Efect comparativ antilipidemic al administrării de N-acetilcisteină și ulei de susan în dieta indusă
Abstract
fundal
Există un număr din ce în ce mai mare de terapii antilipidemice noi în curs de analiză. Efectul hipolipidemic supus al N-acetilcisteinei (NAC) și al uleiului de susan a fost studiat într-un model de șoarece de hipercolesterolemie indusă de dietă.
Metode
Șoarecii masculi C57bl/6 au fost repartizați în următoarele grupe: grupul de control (NC), grupul (HC) care a primit dietă de test suplimentat cu 2% colesterol și 0,5% acid colic timp de 8 săptămâni, grupul (HCN) care a primit dieta de test cu supliment de NAC (230 mg/kg po) și grupul (HCS) au alimentat dieta testată îmbogățită cu 10% ulei de susan. Colesterolul seric total, LDL-colesterol, HDL-colesterol și trigliceride au fost analizate la începutul și la sfârșitul experimentului. Nivelurile totale de peroxizi și oxid nitric (NO) au fost măsurate în ser la sfârșitul experimentului. Leziunile hepatice și aortice au fost evaluate prin colorare hematoxilină-eozină.
Rezultate
Au fost înregistrate niveluri serice mai ridicate de colesterol total și LDL la toate grupurile care au alimentat dieta cu colesterol ridicat. Grupul HCN a prezentat niveluri reduse de lipide comparativ cu grupurile HC și HCS. Nu s-au observat diferențe între grupurile HCS și HC. Conținutul de peroxid din ser a fost semnificativ crescut la șoarecii care consumă o dietă bogată în colesterol. Administrarea de NAC și ulei de susan a dus la o scădere semnificativă a peroxidării lipidelor serice la nivelurile grupului de control, în timp ce doar NAC a restabilit NO biodisponibilitatea. În ceea ce privește histologia ficatului, leziunile observate în grupul HCN au fost mai puțin severe decât cele observate în celelalte grupuri cu colesterol ridicat.
Concluzie
Administrarea concomitentă de NAC, dar nu ulei de susan, a restabilit profilul lipidic perturbat și a îmbunătățit steatoza hepatică la șoarecii hipercolesterolemici induși de dietă studiați. Ambii agenți par să amelioreze apărarea serică a antioxidanților.
fundal
Hipercolesterolemia în combinație cu concentrația crescută de LDL-colesterol reprezintă factori de risc majori pentru dezvoltarea și progresia aterosclerozei și, în consecință, a bolilor cardiovasculare [1]. Pe baza acestor dovezi, cercetările științifice vizează descoperirea de noi medicamente cu efecte hipocolesterolemiante. Terapii dietetice pe bază de plante și componente alimentare naturale sunt propuse în zilele noastre pentru prevenirea dislipidemiei. Antioxidantul N-acetilcisteină (NAC), un organosulfur din Allium plantele și uleiul de susan apar ca agenți promițătoare de scădere a lipidelor în literatura recentă.
NAC este un compus hidrofil care conține cisteină, format în mod natural în Allium plante precum usturoiul și ceapa. S-a constatat că aportul acestui compus scade în mod eficient triacilglicerolul indus de grăsimi saturate (TAG) și acumularea de colesterol la ficatul șoarecilor. În plus, s-a demonstrat că protejează ficatul împotriva daunelor oxidative ridicate induse de grăsimi [2].
Susanul aparține speciei Sesamum indicum (Pedaliaceae familie). A fost utilizat pe scară largă ca aliment tradițional în Orient, dar este, de asemenea, considerat că are proprietăți medicale importante. Există numeroase date disponibile din diferite studii, în special asupra speciilor de rozătoare care susțin acțiunea hipolipidemică a multor componente ale semințelor de susan și ale uleiului său [3, 4]. Satchithanandam și colab. [4] au concluzionat că absorbția colesterolului limfatic la șobolanii hrăniți cu diete care conțin ulei de susan a fost cu aproximativ 50% mai mică decât la șobolanii hrăniți cu o dietă de control. În plus, administrarea pulberii de semințe de susan negrăsate la șobolani albino hipercolesterolemici, le-a îmbunătățit starea antioxidantă și a scăzut semnificativ lipidele plasmatice [5]. Din câte știm, nu există dovezi bazate pe literatură despre efectele hipolipidemice potențiale ale administrării uleiului de susan fără înlocuirea altor compuși dietetici grași.
Prin urmare, prezentul studiu a fost întreprins pentru a determina dacă administrarea de NAC și ulei de susan ar avea efecte benefice hipolipidemice și antioxidante într-un model murin care consumă o dietă chow, îmbogățit cu colesterol și acid colic.
Metode
Animale
Șoareci masculi C57bl/6 de 12 săptămâni (Mușchiul mus) au fost obținute de la Institutul Alexander Fleming (Vari, Grecia) și au fost aclimatizate timp de o săptămână înainte de începerea experimentului. Animalele au fost adăpostite în condiții de temperatură controlată (23 ± 2 ° C) și umiditate (60%) cu un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore. Protocolul experimental a fost revizuit și aprobat de către Direcția Veterinară din Prefectura Atenei și de Comitetul de Etică al Școlii de Medicină a Universității Naționale și Kapodistriene din Atena, în conformitate cu recomandarea etică a Directivei Consiliului Comunităților Europene din 24 noiembrie 1986 ( 86/609/CEE).
Proiectare experimentală
Un total de 25 de șoareci au fost împărțiți în următoarele 4 grupuri experimentale:
Șoarecii au avut acces gratuit la mâncare și băutură pe tot parcursul studiului. În perioada de 8 săptămâni, consumul de alimente a fost monitorizat zilnic, în timp ce cantitatea de apă consumată zilnic a fost înregistrată și în grupul HCN. Șoarecii erau cântăriți o dată pe săptămână.
Recoltarea sângelui și măsurarea lipidelor serice
Probele de sânge de șoareci au fost colectate la începutul și la sfârșitul perioadei experimentale (la ora 9:00, după o perioadă de 12 ore de post), folosind tuburi capilare introduse în plexul venos retro-orbital medial sub anestezie cu eter ușor. O cantitate de aproximativ 150-200 μl de sânge a fost colectată de la fiecare șoareci la începutul experimentului. O cantitate mai mare de sânge (400 - 500 μl) a fost colectată la sfârșitul experimentului și înainte de eutanasierea șoarecilor. Serul a fost separat prin centrifugare la 3000 rpm timp de 10 min și a fost depozitat la -80 ° C până la analiză.
Concentrațiile serice ale colesterolului total și ale trigliceridelor au fost determinate utilizând trusa comercială enzimatică PAP („bioză” - Aplicații biotehnologice, Atena, GR) și HDL-colesterolul a fost determinat printr-o metodă fotometrică enzimatică a colesterolului. Colesterolul LDL a fost determinat de modelul matematic „LDL-colesterol = Colesterol total- (HDL-colesterol + Trigliceride/5)”.
Toate probele au fost analizate la Laboratorul de Chirurgie Experimentală și Cercetare al Facultății de Medicină din Atena (Atena, Grecia).
Peroxidarea lipidelor serice - determinarea nivelurilor de NO
Concentrația totală de peroxid în serul colectat a fost evaluată fotometric (kit PerOx, Immundiagnostic AG, Bensheim, Germania). Oxidul azotic seric total (NO) a fost calculat pe baza conversiei enzimatice a nitraților în nitriți cu nitrat reductază, utilizând un kit comercial (Kit de testare a parametrilor de oxid nitric total și nitrat/nitrit, SISTEME R&D, Minneapolis, MN, S.U.A.).
Colorarea histopatologică
La sfârșitul perioadei de 8 săptămâni, animalele au fost eutanasiate sub anestezie eterică cu ficatul și aortele disecate imediat pentru analize histopatologice ulterioare. O parte din ficat și aortă au fost fixate în formalină 10% la temperatura camerei. Țesuturile au fost apoi încorporate în parafină, secționate și montate pe lamele de microscop de sticlă. Secțiunile au fost colorate cu hematoxilină-eozină și examinate orbește de doi cercetători independenți folosind microscopie cu lumină. Mai precis, ficatul a fost evaluat așa cum a fost descris anterior de Comitetul de patologie al rețelei de cercetare clinică a steatohepatitei nealcoolice [8]. Trăsăturile histologice au fost grupate în 4 mari categorii: steatoză, balonare, inflamație portală și activitate lobulară. Fiecărui parametru i s-a atribuit un scor de la 0 (absență) la 3 (leziune severă).