Codul de bare ADN al unui coral de recif clandestin în comerțul internațional cu acvarii are ca rezultat un nou
Abstract
Coralii morți și bolovanii de calcar care acționează ca substrat pentru exemplarele vii de nevertebrate marine și alge sunt vândute ca „roci vii” în comerțul internațional cu acvarii. În timpul unei inspecții vamale a unui transport aerian de „rocă vie” pe aeroportul Schiphol (Olanda), 450 de bolovani importați din Indonezia au fost verificați pentru prezența unor organisme nedeclarate. În timpul despachetării, aproximativ 50% din bolovani păreau să aibă corali mici pietroși atașați la ele. Unii dintre acești corali aparțineau unei specii necunoscute din Indonezia. COI mitocondriale și markerii ITS nucleari au dezvăluit 100% și 99,3% potrivire cu Polycyathus chaishanensis Lin și colab., 2012, o specie raportată din bazinele de maree din Taiwan. Această nouă înregistrare de distribuție sugerează că, în ciuda accesului lor ușor, ansamblurile de corali subtidale intertidale și superficiale (
Introducere
Există un comerț internațional extins cu aceste „roci vii”. Ele erau inițial exportate din țări tropicale precum Fiji, Indonezia și Filipine, în timp ce comerțul SUA putea obține aprovizionări din Florida și Hawaii (Bruckner 2001; Lovell 2001; Parks și colab. 2003; Rhyne și colab. 2009; Lemn et. al. 2012). În ultimele două decenii, au fost înregistrate țări exportatoare suplimentare, cum ar fi Australia, Brazilia, Cuba, Haiti, Palau, Samoa, Tonga, Vanuatu și Vietnam, indicând faptul că recoltarea „rocii vii” a fost larg răspândită din cauza creșterii economice cerere (Tabelul 1; Harriott 2001; Wabnitz și colab. 2003; Gasparini și colab. 2005; Rhyne și colab. 2012; Gurjão și Lotufo 2018). Deoarece organismele care locuiesc pe „roci vii” sunt păstrate în viață atunci când sunt transportate pe distanțe mari, ele pot forma o amenințare ca potențiale specii invazive în zone noi (Padilla și Williams 2004; Bolton și Graham 2006; Walters și colab. 2006; Morrisey și colab. . al. 2011) sau ca specii de dăunători în noile lor habitate de acvariu (Rhyne și colab. 2004; Calado și Narciso 2005).
Pentru a examina dacă astfel de organisme atașate aparțin unor specii străine, codul de bare ADN (Hebert și colab. 2003) poate fi aplicat pentru identificarea lor (Wehr 2017; Vranken și colab. 2018). Această metodă reprezintă un instrument rapid, simplu și economic pentru identificarea organismelor bazate pe secvențe de ADN și a fost folosită cu succes, de exemplu, pentru descoperirea comerțului ilegal și a speciilor străine de taxoni marini (Collins și colab. 2012; Bunholi și colab. 2018). Poate fi, de asemenea, utilizat pentru a verifica dacă organismele importate sau produsele obținute din acestea aparțin unor specii protejate conform CITES (Staats et al. 2016). Prezentul studiu raportează aplicarea metodologiei ADN-cod de bare pentru a ajuta la identificarea coralilor scleractinici din Indonezia care au fost importați accidental în Olanda.
Material si metode
În timpul unei inspecții vamale a unui transport aerian de „rocă vie” pe aeroportul Schiphol (Olanda) la 22 octombrie 2012, 450 de bolovani de corali importați din Indonezia au fost verificați pentru prezența organismelor nedeclarate (Fig. 1, ESM Fig. S1 - S6 ). Conform documentelor însoțitoare, transportul a constat din 80 de cutii și a avut o greutate de 4050 kg și o valoare totală de 10.600 USD (inclusiv costurile de transport). Bolovanii (declarați ca „piatră naturală” și „substrat/scleractinieni neidentificați”) au fost păstrați în stare umedă în interiorul recipientelor din polistirol, care au fost ambalate în cutii de carton. Ambalarea a fost făcută cu 2 zile înainte de sosire.
A Bolovan de corali mort expediat ca „rocă vie”, supus inspecției vamale la Aeroportul Schiphol (bară de scară: 5 cm); , c Specimen viu de Polycyathus chaishanensis: polipi văzuți de sus () și deoparte (c); d, e Scheletul aceluiași specimen după curățarea în înălbitor de uz casnic; polipi văzuți de sus (d) și deoparte (e); catalog nr. RMNH.COEL.42435. Bare de scară -d, 5 mm
În timpul despachetării, aproximativ 50% din bolovani păreau să aibă corali scleractinieni mici atașați la ele (Fig. 1). Unii corali aparțineau unei specii necunoscute din Indonezia, iar unul dintre aceștia (Fig. 1b, c), cu un diametru al coloniei de 2,8 cm, a fost prelevat și supus codului de bare ADN pentru identificarea speciilor. În detaliu, extracția ADN-ului a fost efectuată în laboratorul molecular Naturalis cu kitul DNeasy Blood and Tissue (Qiagen Inc., Hilden, Germania). Au fost selectați doi loci pentru codificarea în bare ADN, o porțiune a citocromului mitocondrial c subunitatea oxidază I (COI, parțial) și o selecție de ADNr nuclear (ITS, inclusiv întregul ITS1, 5.8S, ITS2 și un fragment de 18S și 28S). COI a fost amplificat folosind primerii fungCOIfor1 (5'-CTG CTC TTA GTA TGC TTG TA-3 ') și fungCOIrev2 (5'-TTG CAC CCG CTA ATA CAG-3') (Gittenberger și colab. 2011) și ITS folosind primerii ITS4 (5′-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3 ′) (White și colab. 1990) și A18S (5′-GAT CGA ACG GTT TAG TGA GG-3 ′) (Takabayashi și colab. 1998). Amplificările au fost efectuate într-un amestec de reacție PCR de 12,5 ml conținând 0,2 mM din fiecare primer, 2 X Multiplex PCR Master Mix (Qiagen Inc., Hilden, Germania) și
rezultate si discutii
Majoritatea coralilor atașați la „roca vie” importată ar putea fi ușor identificați la nivel de gen sau specie, cum ar fi Coeloseris mayeri Vaughan, 1918 și Pavona sp. (ambele Agariciidae), Cyphastrea sp. și Merulin sp. (ambele Merulinidae), Montipora sp. (Acroporidae), Psammocora sp. (Psammocoridae) și Porites sp. și Stylaraea punctata (Linnaeus, 1758), ambii Poritidae. Stylaraea punctata este tipic pentru zonele intertidale puțin adânci (Kitano și colab. 2014; Richards și colab. 2015) și răspândit în Indonezia (Hoeksema 2004).
O specie din transportul investigat a fost necunoscută pentru Indonezia și a necesitat analize suplimentare pentru identificarea acesteia. Țesutul moale al acestui coral a arătat o culoare maro (Fig. 1b - d), sugerând că este zooxantelat. Teca calicilor tubulari a fost aproape complet acoperită de alge coraline încrustate (Fig. 1d). Forma sa de coral a fost de acord cu cea a Polycyathus Duncan, 1876 (Caryophylliidae), un gen de 19 specii recunoscute la nivel mondial (Hoeksema și Cairns 2018). Multe dintre aceste specii sunt cunoscute exclusiv din apele adânci și, prin urmare, toate acestea sunt considerate de obicei ca corali azooxanteliți (de exemplu, Cairns și colab. 1999; Cairns și Kitahara 2012).
Este într-adevăr remarcabil faptul că P. chaishanensis nu a fost raportat din alte localități, în ciuda apariției sale în bazine de maree de mică adâncime și apartamente de recif, așa cum sa raportat din Taiwan (Lin și colab. 2012; Kuo și colab. 2019). Această lipsă de înregistrări sugerează că habitatele recifale de mică adâncime din tropice, în ciuda accesului lor ușor, ar putea fi studiate și ar putea găzdui specii observate mai rar. Deoarece majoritatea cercetătorilor de corali folosesc echipamente SCUBA la adâncimi de peste 3 m, ei pot trece cu vederea speciile de corali care apar în habitatele intertidale și subtidale de mică adâncime (
Referințe
Alcock A (1893) Pe niște corali nou-înregistrați din Marea Indiană. J Asiat Soc Bengal (Nat Hist) 62: 138-149
Best MB (1997) Comerț cu corali și pietre vii. În: den Hartog JC (ed.) Proceedings of the 6th International Conference on Coelenterate Biology, Noordwijkerhout, 1995. Muzeul Nationaal Natuurhistorisch, Leiden, pp. 47–52
Bolton TF, Graham WM (2006) Meduze pe pietre: amenințarea bioinvaziei comerțului internațional cu roci vii din acvariu. Biol Invasions 8: 651-653
Bruckner AW (2001) Urmărirea comerțului cu organisme ornamentale de recif de corali: importanța CITES și limitările sale. Aquar Sci Conserv 3: 79-94
Bunholi IV, da Silva Ferrette BL, De Biasi JB, de Oliveira MC, Rotundo MM, Oliveira C, Foresti F, Mendonça FF (2018) Pescuitul și comerțul ilegal al angelshark: cod de bare ADN împotriva identificărilor înșelătoare. Fish Res 206: 193–197
Cairns SD (1999) Cnidaria Anthozoa: Scleractinia azooxantelată de apă adâncă din Vanuatu și Insulele Wallis și Futuna. În: Crosnier A (ed.) Rezultatele campaniilor MUSORSTOM 20. Mamm Mus Natl Hist Nat Ser Ser A Zool 180: 31–167