Efecte inhibitoare ale medicamentelor din plante japoneze Sho-saiko-to și Juzen-taiho-to asupra nealcoolicului

Departamentul de afiliere pentru patologie, Facultatea de Medicină a Universității Teikyo, Tokyo, Japonia

Yoshihisa Takahashi,
Yurie Soejima,
Arisa Kumagai,
Masato Watanabe,
Hiroshi Uozaki,
Toshio Fukusato

Cifre

Abstract

Citare: Takahashi Y, Soejima Y, Kumagai A, Watanabe M, Uozaki H, Fukusato T (2014) Efecte inhibitoare ale medicamentelor din plante japoneze Sho-saiko-to și Juzen-taiho-to asupra steatohepatitei nealcoolice la șoareci. PLoS ONE 9 (1): e87279. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0087279

Editor: Kalpana Ghoshal, Universitatea de Stat din Ohio, Statele Unite ale Americii

Primit: 23 iulie 2013; Admis: 19 decembrie 2013; Publicat: 22 ianuarie 2014

Finanțarea: Această lucrare a fost susținută de subvențiile Societății japoneze pentru promovarea științei (JSPS) pentru cercetarea științifică numărul 23790753 (URL: http://www.jsps.go.jp/j-grantsinaid/). Finanțatorul nu a avut nici un rol în proiectarea studiului, colectarea și analiza datelor, decizia de publicare sau pregătirea manuscrisului.

Interese concurente: Autorii au declarat că nu există interese concurente.

Introducere

Boala hepatică grasă nealcoolică (NAFLD) este o afecțiune în care se acumulează grăsime excesivă în ficatul unui pacient care nu are antecedente de abuz de alcool. NAFLD este clasificat în 2 categorii: steatoza simplă, în care se observă numai steatoza și steatohepatita nealcoolică (NASH), în care, pe lângă steatoză, se observă inflamația lobulară și leziunea celulelor hepatice. NASH este o boală progresivă și se poate dezvolta în ciroză hepatică sau carcinom hepatocelular [1], [2]. NAFLD/NASH, considerat ca o manifestare hepatică a sindromului metabolic [3], [4], este în creștere la nivel mondial, împreună cu prevalența crescută a obezității și, în același timp, este cea mai frecventă boală hepatică cronică.

Ipotezele cu două lovituri [5] sau cu lovituri multiple [6] sunt, în general, susținute ca mecanisme care stau la baza patogeniei NAFLD/NASH. Se crede că acumularea de grăsime în ficat este necesară pentru apariția NAFLD, iar alte lovituri, cum ar fi stresul oxidativ, creșterea citokinelor inflamatorii sau scăderea citokinelor antiinflamatorii, sunt necesare pentru dezvoltarea bolii NASH progresive. Modelele animale sunt utile pentru elucidarea patogeniei și pentru dezvoltarea de noi tratamente pentru NASH. Deși au fost propuse mai multe modele genetice și nutriționale animale de NAFLD/NASH, aceste modele nu replică spectrul complet al caracteristicilor NAFLD/NASH uman [7]. Prin urmare, combinația a 2 sau mai mulți factori a fost utilizată ocazional ca model de combinație.

Scăderea în greutate prin modificarea stilului de viață este principalul tratament pentru NAFLD. Cu toate acestea, trebuie dezvoltată o terapie medicamentoasă pentru NAFLD, deoarece este adesea dificil pentru pacienții obezi să mențină modificări sănătoase ale stilului de viață. Medicamentele pe bază de plante japoneze (medicamente Kampo) sunt utilizate pe scară largă în Japonia și peste 80% dintre medicii japonezi prescriu în mod obișnuit aceste medicamente [8]. Întrucât se crede că JHM-urile posedă activități anti-oxidative și antiinflamatorii [9] - [11], acestea ar putea fi eficiente în tratamentul NASH. Cu toate acestea, până în prezent, doar 2 studii au examinat efectele JHM-urilor asupra NAFLD (adică, 1 studiu de bază asupra sho-saiko-to (TJ-9), keishi-bukuryo-gan (TJ-25) și oren-gedoku- to (TJ-15) [12] și 1 studiu clinic retrospectiv asupra TJ-25 [13]). Cu toate acestea, analizele patologice și moleculare ale țesuturilor hepatice nu sunt complete.

În studiul de față, pentru a examina efectele a 4 JHM [TJ-9, inchin-ko-to (TJ-135), juzen-taiho-to (TJ-48) și TJ-25] asupra NASH, am folosit un model combinat în care șoarecii db/db au fost hrăniți cu o dietă cu deficiență de metionină și colină (MCD). Mai mult, pentru a determina mecanismul care stă la baza acțiunilor JHM-urilor, am examinat nivelurile de expresie ale diferitelor gene ale citokinelor și ale receptorilor și nivelurile unui marker al stresului oxidativ din ficat. Am observat că TJ-9 și TJ-48 au inhibat leziunile hepatice ale modelului animal, deși mecanismele nu au fost complet elucidate.

Materiale și metode

Declarație de etică

Acest studiu a fost realizat în strictă conformitate cu recomandările din Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator de la Institutele Naționale de Sănătate. Protocolul a fost aprobat de Comitetul de Etică al Universității Teikyo (11-015). Toate animalele au primit îngrijire umană și s-au depus toate eforturile pentru a reduce la minimum suferința.

Medicamente

TJ-9, TJ-135, TJ-48 și TJ-25 au fost donate cu amabilitate de către Tsumura & Co. (Tokyo, Japonia). Aceste medicamente conțin extracte brute de ierburi. Compoziția fiecărui medicament este rezumată în Tabelul 1. Profilele tridimensionale de cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) ale acestor medicamente au fost furnizate și de la Tsumura & Co. ca date suplimentare ale produselor.

Animale și protocoale experimentale

Treizeci și șase de șoareci BKS.Cg + Lepr db/+ Lepr db/J (db/db) de sex masculin au fost cumpărați de la Charles River Laboratories Japan, Inc. (Yokohama, Japonia). După 1 săptămână de aclimatizare la mediu, șoarecii au fost împărțiți în 6 grupuri (n = 6 pentru fiecare grup): grupuri martor, MCD, TJ-9, TJ-135, TJ-48 și TJ-25. Șoarecii din grupul de control au fost hrăniți cu o dietă de control (dieta CRF-1) (Oriental Yeast Co., Tokyo, Japonia) ad libitum. Șoarecii din grupul MCD au fost hrăniți cu o dietă MCD (F2MCD) (Oriental Yeast Co.) ad libitum. Șoarecii din grupurile TJ-9, TJ-135, TJ-48 și TJ-25 au fost hrăniți cu dieta MCD suplimentată cu 1,5% (g/g) TJ-9, TJ-135, TJ-48 și TJ- 25, respectiv, ad libitum. Fiecare JHM conținea doar o cantitate mică de metionină și colină, iar conținutul de metionină și colină din dieta fiecărui grup JHM era de doar aproximativ 1% comparativ cu cel al grupului martor [14] - [16]. Astfel, este puțin probabil ca metionina și colina conținute în fiecare JHM să aibă un efect major asupra rezultatelor prezentului studiu. Dietele au fost depozitate la frigider la 4 ° C; recipientele pentru furaje pentru șoareci au fost reumplute cu dietă proaspătă de 3 ori pe săptămână, iar consumul de alimente a fost înregistrat. Șoarecii au fost menținuți în Centrul pentru animale de laborator al Școlii de Medicină a Universității Teikyo la 25 ° C și 45% umiditate.