomolară împotriva gripei NA. 6 În plus, a fost realizat un studiu detaliat structură cantitativă - relație de activitate (QSAR) utilizând andocare moleculară tridimensională și analiză de regresie clasică. Aici, descriem caracteristicile farmacocinetice cheie și activitățile in vitro și in vivo (modele animale) ale analogilor AV5027 (AV5075, AV5095, AV5102 și AV5092) (Figura 1), mesilați (AV5075S și AV5095S) și metaboliți. Am constatat că AV5095 s-a format într-o soluție neutră în plasma umană, câine și șobolan prin acilarea AV5075.

Materiale și metode

Viruși

A/California/7/2009 (H1N1) a fost obținut de la ATCC (Manassas, VA, SUA). A/Aichi/2/68 (H3N2) adaptat la șoarece a fost obținut de la Institutul de Virologie Ivanovsky (Moscova, Rusia). Cristalele N1 purificate din virusurile A/California/7/2009 (H1N1) au fost obținute de la ATCC.

Animale

Șoareci de sex feminin albi, fără patogeni specifici (12-14 g), au fost obținuți de la creșa „Andreevka” (regiunea Moscovei, Rusia). Șoarecii au fost în carantină timp de 24 de ore înainte de infecție. Șoarecii CD1 fără patogeni specifici (vârsta de 6 săptămâni) și șobolanii Sprague-Dawley (250-350 g) au fost obținuți de la filiala de creștere a animalelor de laborator a Institutului de chimie bioorganică, Academia Rusă de Științe (regiunea Moscovei, Rusia). Câinii beagle pubescenți de ambele sexe (10-12 kg) au fost obținuți de la Centrul de reproducere a animalelor, Centrul rus de cercetare a substanțelor active biologic (regiunea Moscovei, Rusia). Șobolanii Sprague-Dawley au fost în carantină timp de 10 zile înainte de studiul farmacocineticii. Animalele au fost ținute în încăperi separate cu un microclimat controlat (temperatura 18-26 ° C, umiditate relativă 30% ± 70%, 8-10 volume de aer din cameră pe oră și 12 ore ciclu zi/noapte). Întreținerea și îngrijirea au fost în conformitate cu Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator. 7

Analiza NA

Efectul compușilor asupra activității NA a fost măsurat utilizând protocolul OMS. 8 Sarea de sodiu a acidului 2- (4-metilumbeliferil) -α-d-N-acetilneuraminic (MUNANA; Sigma, nr. Cat. M8639), la o concentrație finală de 0,1 mM, a fost utilizată ca substrat fluorescent. Virusul alantoic diluat conținând 800–1200 unități de fluorescență a MUNANA a fost amestecat cu compusul testat (0,01-10 000 nM) în 33 mM acid 2- (N-morfolino) etansulfonic (pH = 6,5) conținând 4 mM CaCl2 și incubat timp de 30 de minute la 37 ° C. După adăugarea substratului și incubarea la 37 ° C timp de 1 oră, reacția a fost oprită prin adăugarea 0,14 M NaOH în 83% etanol. Fluorescența a fost măsurată la o lungime de undă de excitație de 360 nm și o lungime de undă de emisie de 448 nm. Semifabricatele de substrat au fost scăzute din citirile probei. Valorile IC50 au fost apoi calculate prin reprezentarea grafică a procentului de inhibare a activității NA față de concentrația inhibitorului. Rezultatele au fost raportate ca media a trei experimente.