In Vivo Efectul hipocolesterolemiant al extractului de apă de orez de drojdie roșie fermentată MARDI în cantități mari
1 Institute of Bioscience, Putra University Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia
2 Departamentul de Tehnologie a Bioproceselor, Facultatea de Biotehnologie și Științe Biomoleculare, Universitatea Putra din Malaezia, 43400 Serdang, Selangor, Malaezia
3 Aning Biotech Corporation Sdn Bhd., 13G & 13-1, Jalan LJ3, Lembah Jaya Industrial Park, 68000 Ampang, Selangor, Malaysia
4 Școala de Științe Biomedice, Universitatea din Nottingham, Campusul Malaeziei, Jalan Broga, 43500 Semenyih, Selangor, Malaezia
5 Departamentul de biologie celulară și moleculară, Facultatea de biotehnologie și științe biomoleculare, Universiti Putra Malaysia, 43400 Serdang, Selangor, Malaysia
6 Departamentul de biotehnologie a bioproceselor, Institutul de dezvoltare a cercetării agricole din Malaezia, 43400 Serdang, Selangor, Malaezia
7 Centrul de cercetare a biotehnologiei, Institutul de dezvoltare a cercetării agricole din Malaezia, 43400 Serdang, Selangor, Malaezia
Abstract
Orezul de drojdie roșie fermentată a fost consumat în mod tradițional ca medicament în bucătăria asiatică. Acest studiu a avut ca scop determinarea in vivo Efecte hipocolesterolemiante și antioxidante ale extractului de apă din orez de drojdie roșie fermentată produs folosind Institutul de Cercetare și Dezvoltare Agricolă din Malaezia (MARDI) Monascus purpureus tulpini la șoareci hrăniți cu dietă bogată în colesterol. Absența monacolin-k, nivel inferior de γ-acidul aminobutiric (GABA), conținutul mai mare de aminoacizi totali și activitățile antioxidante au fost detectate în extractul de apă din orez de drojdie roșie fermentată MARDI (MFRYR). In vivo Tratamentul MFRYR pe șoareci hipercolesterolemici a înregistrat un efect similar de scădere a lipidelor ca extractul de orez din drojdie roșie comercială (CRYR), deoarece ajută la reducerea nivelului crescut al enzimei hepatice serice și la creșterea nivelului de antioxidanți din ficat. Acest efect a fost, de asemenea, asociat cu reglarea în sus a apolipoproteinelor-E și inhibarea expresiei factorului Von Willebrand. Pe scurt, MFRYR îmbogățit în antioxidanți și aminoacizi fără monacolin-k a prezentat un efect hipocolesterolemic similar cu CRYR, care era bogat în monacolin-k și GABA.
1. Introducere
Orez de drojdie roșie, un produs de Monasc fermentație, a fost folosit în mod tradițional ca medicament (pentru a îmbunătăți digestia și circulația sângelui), conservant (caș de fasole chinezească/brânză, carne, pește etc.) și agent de colorare și inoculant pentru băuturile alcooliceAnchu, somsu) în țările asiatice încă din vremuri străvechi [1]. Poate fi produs fie prin sistemul de fermentare scufundat, fie prin starea solidă. Orezul este mediul de fermentare obișnuit [2] care se produce Monasc produse de fermentație [3] în afară de alte produse agricole, inclusiv dioscoree, manioc, cartof dulce, cartof [4], orz [5], amestec de orez și usturoi [6], soia [7], făină de porumb, făină de arahide, resturi de nucă de cocos, și făină de soia. Monacolin-k (care este identic cu lovastatina) a fost cel mai frecvent standardizat compus monacolinic din orezul de drojdie roșie fermentată pentru proprietatea sa de scădere a lipidelor prin inhibarea 3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A reductază [8]. Alți metaboliți secundari, inclusiv
-Acidul aminobutiric (GABA), acidul dimerumic și monasca, care sunt potențial agenți hipotensivi, antioxidanți și antiinflamatori, au fost, de asemenea, raportate ca fiind prezente în orezul de drojdie roșie fermentată [4, 9, 10].
2. Materiale și metode
2.1. Materiale
Colesterolul, 94%, a fost achiziționat de la Sigma Aldrich (SUA). Extractul comercial din orez de drojdie roșie (CRYR) a fost cumpărat de la magazinul farmaceutic local. Hipoxantină, xantină oxidază, superoxid dismutază, reactiv Folin-Ciocalteu, clorură de aluminiu, azotat de sodiu, acid ascorbic și acid galic au fost obținute de la Sigma Aldrich (SUA). Reactivul Griess provine de la Invitrogen (SUA). Toți solvenții utilizați au fost de reactiv analitic sau de calitate HPLC. Monascus purpureus inoculul de tulpină a fost obținut de la centrul de colectare a culturii MARDI.
2.2. Pregătirea extractului de apă de orez de drojdie roșie fermentată MARDI (MFRYR) folosind Monascus purpureus Tulpini
Orezul spart (1000 g) a fost spălat de 6 ori și înmuiat în apă rece la temperatura camerei timp de 18 ore. Orezul spart înmuiat a fost spălat, autoclavat la 121 ° C timp de 20 de minute și răcit la temperatura camerei. Orezul spart a fost apoi inoculat cu MARDI Monascus purpureus tulpini și incubate aerob la 32 ° C timp de 16 zile. A fost apoi recoltat, uscat la cuptor, măcinat în pulbere și extras cu apă deionizată. MARDI Monascus purpureus tulpini extract de apă de orez de drojdie roșie fermentată (MFRYR) au fost liofilizate folosind un congelator Virtis BenchTop (SP Industries, Inc., SUA) și depozitate într-un răcitor de 4 ° C până la analiză. Orezul nefermentat, MFRYR și extractul comercial de orez de drojdie roșie (CRYR) au fost supuse cuantificării monacolin-k și GABA utilizând metoda UPLC. Analiza Monacolin-k a fost efectuată folosind sistemul Acquity UPLC (Waters Corp., SUA) echipat cu o coloană RP-18 (1.7
m, 2,1 × 100 mm, Waters Acquity, SUA) și fază mobilă cu gradient de 100% acetonitril (eluant A) și 0,1% acid trifluoroacetic (eluant B). Modul de gradient liniar a fost efectuat (debit la 0,2 ml/min) de la 35% la 75% Eluant A timp de 7,8 minute și menținut la 75% Eluant A pentru încă 3,2 minute înainte de a reveni la 35% Eluant A pentru 0,8 minute. Timpul total de analiză a fost stabilit pentru 14 minute cu un volum de injecție de 1 L și temperatura coloanei de 30 ° C. Monacolin-k a fost detectat utilizând un detector de matrice fotodiodă (PDA) la 237 nm cu un interval de detecție între 210 și 350 nm. Pe de altă parte, concentrația de GABA și aminoacizi a fost determinată în conformitate cu Ali și colab. [16]. in vitro efectele antioxidante ale orezului nefermentat, MFRYR și CRYR au fost comparate utilizând testele privind conținutul fenolic total și puterea de reducere a ferului (FRAP) [17].