Efectul protector și indicele terapeutic al indralinei la maimuțele rhesus juvenile
Mihail V. Vasin
1 Centrul Științific de Stat Federația Rusă - Institutul pentru Probleme Biomedice, Academia Rusă de Științe, 76a Khoroshovskoe schuss, Moscova 123007, Rusia
Leonid F. Semenov
2 Institutul Științific de Primatologie Medicală, Academia Rusă de Științe Medicale, 1 Veseloe, Sochi 354376, Rusia
Nikolai N. Suvorov
3 Centrul de chimie al agenților medicinali, strada Zuvovskaya nr. 7, Moscova 119815, Rusia
Vsevolod V. Antipov
1 Centrul Științific de Stat Federația Rusă - Institutul pentru Probleme Biomedice, Academia Rusă de Științe, 76a Khoroshovskoe schuss, Moscova 123007, Rusia
Igor B. Ushakov
1 Centrul Științific de Stat Federația Rusă - Institutul pentru Probleme Biomedice, Academia Rusă de Științe, 76a Khoroshovskoe schuss, Moscova 123007, Rusia
Leonid A. Ilyin
4 Burnazian Medical Medical Biophysical Center, Federal Biomedical Agency, 17a Street Gamalea, Moscow 123098, Russia
Boris A. Lapin
2 Institutul Științific de Primatologie Medicală, Academia Rusă de Științe Medicale, 1 Veseloe, Sochi 354376, Rusia
Date asociate
Abstract
INTRODUCERE
MATERIALE ȘI METODE
Experimente pe animale
Experimentele au fost efectuate pe maimuțe rhesus masculi și femele juvenile (Macaca mulatta) cu vârste cuprinse între 2-3 ani, cu greutăți corporale de 2,1-3,5 kg. Greutatea medie a animalelor, cu quartile inferioare și superioare, a fost de 2,8 (2,2-3,0) kg în grupul de control al radiațiilor și de 2,7 (2,2-3,1) kg în grupul experimental de maimuțe (cele care au primit radioprotectorul). Toate animalele au fost hrănite cu o dietă standard furajeră și cu apă potabilă. Dieta consta din fructe (mere) și legume (morcovi, sfeclă roșie, varză, cartofi), precum și proteine din ouă de pui. Eutanasia nu a fost utilizată în acest studiu.
Acest studiu a fost realizat luând în considerare cerințele conform actelor legale de reglementare privind procedura de lucru experimental pe animale, inclusiv la nivel național (Ordinul Ministerului Sănătății al Federației Ruse nr. 267 din 19 iunie 2003) și orientările etice internaționale pentru cercetare medicală și biomedicală care implică animale (Declarația Asociației Medicale Mondiale din Helsinki, 2000).
Iradiere
Maimuțele au fost expuse la iradiere gamma bilaterală a corpului total în instalația experimentală 60 Co a modelului GUBE-2000 (2000 Ci cu încărcare de 60 Co) (Rusia) la o doză letală de 6,8 Gy (doza de radiație cauzând 100% mortalitatea animalelor cu 30 d după iradiere = LD100/30) și o rată a dozei de 22,8 cGy min –1. Animalele au fost iradiate fără anestezie. Doza absorbită în corp (Dab) a fost calculată după cum urmează: Dab = Dex × 1,137 × 0,877, unde Dex = doza de radiație de expunere în aer, 0,877 = un coeficient de tranziție pentru calcularea dozei absorbite în aer de la doza de expunere în aer, și 1.137 = coeficient de tranziție al razei gamma 60 Co energie de 1,25 MeV pentru calcularea dozei absorbite în corp din doza absorbită în aer.
Administrarea medicamentelor
Indralin (CAS 156799-03-0, Farmzaschita, Agenția Federală Biomedicală, Moscova, Rusia) a fost administrat intramuscular (im) maimuțelor din zona coapsei la doze de 40, 60, 80 sau 120 mg kg –1 ca soluție 2,5% 5 minute înainte de expunerea la radiații. După iradiere, animalele au primit agenți antimicrobieni conform unui singur protocol de tratament: levomicetin (Ferein, Moscova, Rusia) 200 mg kg –1 administrat oral o dată pe zi în Zilele 1–10; penicilină (Biosynthes, Penza, Rusia) 150 mg kg –1 și streptomicină (Biochimic, Saransk, Rusia) 50 mg kg –1 i.m. o dată pe zi în Zilele 10-20. Patru macaci neradiați au primit doze toxice de indralină i.m. (800 și 1000 mg kg –1).
Determinarea efectului radioprotector al indralinei
Proprietățile radioprotectoare ale indralinei au fost estimate din analiza de supraviețuire a animalelor peste 60 de zile după iradiere și prin prezența simptomelor clinice ale sindromului de radiații acute (ARS). Modificările în greutatea corporală și temperatura rectală au fost monitorizate. De asemenea, am examinat regiunea abdominală prin palpare, am evaluat funcția pulmonară prin observarea respirației și am inspectat vizual pielea și membranele mucoase, inclusiv cavitatea bucală și zona anală. Numărul de leucocite, trombocite, eritrocite și reticulocite, valorile hemoglobinei și rata de sedimentare a eritrocitelor (VSH) au fost determinate din sângele periferic al animalelor. Manifestările clinice ale leziunilor acute cauzate de radiații în intestine au inclus diaree și tensiune la nivelul abdomenului. Aceste simptome au fost evidente în zilele 5-10. În timpul perioadei prodromale a fost monitorizată prin înregistrarea vărsăturilor, diareei și tulburărilor locomotorii și comportamentale în prima zi după iradiere. Dozele toxice de indralină s-au bazat pe semne clinice de otrăvire și moarte a animalelor în termen de trei zile de la tratament.
analize statistice
Datele sunt exprimate ca medie ± eroare standard. Prezența unui efect radioprotector a fost evaluată prin analiza curbei de supraviețuire utilizând metoda Kaplan-Meier (testul F al lui Cox). Analiza statistică a fost efectuată folosind programul de calculator „Statistica” versiunea 7. Probabilitatea statistică a fost determinată utilizând testul U non-parametric Mann - Whitney cu o dimensiune minimă a eșantionului de trei, un test Fisher cu două cozi și analiza factorială a varianței . Valori P Fig.1. 1. După iradiere gamma 6,8 Gy (LD100/30; rata dozei 22,8 cGy min –1), i.m. administrarea de indralin în doză de 120 mg kg –1 a protejat cinci din șase maimuțe, comparativ cu moartea tuturor celor 10 animale din grupul de radiații martor (P –1), efectul protector al radiației al indralinului a fost egal cu 50% din au supraviețuit șase maimuțe). După administrarea a 60 mg kg –1, una din patru maimuțe a supraviețuit până în Ziua 60 a experimentului. Indralina în doză de 40 mg kg -1 nu a fost eficientă, iar cele trei animale experimentale au murit din cauza ARS. ED50 al indralinei la maimuțele expuse la iradiere gamma (LD100/30) timp de 30 de minute a fost egal cu 77,3 (63,3-94,3) mg kg –1. Indralina a redus severitatea daunelor letale cauzate de radiații la maimuțe până la un curs mai ușor de ARS.