Efectele extractului de prune asupra sistemului osos al șoarecilor fetali și nou-născuți - FullText - Medical
Departamentul de biologie, Colegiul de Științe
Casetă poștală 71454, Shiraz, (Iran)
Articole similare pentru „”
- Stare de nervozitate
Abstract
Obiectiv: Pentru a evalua efectele Prunus domestica L. extracte pe fetuți și sisteme scheletice neonatale. Materiale și metode: Un total de 32 de șoareci însărcinați (Musculus) a primit extract hidroalcoolic de vehicule și prune în zilele de gestație 1-18 și în întreaga perioadă gestațională, precum și, respectiv, la 10 zile postpartum. Un total de 30 de șoareci neîncărcați au fost hrăniți cu extract hidroalcoolic de prune și extract de suc de prune timp de 30 de zile. Au fost măsurate conținutul de calciu osos și concentrațiile serice de calciu, magneziu și fosfatază alcalină. Sistemele scheletice ale fetușilor și ale nou-născuților lor au fost colorate cu albastru alcian și roșu alizarină S, iar lungimea femurului, tibiei și centrul lor de osificare au fost măsurate. Rezultate: Lungimea coapsei coroanei la șoarecii nou-născuți de la mame tratate cu extract de prune (4,61 ± 0,25 mm) a fost mai mare comparativ cu grupul martor (4,48 ± 0,31 mm, p = 0,001) și indicele de osteogeneză femurală a șoarecilor nou-născuți de la mame tratate cu extractul de prune a fost, de asemenea, mai mare (0,87 ± 0,09) comparativ cu grupul martor (0,81 ± 0,06, p = 0,007). Concluzie: Constatările au arătat că șoarecii însărcinați tratați cu extract de prune aveau fături și șoareci nou-născuți cu un indice de osteogeneză mai mare decât cei din martori.
Introducere
Prunul este un pom fructifer de piatră aparținând genului Prunus și subgen Prunus. Rezultatele studiilor recente au arătat că prunul uscat, prunele (Prunus domestica L.), poate fi eficient atât în prevenirea cât și în inversarea pierderii osoase [1,2,3].
Metode și materiale
Pregătirea extractului
P. domestica L. fructele au fost colectate din Sepidan, un oraș situat în provincia Fars, Iran. Un total de 150 g de prune uscate au fost extrase din 1.000 g de prune proaspete. Extractul hidroalcoolic a fost preparat folosind o metodă de percolare și purificat cu un desicator. De asemenea, sucul de fructe din 1.000 g de prune proaspete a fost condensat la 400 ml într-o baie de apă de 60 ° C.
Administrații pentru animale și extracte
Pentru studiu au fost folosiți 32 de șoareci femele care cântăresc între 30 și 40 g, obținute de la Animal House, Universitatea de Științe Medicale Shiraz, Shiraz, Iran. Animalele au fost adaptate la condițiile de laborator timp de 2 săptămâni înainte de începerea experimentelor. Șoarecii au fost ținuți la o temperatură controlată a camerei de 22-24 ° C cu un ciclu luminos: întunecat de 12:12 h (luminile aprinse la 09.00 h și oprite la 21.00 h). Șoarecii aveau acces gratuit la alimente și apă de la robinet. Experimentele pe animale au fost aprobate de Comitetul instituțional de etică și sănătate animală, Departamentul de biologie, Universitatea Shiraz. Șoarecii femele au fost în cuști cu șoareci masculi și inseminarea a fost verificată în dimineața următoare prin verificarea prezenței unui dop de copulare în vagin. Ziua în care s-a observat dopul vaginal a fost desemnată ca ziua 0 a sarcinii (ziua de gestație 0, GD 0). Șoarecii însărcinați au fost cântăriți pe următoarele GD: 5, 8, 12 și 15. O reprezentare schematică a procedurii experimentale este dată în figura 1.
FIG. 1
Reprezentare schematică a procedurii experimentale.
Șoarecii însărcinați au fost împărțiți în două grupuri experimentale și două grupuri martor (n = 8). Șoarecii din primul grup experimental au primit 1,6 g/kg extract hidroalcoolic de prune (PHE) pe cale orală de la GD 1 la 18. Șoarecii din al doilea grup experimental au fost tratați cu aceeași doză pentru întreaga perioadă gestațională, precum și 10 zile după naștere.
Pentru compararea șoarecilor nepregresați și a șoarecilor însărcinați, șoarecii femele neîncărcați cu greutatea între 30 și 40 g au fost împărțiți în grupuri experimentale și de control (n = 10) tratați cu PHE (1,6 g/kg). De asemenea, șoarecii care nu sunt gravide (n = 10) au fost tratați cu extract de suc de prune (PJE, 8 ml/kg) pentru a compara efectele acestor extracte. Extractele au fost suspendate în 0,2 ml apă distilată și administrate pe grupe experimentale pe cale orală prin gavaj cu ac timp de 30 de zile. Grupurile martor au primit 0,2 ml apă distilată în condiții similare celorlalte grupuri. Șoarecii au fost cântăriți săptămânal.
Măsurarea indicelui osteogenezei
Fetusii grupului PHE la GD 19 și nou-născuții în ziua a 10-a postpartum au fost sacrificați sub anestezie profundă. Au fost măsurate lungimea și greutatea coroanei. Șaizeci și unu de fetiți și 40 de nou-născuți au fost fixați în etanol 95%, apoi au fost jupuiți și eviscerați. Au fost degresate în acetonă timp de 3 zile la 37 ° C și colorate cu un amestec de albastru alcian (Merck, Darmstadt, Germania) și roșu alizarină S (Riedel-de Haën, Germania). Animalele au fost curățate într-o serie de concentrații scăzute de hidroxid de potasiu în glicerină și apoi ținute în glicerină. Scheletul cartilaginos a fost colorat cu colorant albastru, iar scheletul osificat cu roșu. Lungimea totală a femurului și tibiei și lungimea zonelor osificate au fost măsurate sub un stereomicroscop echipat cu un ocular condus (Zeiss, Mc-80; Jena, Germania). Indicele de osteogeneză a fost calculat prin împărțirea lungimii osificate la lungimea totală a fiecărui os (fig. 2).
FIG. 2
Efectele extractelor de prune asupra scheletului nou-născut curățat colorat cu roșu alizarină S și albastru alcian. Părțile cartilaginoase și osoase ale scheletului s-au colorat în albastru și, respectiv, în roșu. Șoarecii tratați cu PHE (stânga) au fost mai lungi decât șoarecii martor (dreapta).
Măsurarea conținutului de calciu
La sfârșitul experimentului, șoarecii însărcinați și non-gravidați au fost sacrificați sub anestezie profundă și coapsele lor au fost disecate. Apoi femurele au fost îndepărtate și curățate. Oasele au fost uscate timp de 24 de ore într-un incubator la 56 ° C. Oasele uscate au fost scrumate la 550 ° C timp de 20 de ore într-un cuptor (model 10500, Thermolyne, Dubuque, Iowa, SUA). Osul a fost pudrat și 0,03 g de pulbere a fost dizolvat în 250 pl HCI; această soluție a fost apoi diluată cu 31 ml de apă distilată. Soluțiile standard au fost preparate pentru a conține 0,2 g de CaCI2 în HCI 2% (densitate 720 ppm). Soluțiile stoc au fost diluate la 0,03 ppm. Conținutul de calciu (Ca) a fost măsurat folosind un fotometru cu flacără (modelul 8515, Jenway, Stone, Staffs, UK). Ecuația de potrivire liniară a fost calculată cu Microsoft Excel (Microsoft Corp., Redmond, Washington, SUA) ca y = 0,0073x + 0,0624 unde y este conținutul de Ca os și x este conținutul de Ca al soluției standard.