Nervii senzoriali au modificat funcția contralaterală la o monoartrită și pot contribui la
Abstract
Introducere
Simetria inflamației este o caracteristică fundamentală a artritei reumatoide (RA; Arnett și colab., 1988) și duce la malformații articulare severe și imobilitate pe scară largă (Clarke și colab., 1994; Zangger și colab., 2005). În ciuda unei largi bibliografii privind etiologia și patogeneza RA, există o înțelegere redusă a cauzei (cauzelor) simetriei acestei boli.
În timp ce răspunsul imun este de o importanță evidentă în progresia RA, este dificil de înțeles cum acest lucru singur poate sta la baza modelului simetric al implicării articulațiilor. Levine și colegii săi au propus că această simetrie ar putea fi susținută de inervația articulară și au propus o contribuție neurogenă atât la inflamația existentă, cât și la modelul simetric al RA (Levine și colab., 1985a, b; Levine și Basbaum, 1990). Un corp considerabil de dovezi susține acum ipoteza „neurogenă” (Donaldson și colab., 1995; Rees și colab., 1996; Decaris și colab., 1999). Studiile epidemiologice demonstrează că articulațiile afectate tind să prezinte un model de imagine oglindă (Egger și colab., 1995; Zangger și colab., 2005). Pacienții care dezvoltă RA după leziuni nervoase prezintă dispariții ale articulațiilor denervate (Thompson & Bywaters, 1962; Glick, 1967; Glynn & Clayton, 1976; Veale și colab., 1993) și RA se pot rezolva în articulațiile afectate care ulterior își pierd inervația senzorială. (Lapadula și colab., 1997).
Modelele animale de RA susțin ipoteza neurogenă. Modelul bine stabilit al adjuvantului complet Freund (CFA) la șobolani prezintă simetria implicării articulațiilor după 2-4 săptămâni, în funcție de locul și concentrația injecției CFA (Donaldson și colab., 1993; Decaris și colab., 1999). Inflamația indusă de CFA rămâne unilaterală în urma leziunii nervului omolog contralateral cu neurotoxina capsaicină (Donaldson și colab., 1995), implicând subtipul 1 al receptorului vaniloid (TRPV1; cunoscut și sub denumirea de VR-1), care exprimă neuroni în răspândirea inflamației. Mai mult, activitatea neuronală antidromică evocată mecanic (departe de SNC) a fost înregistrată în nervul articular contralateral (Rees și colab., 1996). Substanța neuropeptidelor vasoactive P (SP) și peptida legată de gena calcitoninei (CGRP) sunt eliberate de la terminalele aferente primare după activare (White & Helme, 1985); cresc atât permeabilitatea vasculară, cât și vasodilatația (Brain și colab., 1985; Ferrell & Russell, 1986; Holzer, 1998) și sunt chemotaxice pentru limfocite, declanșând astfel inflamația (Helme și colab., 1987; Mantyh, 1991; Holzer, 1998) . Conținutul SP sinovial și CGRP crește rapid și bilateral după inducerea artritei CFA (Bileviciute și colab., 1993) și contribuie probabil la implicarea articulației contralaterale (Lam și colab., 2004).
Deși acum este larg acceptat faptul că sistemul nervos joacă un rol important în răspândirea contralaterală a inflamației, o mare parte din această înțelegere se bazează pe studii de leziuni nervoase. Foarte puține studii au studiat în mod direct funcția nervilor contralaterali în modele de RA. Scopul nostru a fost să testăm ipoteza că funcția nervului contralateral este modificată în urma dezvoltării artritei. Mai mult, studiul nostru a urmărit să determine dacă și cum ar putea fi modificată această funcție modificată și dacă există modificări sub acoperire care indică inflamația în articulația contralaterală.
Materiale și metode
Animale
Toate procedurile pe animale au fost efectuate în conformitate cu legislația Regatului Unit [Legea privind animalele (procedurile științifice), 1986], au fost licențiate de Home Office din Marea Britanie și urmează instrucțiunile Asociației Internaționale pentru Studiul Durerii (Zimmermann, 1983). Șobolani masculi Wistar (250-300 g) au fost obținuți de la B și K (Bristol, Marea Britanie), au adăpostit patru pe cușcă și au fost menținuți pe hrană și apă ad libitum cu un ciclu de 12 ore lumină - întuneric.
Droguri
Pentobarbitalul de sodiu a fost obținut în forma sa de sodiu de la Sigma (Dorset, Marea Britanie) și a fost alcătuit intern pentru a permite i.p. și i.v. injecție pentru inducție anestezică și, respectiv, întreținere. Capsaicina a fost obținută de la Tocris (Bristol, Marea Britanie) și a fost alcătuită într-un vehicul 10% etanol, 10% Tween 80 și 80% soluție salină. Dipirona (metamizol) a fost obținută de la Sigma (Dorset, Marea Britanie) și a fost dizolvată în soluție salină. Lignocaina, 2%, a fost obținută de la Deproco Ltd (Kent, Marea Britanie).
Inducerea inflamației induse de CFA
O scurtă anestezie a fost indusă cu halotan (3% în O2); odată ce s-a realizat areflexia, 250 µg/100 µL CFA (Mycobacterium tuberculosis în ulei mineral vehicul) a fost injectat prin tendonul rotulian în articulația genunchiului drept pentru a induce artrita (Rees și colab., 1994). Șobolanii au fost returnați în cușca de acasă și au fost lăsați să se recupereze și au fost monitorizați zilnic pentru a deranja mersul. Măsurătorile diametrului articulației genunchiului ipsilaterale și contralaterale au fost luate de la șobolani artritici folosind etriere în ziua experimentelor electrofiziologice.
Proceduri chirurgicale
La trei până la cinci zile după injectarea intraarticulară de CFA, anestezia a fost indusă cu pentobarbital de sodiu (60 mg/kg, ip), iar vena jugulară externă și traheea au fost canulate pentru menținerea anesteziei (10 mg/kg/h, iv) și compensarea căilor respiratorii, respectiv. Temperatura miezului corpului a fost menținută (36,5-37,5 ° C) prin utilizarea unei sonde de temperatură rectală conectată la o lampă de încălzire printr-o unitate de control feedback. Pielea și țesuturile conjunctive care acoperă aspectele anterioare ale genunchiului stâng și aspectul medial al coapsei au fost incizate de la fosa inghinală până la un punct imediat sub condilul medial al tibiei. Partea inferioară a piciorului a fost atașată la o platformă pentru stabilitate. Aspectul medial al piciorului a fost expus și a fost creat un bazin de ulei folosind pielea membrului posterior; acesta a fost umplut cu ulei mineral încălzit (37 ° C) (Sigma, Marea Britanie). Nervul safen stâng (contralateral la inflamație), care inervează membrul posterior, inclusiv articulația genunchiului, a fost disecat fără țesut conjunctiv într-un punct proximal al articulației genunchiului și secționat pentru a preveni înregistrarea activității aferente din părți mai distale ale șobolanului posterior. -limb.
Înregistrare extracelulară
Experimente de extravazare cu plasmă
Șobolanii care au primit o injecție de CFA în articulația genunchiului (cu 4 zile înainte) au fost anesteziați (pentobarbital 60 mg/kg, i.p.), iar vena jugulară externă și traheea au fost canulați. După o perioadă de timp pentru a permite stabilizarea după efectele acute ale intervenției chirurgicale (∼30-40 min), a fost injectat colorant albastru Evans (50 mg/kg, i.v.). La douăzeci de minute după administrarea albastră Evans șobolanii au fost perfuzați transcardic cu soluție salină. Ambele articulații ale genunchiului au fost disecate rapid, curățate de piele și mușchi, cântărite și plasate în formamidă apoi pe o rolă timp de 24 de ore la temperatura camerei. Nivelurile de colorant albastru Evans extras au fost măsurate spectrofotomic (620 nm) și exprimate ca pg/mL/g. Tehnica Evans albastru este o metodă bine stabilită și a fost utilizată în mod obișnuit pentru a evalua efectele stimulării aferente nociceptive asupra funcției vasculare (Janig & Lisney, 1989; Bharali & Lisney, 1992; Kolston & Lisney, 1993).