Eficacitatea, siguranța și recurența noilor progestine și a modulatorului selectiv al receptorilor de progesteron pentru
Abstract
fundal
Tratamentele medicale actuale pentru endometrioză sunt foarte limitate. Modulatorii selectivi ai receptorilor de progesteron și progesteron (SPRM) au fost dezvoltați, dar eficacitatea, siguranța, mecanismul și recurența lor în endometrioză nu sunt studiate pe deplin.
Metode
Pentru a compara efectele terapeutice, efectele secundare și acțiunile terapeutice ale Esmya, Duphaston și Dienogest în endometrioză. Endometrioza experimentală a fost indusă fie prin transplant intraperitoneal, fie subcutanat de endometru de șoarece. Mărimea leziunii, greutatea și histologia la sfârșitul intervenției au fost comparate. Au fost examinate expresia markerilor înrudiți în leziunile endometriotice. Au fost măsurate greutățile corpului, uterului și ovarului, glandelor și grosimilor endometriale (ETI), precum și numărul foliculilor. Pentru studiu recurent, creșterea leziunii înainte și după intervenție a fost monitorizată.
Rezultate
După Esmya, Duphaston, tratamentul cu Dienogest, dimensiunea și greutatea leziunii au fost semnificativ reduse. Proliferarea expresiei Pcna a fost semnificativ redusă în toate grupurile, dar celulele de proliferare au fost reduse semnificativ doar în grupul Duphaston. Expresia Mapop1 a apoptozei și celulele pozitive TUNEL au fost crescute semnificativ în grupul Duphaston. Adeziunea expresiei Mmp2 și Itgavβ3 a fost semnificativ crescută în grupul Esmya. Expresia Plau, Hif1α și Vegfa, nivelurile de PGE2 ale fluidului peritoneal și expresia ERα și ERβ nu au fost afectate; în timp ce expresia PR a fost semnificativ mai mică în toate grupurile. Numărul de glande endometriale în uter a fost semnificativ crescut în grupul Dienogest, ETI a scăzut semnificativ în grupul Duphaston, iar AFC au fost semnificativ crescute în grupul Esmya. La încetarea tratamentului, creșterea leziunii revine rapid în grupurile Dienogest și Duphaston, dar încet în grupul Esmya.
Concluzie
Esmya, Duphaston și Dienogest sunt medicamente anti-endometrioză eficiente care vizează proliferarea, apoptoza și aderența. Esmya, Duphaston și Dienogest sunt bine tolerate, deși hiperplazia glandulară endometrială a fost găsită în Dienogest, atrofia endometrială în Duphaston, acumularea foliculului în Esmya.
fundal
Endometrioza este o afecțiune ginecologică benignă și cronică, caracterizată prin prezența țesuturilor de tip endometrial în afara cavității uterine. Afectează aproximativ 10% dintre femeile reproductive și până la 24-50% dintre femeile infertile [1, 2]. Deși endometrioza este o boală dependentă de estrogen, studiile etiologice au arătat că patogeneza endometriozei este complexă și multifactorială [3,4,5,6]. Cea mai larg acceptată și susținută științific teorie pentru apariția endometriozei este menstruația retrogradă, deoarece locațiile anatomice și caracteristicile histochimice ale leziunilor endometriotice [4, 7]. Simptomele clinice ale endometriozei includ, dar nu se limitează la dureri pelvine, dismenoree, dispareunie și infertilitate [8], care au impact semnificativ atât asupra sănătății generale, cât și a celor psihice ale persoanelor afectate [9, 10]. Tratamentul actual disponibil al endometriozei, inclusiv intervenția chirurgicală de îndepărtare și medicația hormonală [11], nu sunt încă ideale pentru femeile reproductive care ar dori să-și păstreze fecunditatea fără niciun efect secundar și recurență.
În prezentul studiu, ne-am propus să comparăm efectele anti-endometriotice, efectele secundare asupra reproducerii, mecanismul terapeutic și recurența Esmya, Duphaston și Dienogest într-un model experimental de șoarece de endometrioză.
Metode
Substanțe chimice și reactivi
17-β-estradiolul a fost achiziționat de la Sigma Chemical Co. (St. Louis, SUA). Ketamina, xilazina și acepromazina au fost achiziționate de la Alfasan (Olanda, Olanda); Anticorpul monoclonal de iepure pentru Ki67 a fost achiziționat de la tehnologia de semnalizare celulară (D3B5, Danvers, SUA). Trusa de detectare a apoptozei in situ a fost achiziționată de la Merck Millipore (SUA). Reactivi pentru RT-PCR și PCR cantitativ au fost cumpărați de la TaKaRa (TaKaRa Bio, Shiga, Japonia). Kituri ELISA de estradiol și progesteron au fost obținute de la Cayman Chemical, SUA. Kitul ELISA Prostaglandin E2 a fost achiziționat de la Abcam (Abcam, Anglia).
Modelul de animale și endometrioză
Șoareci femele C57BL/6 de șase până la șapte săptămâni au fost adăpostite în camere pentru animale fără patogeni, cu un ciclu fix de 12 ore de lumină și 12 ore de întuneric. Au fost furnizate chow-uri de laborator standard și apă curată și toți șoarecii au fost lăsați să se aclimatizeze cu cel puțin 1 săptămână înainte de experimentele. Un amestec de ketamină la 100 mg/kg, xilazină la 10 mg/kg și acepromazină la 3 mg/kg a fost injectat intraperitoneal pentru anestezierea șoarecilor înainte de intervenția chirurgicală invazivă. Pe baza diferitelor obiective ale experimentelor din acest studiu, au fost stabilite două modele diferite de endometrioză la șoareci, după cum urmează. Ciclul estru al animalelor a fost sincronizat prin transferarea așternuturilor masculine îmbibate cu urină la fiecare 5 zile, atât pentru modelul de șoarece de endometrioză IP, cât și pentru cel SC. [27]. Toate experimentele pe animale au fost aprobate de Comitetul de etică pentru experimentarea animalelor, Universitatea chineză din Hong Kong.
Model de șoarece de endometrioză intraperitoneală (IP) pentru siguranță terapeutică și studiu mecanic
Modelul de endometrioză IP a fost stabilit cu modificări minore, așa cum s-a descris anterior [27, 28]. Pe scurt, șoarecii au fost împărțiți în mod aleatoriu în două grupuri, fie donatori, fie beneficiari. În ziua 0, uterul a fost disecat de la fiecare șoarece donator după sacrificare și spălat în PBS de 3 ori. Țesuturile endometriale au fost preparate din fiecare corn uterin cu o lovitură de biopsie de 2 mm. După ce s-au pregătit țesuturi endometriale, șoarecele receptor a fost anesteziat și s-a făcut o incizie de 0,5 până la 1 cm pe linia mediană a peretelui abdomenului șirului și peritoneului. Colonul a fost scos cu grijă și păstrat hidratarea cu PBS steril. Trei bucăți de țesuturi endometriale au fost suturate pe vasele mezenterului cu 6-0 fir chirurgical la fiecare șoarece primitor. Colonul a fost repus cu ușurință în cavitatea peritoneală; peretele și pielea abdomenului au fost închise individual cu 5-0 fire chirurgicale. Șoarecii au fost apoi așezați pe un tampon cald până la recuperarea completă a anesteziei după operație.
Model de șoarece de endometrioză subcutanată (SC) pentru studiul recurenței
Am stabilit un alt model de endometrioză de șoarece prin transplant SC pentru a monitoriza schimbarea dinamică a creșterii leziunii în timpul și după intervențiile medicale. S-a raportat că atât modelul IP, cât și modelul SC prezintă o dezvoltare similară a endometriozei în ceea ce privește creșterea asemănătoare chistului și structurile glandulare și epiteliale ale leziunilor [27, 29]. Aceiași șoareci de tulpină C57BL/6 au fost folosiți pentru a stabili modelul de șoarece endometrioză SC așa cum s-a descris mai înainte [30, 31]. Pe scurt, uterul a fost disecat de la șoareci donatori și țesuturile endometriale au fost preparate ca modelul IP menționat mai sus. Sub anestezie, pielea abdominală a fost rasă și apoi s-a făcut o incizie cutanată de 3 mm pe linia mediană a abdomenului fiecărui șoarece primitor și au fost create cu atenție buzunare bilaterale SC, fără a deteriora peretele abdominal. O bucată de țesut endometrial a fost plasată în fiecare buzunar și apoi incizia cutanată a fost închisă cu 5-0 fire chirurgicale.