Explorarea efectelor antiurolitice ale formulării ayurvedice poliherbale Gokshuradi în

Amol L. Shirfule

1 Centrul de cercetare în domeniul toxicologiei alimentelor și medicamentelor, Institutul Național de Nutriție, Hyderabad 500007, India

antiurolitice

Venkatesh Racharla

2 Departamentul de farmacologie, Colegiul de farmacie CMR, Hyderabad 500007, India

S. S. Y. H. Qadri

3 Divizia Patologie, Institutul Național de Nutriție, Hyderabad 500007, India

Arjun L. Khandare

1 Centrul de cercetare în domeniul toxicologiei alimentelor și medicamentelor, Institutul Național de Nutriție, Hyderabad 500007, India

Abstract

1. Introducere

Urolitiaza oxalatului de calciu a devenit o problemă în creștere în multe țări din cauza variațiilor geografice/genetice și a stilurilor de viață moderne. Persoanele care trăiesc în secetă și zona aridă suferă mai mult de hiperabsorbția intestinală a oxalatului de calciu care duce la pietre la rinichi. Se estimează că 12% din populația lumii este afectată de pietre la rinichi, cu o rată de recurență de la 70 la 80% la bărbați și de la 47 la 60% la femei [1, 2]. Pietrele care conțin calciu sunt cele mai frecvente, cuprinzând aproximativ 75% din toate calculele urinare, care sunt observate sub formă de oxalat de calciu pur (50%) sau fosfat de calciu (5%) și un amestec al acestora (45%). Mulți factori afectează creșterea calculilor urinari, în care metabolismul mineralului joacă un rol important [3].

Deși, GPF este bine recunoscut în medicina tradițională indiană ca având efect antiurolitic, dar nu au fost publicate date științifice care să susțină mecanismul său de acțiune subiacent asupra calculilor cu oxalat de calciu. Prin urmare, acest studiu a fost propus pentru a determina potențialul terapeutic și mecanismul de acțiune al extractelor apoase din această formulare în gestionarea urolitiazei prin utilizarea metodelor in vitro și in vivo.

2. Material și metode

2.1. Produse chimice și reactivi

Toate substanțele chimice utilizate au fost de calitate analitică. Etilenglicol, timol, glutation redus, 5-5'-ditiobis, acid 2-nitrobenzoic, acid tiobarbituric, furosemid, H2O2, acid tricloracetic, 1,1,3,3, -tetraetoxipropan și clorhidrat de guanidină au fost obținute de la Sigma Chemical Company, Sf. Louis, MO, SUA. Reactivii utilizați pentru preparatele histologice au fost solubili în eozină, hematoxilină și xilen de la Himedia Chemical Limited, Bombay, India. Kituri utilizate în acest studiu pentru determinarea calciu, magneziu, azot uree din sânge (BUN), creatinină, superoxid dismutază, glutation peroxidază, oxalat și citrat au fost achiziționate de la Spinreact, Germania și Ambika diagnostic, India.

2.2. Materiale vegetale

Plantele utilizate pentru formulare au fost colectate din pădurile locale din districtul Nanded, Maharashtra, India și autentificate de experți. Exemplarele de voucher au fost depuse în ierbarul Școlii de Științe ale Vieții, S.R.T.M. Universitatea, Maharashtra, India. Părțile respective ale fiecărei plante menționate anterior au fost colectate și apoi uscate la umbră. Părțile uscate au fost curățate de materii străine și apoi împământate cu pulbere fină într-o râșniță.

2.3. Medicament standard

Formularea poliesterică Cystone de la Himalaya Drug Co., Bangalore, India a fost utilizată ca medicament standard în acest studiu. Formularea conținea Didymocarpus pedicellata, Saxifraga ligulata, Rubia cordifolia, Cyperus scariosus, Achyranthes aspera, Onosma bracteatum, Vernonia cinerea, Shilajeet purificat și Hajrul Yahood Bhasma.

2.4. Efect antioxidant in vitro

Efectul antioxidant al GPAE a fost determinat de activitatea de eliminare a radicalilor liberi și de efectele inhibitoare ale peroxidării lipidelor. S-a preparat o soluție 0,1 mM de radical DPPH în metanol și s-au adăugat 1 mL din această soluție la 3 mL de GPAE la concentrații diferite pentru a determina activitatea de eliminare a radicalilor liberi [22]. Soluțiile au fost incubate timp de 30 de minute la temperatura camerei, iar apoi absorbanța a fost măsurată la 517 nm. Scăderea absorbției soluției de DPPH a fost considerată ca o creștere a activității de eliminare a radicalilor DPPH. Această activitate este dată ca% DPPH eliminare radicală care a fost calculată în ecuație folosind soluția DPPH ca control.

Activitatea inhibitoare a peroxidării lipidelor a fost determinată în rinichii de șobolan izolați, care au fost omogenizați electric în soluție salină tampon fosfat 50 mM rece (PBS) și ajustată la pH 7,4. Omogenatul a fost procesat în continuare, iar activitatea inhibitoare a peroxidării lipidelor a fost determinată printr-o metodă raportată [23]. Raportul de inhibare a fost calculat utilizând formula dată pentru activitatea de eliminare a radicalilor liberi.

2.5. În Studiile Vivo

2.5.1. Animale

Îngrijirea și manipularea animalelor au fost în conformitate cu liniile directoare standard acceptate la nivel internațional pentru utilizarea animalelor, iar protocolul a fost aprobat de comitetul instituțional de etică a animalelor (numărul IAEC P25/7-2011/GBR) de la Institutul Național de Nutriție, Hyderabad, India. Șobolanii Wistar (180-220 g) de oricare dintre sexele utilizate pentru acest studiu au fost furnizați și adăpostiți la Centrul Național pentru Științe Animale de Laborator, Hyderabad, India și păstrați în cuști de plastic (47 cm × 34 cm × 18 cm) cu praf de fierăstrău (reînnoit după fiecare 48 h), la o temperatură controlată de 23-25 ​​° C și 12 h ciclu lumină-întuneric. Animalelor li s-a administrat o dietă standard de șobolan, disponibilă în centru. Animalele au avut acces gratuit la alimente și apă ad libitum pe tot parcursul studiului, cu excepția a 24 de ore înainte și în timpul a 6 ore de studiu diuretic, iar în timp ce colectau probe de urină de 24 de ore, alimentele au fost retrase.