Colesterol eClinpath

Colesterolul este cel mai frecvent steroid din organism. Este un important precursor al esterilor colesterolului, acizilor biliari și hormonilor steroizi. Este derivat din surse dietetice și sintetizat in vivo din acetil-CoA în ficat (site-ul principal) și în alte țesuturi (intestine, glande suprarenale și organe de reproducere). Măsurarea colesterolului poate oferi o indicație a funcției hepatice, a bolilor gastro-intestinale și a tulburărilor metabolice.

acizi grași

Fiziologie

Colesterolul apare în sânge ca parte a tuturor lipoproteinelor, dar fracțiunile de densitate scăzută (LDL) și lipoproteine ​​de densitate mare (HDL) au cele mai mari concentrații. LDL-urile sunt formate din lipoproteine ​​cu densitate foarte mică (VLDL) de lipoproteinele lipazei endoteliale. Aceștia sunt responsabili de transportul colesterolului către țesuturile periferice, prin legarea la receptorii LDL de pe aceste țesuturi, de ex. glandele suprarenale, ovarul și testiculele. HDL-urile sunt sintetizate în ficat și tractul gastro-intestinal și transportă colesterolul din țesuturi în ficat (așa-numitul transport „invers” al colesterolului, despre care se crede că este minim la câini din cauza lipsei unor enzime transferază). Odată ajuns în ficat, colesterolul poate fi încorporat în VLDL, sintetizat în acizi biliari, esterificat în acizi grași cu lanț lung sau eliminat în bilă. Bila este principala cale de excreție a colesterolului.

Rețineți că lipemia vizibilă într-o probă de sânge se datorează de obicei creșterii trigliceridelor, nu datorită creșterii colesterolului.

Metodologie

O varietate de teste enzimatice automate sunt utilizate pentru a cuantifica concentrația de colesterol din sânge. Majoritatea analizelor utilizate pentru determinarea concentrației de colesterol sunt colorimetrice, în timp ce altele utilizează electrozi de detectare a O2 pentru cuantificarea nivelurilor de colesterol. Metoda CHOD-PAP a colesterolului îndeplinește standardele pentru măsurarea concentrației de colesterol în ser sau plasmă stabilite de Institutul Național de Sănătate (NIH) și este metoda utilizată la Universitatea Cornell.

Tipul de reacție

Procedură utilizată la Universitatea Cornell

  • Metoda CHOD-PAP a colesterolului: În prima etapă a acestei reacții în trei etape, enzima colesterol esterază hidrolizează esterii colesterolului pentru a produce acizi grași liberi și colesterol. În etapa următoare, colesterol oxidaza catalizează oxidarea colesterolului la cholest-4-en-3-one. Sub acțiunea catalitică a peroxidazei, peroxidul de hidrogen produs în reacția anterioară oxidează cromoforul 4-aminofenazonă, în prezența fenolului, la compusul colorant roșu 4- (p-benzoquinonă-monoimino) -fenazonă. Modificarea intensității culorii la 500-550 nm este măsurată fotometric și este direct proporțională cu concentrația de colesterol din probă.